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早产儿视网膜病危险因素的前瞻性多中心队列研究被引量：15: 2011年; 目的通过多中心调查，前瞻性研究早产儿视网膜病（ROP）发病相关危险因素。方法将2005年1月1Et至2006年2月28日在ROP协作网内11家医院出生或收治的出生体重〈2000g的早产儿或低出生体重儿纳入研究，按时进行ROP筛查，并记录完整的临床资料，调查ROP发病率，分析相关危险因素。结果882例早产儿纳入研究，完成ROP随访752例，123例发生ROP（16．4％）。ROP组出生时平均胎龄为（30．82±0．20）周，平均出生体重（1430±25）g，平均吸氧时间为（11．6±1．4）d；无ROP组出生时平均胎龄（32．56±0．09）周，平均出生体重（1636±10）g，平均吸氧时间为（4．4±0．3）d。单因素分析提示窒息[相对危险度（RR）=1．462]、吸氧时间〉5d（职=2．644）、肺表面活性物质的应用（RR：1．880）、肺炎（RR=2．138）、贫血（RR=3．039）、呼吸窘迫综合征（NRDS，RR=2．325）和酸中毒（RR=1．507）与ROP相关（均P〈0．05），多因素分析提示出生体重[比值比（OR）=0．998]、呼吸暂停（OR=1．653）和输血（OR=1．763）是ROP独立作用的因素（均P〈0．05）。结论在诸多因素中，窒息、吸氧、贫血、NRDS、酸中毒与ROP相关，出生体重、呼吸暂停、输血是ROP独立危险因素。; 朱丽石文静张淑莲虞乐萍姚明珠施婴婴曾雪芹王三南陈冬梅林振浪阮芳箐黄绮薇钱燕陈超; 关键词：视网膜病早产儿多中心研究

重组人色素上皮衍生因子在真核细胞SP2／0中的瞬时表达及活性鉴定: 2011年; 目的构建抑制早产儿视网膜病新生血管形成的重组人色素上皮衍生因子（pigment epithelium—derived factor，PEDF）真核表达载体，检测其在小鼠骨髓瘤细胞SP2／0中的瞬时表达。方法根据已知的GenBank中人PEDFcDNA成熟蛋白编码区序列设计特异性引物，以全基因合成的pUC57-PEDF质粒为模板，经聚合酶链反应技术扩增人PEDF基因，定向克隆至真核表达载体pIRESneo3中，获得重组表达质粒pIRESneo3-PEDF。将重组质粒pIRESneo3-PEDF与脂质体转染试剂Lipofectamine^TM 2000混合后转染小鼠骨髓瘤细胞SP2／0，采用酶联免疫吸附试验及Western印迹对表达产物进行鉴定。收集转染细胞培养液上清，采用四甲基偶氮唑盐比色法检测重组PEDF活性。结果聚合酶链反应技术、酶切鉴定和测序结果表明，pIRESneo3PEDF表达载体构建成功。脂质体法将表达质粒成功转染到SP2／0中，经培养，可分泌表达PEDF，且经Western印迹检测证明为人PEDF，分子量为50000。转染36h上清液中PEDF浓度最高，为（0．92±0．04）ug／ml。转染36h细胞培养液上清对人脐静脉内皮细胞的抑制作用最强（P〈0．05）。结论成功构建人PEDF真核表达质粒pIRESneo3PEDF，转染细胞可瞬时分泌表达有活性的人PEDF，对人脐静脉内皮细胞增殖有抑制作用，为开展下一步稳定转染表达及蛋白纯化奠定基础，为早产儿视网膜病的防治带来新的希望。; 戴仪石文静王羽雄于敏陈超; 关键词：神经生长因子类舍平类真核细胞

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国家自然科学基金(30500545)

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