国家重点基础研究发展计划(2011-CB200900-G)
- 作品数：10 被引量：31H指数：5
- 相关作者：高剑峰龚春霞李芳芳王丹苟亚峰更多>>
- 相关机构：石河子大学中国海洋大学更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学化学工程动力工程及工程热物理更多>>
- 塔克拉玛干沙漠生物结皮中几种藻类的系统发育分析被引量：7
- 2014年
- 新疆塔克拉玛干沙漠中富含多种沙漠藻类,严酷的沙漠环境造就了这些沙漠微藻独特的生物学特性,但对于这些沙漠微藻的研究,相关报道较少。本研究以新疆塔克拉玛干沙漠沙样为素材,通过实验室培养,以有限稀释法和平板法进行分离,分离得到6株沙漠微藻。形态学观察后初步鉴定5株属于绿藻门(TLD2A1,TLD2B,TLD7A-2,TLD6B,TLD7B-5),1株为蓝藻门(TLD5A1)。分别比对分析了5株绿藻的18SrDNA和其中3株的5.8SrDNA-ITS序列,1株蓝藻TLD5A1的16SrDNA序列,并进行了系统发育分析。结果表明,TLD2A1和TLD6B与小球藻科物种亲缘关系很近,TLD2B和衣藻科物种亲缘关系很近。TLD7B-5形态呈新月形,分子鉴定与环藻科物种亲缘关系较近,TLD5A1与念珠藻科的物种聚为一支,同时与念珠藻属的椭孢念珠藻同源性高达97%。本研究确定了6株沙漠微藻的分类地位,为后续塔克拉玛干沙漠微藻的研究工作提供理论依据。
- 王丹龚春霞苟亚峰周路朱军保高剑峰
- 关键词：塔克拉玛干沙漠绿藻蓝藻系统发育
- 5种沙漠微藻的分离鉴定及其18S rDNA保守区片段差异分析被引量：13
- 2012年
- 为了研究古尔班通古特沙漠中微藻的种类,采用96孔板有限稀释法,从该沙漠采集的沙样中分离出5种不同的微藻,并通过形态学特征初步鉴定为绿藻门。根据GenBank中绿藻门不同科属藻类的18S核糖体RNA基因(18S rDNA)保守区设计18S特异性引物,分别对5种微藻的基因组进行PCR扩增18S rDNA片段,经克隆测序、blast n比对、系统发育树构建及遗传距离值分析,将5种微藻初步鉴定到属。结果表明:从该沙漠分离得到的5个微藻物种分别来自绿藻门不同的科属,其中一个物种极可能为新物种。
- 李芳芳隋正红龚春霞陈芳高剑峰
- 关键词：古尔班通古特沙漠微藻绿藻门RDNA
- 新疆沙漠高脂微藻的筛选被引量：1
- 2014年
- 为从新疆沙漠中筛选高脂微藻,对新疆古尔班通古特沙漠和塔克拉玛干沙漠分离鉴定的12株微藻在初始接种量一致和相同培养条件下,对其收获并冷冻干燥,测定生物量与总脂含量。结果表明:TLD2A1、TLD7B-5、GTD3a-5 3株微藻生物量比较大,依次为650、600、580 mg/L;微藻藻株GTD3a-5总脂含量最高,达33.2%;脂肪酸组成分析可知GTD3a-5油脂富含C16、C17和C18系脂肪酸。以总脂收获量为综合评价指标对12株微藻进行分析,确定藻株GTD3a-5为一株具有产油潜力的微藻藻株。
- 朱军保王丹苟亚峰汪文伦高剑峰
- 关键词：微藻总脂脂肪酸
- 4株沙漠小球藻对几种常用抗生素的敏感性研究被引量：6
- 2014年
- 目的:对分离自新疆沙漠的4株小球藻GTD8A1、GTD4A-1、GTD7C-2和TLD6B进行几种常用基因工程抗生素的敏感性研究,以期筛选出沙漠小球藻基因工程中选择标记的抗生素。方法:运用藻株在液体培养过程中藻体颜色变化和血球板细胞计数的方法,系统性研究沙漠小球藻对几种常用基因工程抗生素的敏感性。结果:4株沙漠小球藻对卡那霉素和链霉素都非常敏感,敏感浓度(细胞致死浓度,下同)均为25μg/m L;对氯霉素也很敏感,GTD8A1、GTD7C-2和TLD6B的敏感浓度也均为25μg/m L,GTD4A-1的敏感浓度为100μg/m L;4株沙漠小球藻对氨苄西林和头孢霉素的敏感性都不是很明显,在一定的浓度范围,氨苄西林和头孢霉素对藻细胞的生长还具有促进作用,当氨苄西林和头孢霉素的浓度很高时才表现出一定的抑制作用。结论:卡那霉素和链霉素可作为沙漠小球藻基因工程选择标记中的2种抗生素,为今后建立其遗传转化系统奠定了基础。
- 朱军保王丹汪文伦许万云高剑峰
- 关键词：小球藻抗生素敏感性
- 一株沙漠小球藻不同培养方式的比较被引量：4
- 2013年
- 选取了一株从古尔班通古特沙漠分离的小球藻GTD8A1，考察了其在不同碳源下的异养能力以及不同培养方式下的生长情况和蛋白质、总脂含量以及脂肪酸组成的变化。结果表明，此株小球藻分别添加5种碳源时，在不同培养方式下均能生长，其中以葡萄糖和乙酸钠为外加有机碳源时生长能力最好，异养和兼养的生长周期比自养的生长周期缩短60％～80％，生物量比自养提高2—4倍。在以乙酸钠为碳源异养培养时，其蛋白质含量和脂质含量均比自养培养的高出1．5—2倍。气相色谱分析显示，其自养、兼养和异养培养时C18：3含量很高，尤其是自养时其含量达总脂肪酸含量的70％左右，兼养和异养培养时饱和脂肪酸和单不饱和脂肪酸比例增大，C18：3的比例降低。
- 龚春霞李芳芳苟亚峰王丹高剑峰
- 关键词：古尔班通古特沙漠小球藻自养异养
- 两种沙漠微藻的形态学和分子生物学鉴定被引量：7
- 2013年
- 文中从古尔班通古特沙漠采集的沙样中,运用96孔板有限稀释法分离出两种形态各异的微藻物种GTD8A1和GTD9C2,形态学初步鉴定分别为绿藻门小球藻目和环藻目。利用GenBank中绿藻门不同科属种类序列的18S核糖体RNA基因保守区和28S核糖体RNA基因保守区分别设计18S rDNA特异性引物和5.8S rDNA-ITS区特异性引物。以自行设计的18S rDNA特异性引物与5.8S rDNA-ITS区特异性引物分别对以上两个物种进行PCR和测序后,经blastn比对,系统发育树及遗传距离分析,结果表明GTD8A1可能与Chlo-rella sp.MBIC10595为同一个物种,GTD9C2可能为Desmodesmus multivariabilis种内的一个变种。
- 李芳芳隋正红周伟龚春霞高剑峰
- 关键词：ITS-RDNA小球藻属古尔班通古特沙漠
- 沙漠小球藻转植物表达载体的表达预测被引量：1
- 2016年
- 以建立小球藻(沙漠小球藻)表达系统为目的,为利用小球藻重组表达外源蛋白,以及GFP荧光特性研究沙漠中的小球藻生理及理化性质提供基础方法;同时也探索植物表达载体p CAMBIA2300-35S-OCS能否在沙漠小球藻中表达。通过菌落PCR验证E.coli DH5α是否含有目的基因(GFP基因)的重组植物表达载体p CAMBIA2300-35S-GFP-OCS,然后从E.coli DH5α中提取也构建完成的重组植物表达载体pCAMBIA2300-35S-GFP-OCS;利用电转化的方法将重组植物表达载体p CAMBIA2300-35S-GFP-OCS转入到小球藻细胞中;将电转的小球藻在含有100 mg/L卡那霉素的BBM固体培养基中筛选出单克隆,将单克隆在含有15 mg/L卡那霉素的BBM液体培养基中扩大培养,然后利用PCR和RT-PCR预测绿色荧光蛋白基因(GFP基因)的存在与否和表达情况,再利用SDS-PAGE和荧光倒置显微镜观察绿色荧光蛋白表达情况。通过SDS-PAGE和荧光倒置显微镜观察结果表明绿色荧光蛋白(GFP)在小球藻中表达成功。试验结果表明重组植物表达pCAMBIA2300-35S-OCS能够在小球藻中表达外源蛋白,以及利用GFP的荧光特性研究小球藻的生理生化差异;也为小球藻在沙漠环境上的应用提供基础。
- 汪文伦王丹牟云许万云胡梦薇高剑峰
- 关键词：电转化植物表达载体绿色荧光蛋白
- 4株沙漠土壤衣藻的分离培养及形态和分子鉴定被引量：5
- 2013年
- 从古尔班通古特沙漠和塔克拉玛干沙漠采集沙样,先进行混合培养,混培藻液采用96孔板有限稀释法和平板法,分离到4株微藻(GTD2A,GTD4C,TLD7A-2,3a-5),采用传统形态鉴定方法及18SrDNA片段克隆分别对筛选的4株微藻进行鉴定,并进行系统发育分析。结果表明:通过形态学特征将4株藻初步鉴定为绿藻门、绿藻纲、团藻目、衣藻科。采用分子生物学方法克隆的18SrDNA片段进行复核的结果表明GTD2A2与GenBank数据库中的Chlamydomonas debaryana(FR865608.1)同源性达到了99.92%,说明已经鉴定至种。GTD3a-5、GTD4C、TLD7a-2与GenBank数据库中Chlamydomonas baca(FR865613.1)、C.reinhardtii和Chlamydomonas sp.(FR865563.1)3个藻种的同源性分别达到了98.10%、98.69%和97.65%。研究确定了4株沙漠衣藻的分类地位及其同其它衣藻种的亲源关系,为以后的研究沙漠藻的分子生物学和生理学研究奠定了基础。
- 龚春霞王丹苟亚峰左晓旭李芳芳高剑峰
- 关键词：古尔班通古特沙漠塔克拉玛干沙漠衣藻RDNA
- 反胶束体系中脂肪酶催化乙酸甲酯与棉籽油合成生物柴油被引量：1
- 2013年
- 在丁二酸二酯磺酸钠(AOT)反胶束体系中,采用游离脂肪酶催化棉籽油与乙酸甲酯反应制备生物柴油。考察了AOT浓度、水与AOT的质量比(ζ0)、脂肪酶用量、缓冲溶液pH、乙酸甲酯与棉籽油的摩尔比(r)、反应温度、摇床转速等因素对脂肪酶催化合成生物柴油的影响,并考察了脂肪酶的重复使用性能。经单因素实验及正交实验,得出优化的反应条件:AOT浓度40mmol/L,ζ0=7,脂肪酶用量10mg(溶液体积为2.5mL),缓冲溶液pH=7,r=3,反应温度35℃,摇床转速160r/min。在优化的反应条件下,产物脂肪酸甲酯的单程收率最高可达65.53%。酯交换制备生物柴油的影响因素大小依次为:缓冲溶液pH>反应温度>r>脂肪酶用量>AOT浓度>摇床转速>ζ0。与甲醇和碳酸二甲酯作为酰基受体相比,乙酸甲酯为酰基受体时脂肪酶的稳定性较好。
- 左晓旭李芳芳龚春霞高剑峰
- 关键词：反胶束体系乙酸甲酯棉籽油生物柴油
- 6株沙漠绿藻的粗脂含量及脂肪酸组成研究被引量：1
- 2012年
- 对从古尔班通古特沙漠中分离得到的6株绿藻在同一培养条件下进行扩大培养,生长末期采收,冷冻干燥后,运用分光光度法和气相色谱法对其粗脂含量及脂肪酸组成进行分析。结果表明:所测绿藻样品的粗脂含量为7.8%～26.4%,其中小球藻属GTD8A1生物量最大,GTD7c-2粗脂含量最低,片球藻属生物量和粗脂含量都较高;6株绿藻均含有C16、C17和C18系脂肪酸,主要脂肪酸组成以C16∶0和C18∶3最为丰富,有4株绿藻的C18∶3含量超过40%(占脂肪酸总含量),除链带藻属外,其余5株绿藻不饱和脂肪酸含量占脂肪酸总含量的比例均超过50%。
- 李芳芳龚春霞左晓旭陈芳高剑峰
- 关键词：古尔班通古特沙漠绿藻脂肪酸
