陕西省教育厅自然科学基金(09JK777)
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
- 相关作者：王永勤黄丛林王玉华吴忠义张秀海更多>>
- 相关机构：西北大学北京市农林科学院农业生物技术研究中心更多>>
- 发文基金：陕西省教育厅自然科学基金北京市自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- phaG和phaC基因在烟草叶绿体中的转化及其遗传分析被引量：1
- 2009年
- 中长链羟基脂肪酸聚酯(medium-chain-length-PHAs,mcl-PHAs)属于微生物聚酯。羟酰-CoA-ACP-转移酶和II型PHA合酶是mcl-PHAs生物合成途径中的两个关键酶。将编码羟酰-CoA-ACP-转移酶的基因phaG与水稻叶绿体psbA基因的启动子和终止子连接构建表达盒RpsbA-pro-phaG-RpsbA-ter,将II型PHA合酶的基因phaC与水稻叶绿体16SrRNA基因的强启动子Prrn及rbcL基因的终止子连接构建表达盒prrn-phaC-RrbcL-ter,连同壮观霉素抗性基因aadA表达盒prrn-aadA-TpsbA-ter一起克隆进烟草叶绿体基因组同源片段rbcL和accD之间,得到烟草叶绿体表达载体pTGC。用包裹有质粒pTGC的金粉子弹轰击烟草无菌苗叶片,经壮观霉素筛选后获得6株叶绿体型转基因植株。对T0代和T1代转基因植株进行PCR检测和Southern blot分析表明,外源基因已整合进烟草叶绿体基因组中,且T1代转基因植株已同质化。RT-PCR分析结果证实外源基因已在转录水平上表达。转基因植株的自交及正反交结果表明,外源基因在转基因后代中能够稳定遗传,遗传方式遵循母性遗传规律,不存在转基因的花粉漂移现象。
- 王玉华吴忠义张秀海王永勤黄丛林贾敬芬
- 关键词：烟草叶绿体转化
