珠海市软科学研究计划项目(PC20081078)
- 作品数：12 被引量：135H指数：10
- 相关作者：喻国辉程萍黎永坚陈燕红周林更多>>
- 相关机构：珠海市农业科学研究中心华中农业大学中山大学更多>>
- 发文基金：珠海市软科学研究计划项目广东省教育部产学研结合项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 枯草芽孢杆菌TR21对香蕉抗病相关基因表达的诱导作用被引量：12
- 2012年
- 广谱抗真菌枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis菌株TR21在温室和大田对香蕉枯萎病具有较好的防效,其机制已证明与诱导香蕉产生系统抗性有关。本文以巴西蕉(Musa AAA Cavendish subgroup cv.Brazil)为材料,利用半定量RT-PCR法,以香蕉25S rRNA基因为内标,研究灌根接种菌株TR21后对香蕉根系4种抗病相关基因表达的影响。结果表明,PAL、POD、PR-3和PR-1基因在接种后表达水平均表现上调趋势,但PAL和POD基因的表达增幅明显高于PR-3和PR-1基因。PAL和POD基因在接种后12 h表达量最高,与TR21在香蕉根部的定殖规律表现出一致性。系统诱导抗性是枯草芽孢杆菌TR21防治香蕉枯萎病的机制之一。
- 喻国辉周林程萍黎永坚杨紫红
- 关键词：香蕉枯草芽孢杆菌抗病相关基因半定量RT-PCR
- 1株广谱抗真菌芽孢杆菌TR21的鉴定被引量：12
- 2010年
- 利用API50CH鉴定系统、16S rDNA、gyrA和gyrB基因序列分析法,对1株分离自石斛兰叶片的广谱抗真菌芽孢杆菌TR21进行生化和分子鉴定。通过API50CH系统测试,TR21菌株与枯草芽孢杆菌相似性为90.3%,被鉴定为枯草芽孢杆菌。利用16SrDNA序列分析发现TR21菌株与枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、B.subtilis subsp.subtilis、B.subtilis subsp.spizizenii和B.velezensis的相应核苷酸序列具有很高的同源性,其序列相似性皆为99%,而基于gyrA和gyrB基因序列构建的系统发育树显示,该菌株与枯草芽孢杆菌的相似性分别为96%和91%。结合16SrDNA、gyrA和gyrB基因序列分析,也确定该菌为枯草芽孢杆菌。比较API鉴定和基于不同基因的鉴定发现,分子鉴定更加快速、灵敏。
- 周林程萍沈汉国陈燕红牛春燕喻国辉
- 关键词：枯草芽孢杆菌RDNAGYRA基因
- 绿色荧光蛋白标记的枯草芽胞杆菌R31在西芹根际定殖研究被引量：11
- 2014年
- 为了更直观地了解植物内生枯草芽胞杆菌R31在西芹根际定殖情况,评估其定殖能力,为西芹黄萎病生物防治提供依据。通过原生质体转化法将携带绿色荧光蛋白基因的质粒pHT315-gfp导入枯草芽胞杆菌R31细胞中,对菌株进行gfp标记,然后利用gfp标记菌株灌根处理西芹苗,研究其在西芹根际的定殖形式和能力。结果获得了携带pHT315-gfp质粒的R31-gfp菌株,该质粒可以在R31细胞中稳定表达,标记菌R31-gfp在蓝光激发下可以稳定发出强的绿色荧光。利用标记菌接种西芹幼苗后,可以在根系表皮检测到绿色荧光膜。对其定殖量的检测发现,接种3天后标记菌在根表和根际土中稳定定殖,定殖量分别达到1.4×104cfu/g和7.6×104cfu/g,并长期以该水平稳定定殖,到第65天仍可在根表和根际土检测到9.1×104cfu/g和3.17×105cfu/g的R31-gfp。由此得出,R31可以在西芹根表形成菌膜,并在根际长期稳定定殖。
- 陈燕红黎永坚喻国辉陈远凤
- 关键词：枯草芽胞杆菌定殖
- 枯草芽孢杆菌TR21对香蕉抗病相关酶活的诱导作用被引量：19
- 2011年
- 为筛选能显著诱导香蕉抗病相关酶活变化的枯草芽孢杆菌TR21(Bacillus subtilis)发酵液组分,并探讨其诱导香蕉抗病性机理,选择多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(POD)和苯丙氨酸解氨酶(PAL)作为植物抗病性反应指标,采用灌根接种法,研究1株在大田对香蕉枯萎病具有良好防效的枯草芽孢杆菌TR21发酵液不同组分对香蕉根系内3种酶活性的影响。结果表明,接种TR21发酵液、菌体、上清和NB培养基后,香蕉根系内PPO、POD和PAL活性均比无菌水对照高,且都出现2次高峰,PPO、POD活性峰在接种后第3天和第7天出现,PAL活性峰则在接种后1天和5天时出现。比较不同组分接种处理诱导产生的酶活性强弱发现,接种TR21发酵液、菌体的3种酶活性均明显高于接种上清和NB的处理。可以判断TR21发酵液中主要有效诱导组分为菌体。灌根法接种TR21菌体后测定香蕉叶片中3种抗病酶的活性表明,菌体处理后叶片中PPO、POD和PAL活性均显著高于接种无菌水的对照,推测诱导系统抗性可能是TR21菌株防治香蕉枯萎病的机制之一。
- 周林程萍喻国辉黎永坚杨紫红
- 关键词：香蕉枯草芽孢杆菌酶活性诱导系统抗性
- 枯草芽孢杆菌TR21在香蕉体内及根际的定殖动态被引量：18
- 2010年
- 为了解不同方式接种下枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)TR21在香蕉体内及根际的定殖情况,采用伤根、灌根和叶腋接种法,研究了TR21标记菌株在香蕉体内、根表和根际土壤中的定殖动态。结果表明,采用伤根和灌根法接种,根内最大定殖菌量分别为4.18×103cfu/g、2.28×103cfu/g,接种后1天,球茎中菌量分别为3.33×106cfu/g、6.5×102cfu/g,接种后15天,根表菌量分别为6.18×103cfu/g、5.53×103cfu/g,根际土壤中菌量分别为1.13×104cfu/g、1.04×104cfu/g;2种接种方法中,标记菌株在香蕉体内及根际的定殖动态总体呈下降趋势。采用叶腋法接种,标记菌株仅能在叶片中定殖,其定殖动态表现为"由升到降"趋势。因此,3种方式接种后TR21菌株均能够在香蕉体内定殖和传导,且在香蕉根表和根际土壤中有较好的定殖能力。
- 周林程萍喻国辉黎永坚杨紫红
- 关键词：香蕉枯萎病枯草芽孢杆菌定殖
- 枯草芽孢杆菌R31和TR21菌株防治香蕉枯萎病田间药效试验被引量：13
- 2012年
- 研究了枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)R31菌株和TR21菌株单独及混合使用防治农科1号香蕉(Musa AAA Cavendishsubgroup cv.Nongke No.1)枯萎病的田间效果。收获期结束后统计的结果表明,R31处理区香蕉枯萎病发病率为4.05%,TR21处理区发病率为8.70%,TR21+R31(V:V=1:1)处理区发病率4.59%,对照区发病率21.88%,防效分别为81.86%、61.09%和79.45%;折算每667m2经济损失率比对照分别减少34.46%、25.90%、32.50%。研究结果表明两株枯草芽胞杆菌具有较好的应用前景。
- 黎永坚程萍喻国辉陈燕红
- 关键词：香蕉枯萎病生物防治枯草芽孢杆菌
- 枯草芽孢杆菌TR21田间防治巴西蕉枯萎病的效果被引量：19
- 2010年
- 本文研究了植物内生枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis TR21菌株灌根对巴西蕉(Musa AAA Cavendish subgroup cv. Brazil)枯萎病的大田防治效果。试验持续开展了两轮。第一轮以新植苗为防治对象,防效达到63.23%,折算的每667m2经济损失率比对照减少8.23%。第二轮以吸芽为处理对象,设3个处理区,处理区1为第一轮灌根的延续,处理区2和3则选择第一轮生产周期未作处理的吸芽,分别用TR21和50%多菌灵600倍液(设为对照)灌根,结果表明处理区1的防效为73.90%,处理区2的防效为63.23%,折算的每667m2经济损失率分别比对照减少31.23%和29.29%。初步田间试验显示菌株TR21对巴西蕉枯萎病具有较好防效,用其发酵稀释液持续灌根或在巴西蕉生长早期灌根有利于提高其对巴西蕉枯萎病的防效。
- 喻国辉程萍王燕鹂陈远凤陈燕红黎永坚
- 关键词：枯草芽孢杆菌生物防治
- 一株香蕉枯萎病生防芽胞杆菌的鉴定、生物学特性和抗菌谱研究被引量：15
- 2010年
- API生化鉴定系统对生防芽胞杆菌R31进行鉴定,并研究了该菌株的生物学特性和抗菌谱。结果表明:R31菌株被鉴定为枯草芽胞杆菌,生物学特性数据显示该菌株适宜偏酸或偏碱条件生长,偏酸环境的最佳生长pH为5.13,偏碱环境的最佳pH为8.99,最佳碳源为蔗糖,最佳氮源为酵母浸提物,NA培养基测定的生长曲线显示24h内该菌株生长达到稳定期;抗菌谱研究显示该菌株在平板上对包括多株香蕉枯萎病菌在内的多种植物病原镰刀菌具有明显的抑制效果,主要引起病原菌菌丝肿胀畸形,原生质浓缩,以及菌丝破裂原生质外流。
- 喻国辉程萍王燕鹂陈远凤陈燕红黎永坚
- 关键词：枯草芽胞杆菌香蕉枯萎病生物学特性抗菌谱
- 珠海香蕉枯萎病菌遗传多样性的AFLP分析被引量：6
- 2012年
- 为了解广东省珠海地区香蕉枯萎病菌（Fusarium oxysporumf.sp.cubense）的种群分化和遗传变异规律,采用AFLP技术对来自珠海、湛江、台山的20株尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum）进行DNA指纹分析,以1株分离自粉蕉的木贼镰刀菌（F.equiseti）为外参。20株尖孢镰刀菌中17株来自珠海,包括3株非致菌、2株香蕉枯萎病1号生理小种、12株香蕉枯萎病4号生理小种,2株来自湛江的为香蕉枯萎病4号生理小种,1株来自台山的为香蕉枯萎病1号生理小种。8对AFLP引物对供试菌株扩增出253条带,其中多态性带97条,占总带数的38.34%,供试菌株的遗传距离变化在0.21~0.99,平均为0.85。利用NTSYSpc软件中的UPGMA算法构建了21株镰刀菌的AFLP亲缘树状图,聚类结果表明：供试菌株被聚为3个大的类群,分别为1号生理小种、4号生理小种以及非致病性尖孢镰刀菌。亲缘关系分析结果表明：1号生理小种内菌株间的遗传分化大于4号生理小种,其聚类结果与菌株的地理来源有一定的相关性。总体而言,珠海地区香蕉枯萎病菌的遗传多样性较为丰富。
- 汤浩喻国辉程萍曹永军
- 关键词：香蕉枯萎病扩增片段长度多态性
- 利用16S rDNA结合gyrA和gyrB基因对生防芽孢杆菌R31的快速鉴定被引量：55
- 2010年
- 克隆16S rDNA、DNA促旋酶A亚基编码基因gyrA和B亚基编码基因gyrB对分离自石斛兰(Dendrobiumsp.)叶片的广谱抗真菌生防芽孢杆菌R31进行鉴定。首先通过生理生化测定和克隆16S rDNA序列,分析显示其属于芽孢杆菌属(Bacillus),但不能准确鉴定到种;然后分别利用克隆的gyrA基因和gyrB基因以及其BLAST分析结果构建系统发育树,最终将该菌株确定为枯草芽孢杆菌(B.subtilis)。结果显示利用16S rDNA与gyrA基因组合可以快速鉴定枯草芽孢杆菌,利用16S rDNA与gyrB基因组合可以快速鉴定枯草芽孢杆菌及其近缘种。
- 喻国辉牛春艳陈远凤陈燕红杨紫红
- 关键词：芽孢杆菌RDNAGYRA基因
