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国家自然科学基金(30873457)

作品数:9 被引量:36H指数:3
相关作者:钟翎陈青杨湘玲何峰袁贤琳更多>>
相关机构:中山大学广州市中医医院广东医学院更多>>
发文基金:国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
相关领域:医药卫生生物学农业科学更多>>

文献类型

  • 9篇中文期刊文章

领域

  • 6篇医药卫生
  • 5篇生物学
  • 1篇农业科学

主题

  • 3篇蛋白
  • 3篇凋亡
  • 3篇受体
  • 3篇细胞
  • 2篇信号
  • 2篇信号通路
  • 2篇原代培养
  • 2篇乳腺
  • 2篇乳腺癌
  • 2篇乳腺癌细胞
  • 2篇神经元
  • 2篇通路
  • 2篇皮层
  • 2篇皮层神经元
  • 2篇周期
  • 2篇细胞凋亡
  • 2篇细胞周期
  • 2篇腺癌
  • 2篇腺癌细胞
  • 2篇癌细胞

机构

  • 8篇中山大学
  • 2篇广州市中医医...
  • 1篇广东医学院
  • 1篇广东天普生化...

作者

  • 8篇钟翎
  • 3篇陈青
  • 3篇杨湘玲
  • 2篇万仙子
  • 2篇袁贤琳
  • 2篇邓春平
  • 2篇张薇
  • 2篇何峰
  • 2篇李屹晨
  • 1篇黄冰
  • 1篇郭中敏
  • 1篇奉文尚
  • 1篇侯永敏
  • 1篇李莎莎
  • 1篇陶建军
  • 1篇彭彦茜
  • 1篇杨得坡
  • 1篇王冬梅
  • 1篇杨成
  • 1篇吕元

传媒

  • 2篇中国实验动物...
  • 1篇生物化学与生...
  • 1篇肿瘤
  • 1篇中山大学学报...
  • 1篇The Ch...
  • 1篇中国生物工程...
  • 1篇中国比较医学...
  • 1篇中国细胞生物...

年份

  • 1篇2012
  • 2篇2011
  • 2篇2010
  • 4篇2009
9 条 记 录,以下是 1-9
排序方式:
NMDA受体的活化调节原代皮层神经元的Wnt/β-catenin信号通路被引量:1
2012年
经典的Wnt/β-catenin信号通路在中枢神经系统突触形成和功能中发挥重要的调节作用。作为兴奋性神经递质的谷氨酸,与其受体结合,参与许多信号调节活动。为了探讨NMDA受体活化对Wnt/β-catenin信号通路的作用,该文利用18 d的C57小鼠胚胎培养皮层神经元(离体10 d),用10μmol/L谷氨酸钠(monosodium glutamate,MSG)和50μmol/L N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)处理细胞,通过蛋白免疫印迹技术或者细胞免疫荧光染色分析Wnt/β-catenin信号通路关键成员。结果发现,NMDA受体的活化能使GSK-3β的Ser9位磷酸化水平增加,活性被抑制,胞浆内β-catenin蛋白降解减少,入核增加,激活下游基因表达。这些结果提示,NMDA受体激活能够上调Wnt/β-catenin信号通路。
彭彦茜万仙子李屹晨李莎莎张薇Tang Shaojun钟翎
关键词:NMDA受体WNT/Β-CATENIN信号通路原代培养皮层神经元
mTOR信号通路及其与阿尔茨海默病的关系被引量:16
2010年
哺乳动物雷帕霉素靶蛋白mTOR是一个进化上十分保守的蛋白激酶,属于PIKK超家族。在细胞内mTOR存在两种功能不同的复合体mTORC1和mTORC2。mTOR主要通过接受上游信号分子Rheb、TSC1/TSC2的调控来整合细胞内外信号,其下游效应器是4E-BP和p70S6K,通过影响特定mRNA的翻译调节细胞的生长和增殖。在神经系统方面,神经元的发育、突触可塑性的调节、学习和记忆的形成都依赖于适当的mTOR通路的活化。新近的研究显示,神经退行性疾病阿尔茨海默病患者表现mTOR通路的异常,在双转基因鼠中,APP和PS1表达与mTOR/P70S6K下调关联,并影响精神状态评分。mTOR信号通路生理功能和调节机制的研究对了解AD的发病机理和寻找药物靶点具有重要意义。
汝文娟唐少君钟翎
关键词:MTOR增殖分化阿尔茨海默病
NMDA受体激活引起的突触活动对Wnt非经典通路的影响被引量:2
2011年
目的探讨NMDA受体激活引起的突触活动诱导Wnt非经典通路的活化。方法构建C57BL/6J胎鼠大脑皮层神经元原代培养体系,用NMDA处理神经元细胞,并结合Western blotting、双免疫荧光染色等技术,检测神经元细胞内Wnt非经典通路的相关蛋白的变化。结果免疫荧光染色显示成功建立了C57BL/6J胎鼠大脑皮层神经元体外培养体系,原代神经元细胞在体外培养10d生长良好,且纯度达90%;体外培养的神经元细胞内存在Wnt5a神经递质,经NMDA的刺激,发现Wnt非经典通路的两个标志性蛋白CaMKII和JNK的磷酸化水平显著增加,且Wnt非经典通路的一种受体Frizzled-5的蛋白表达水平也显著增加。进一步的研究显示,用NMDA竞争性抑制剂DAP5能够阻断NMDA引起的CaMKII和JNK蛋白的磷酸化水平的提高。结论 NMDA受体的激活会诱导Wnt非经典通路的活化。
李屹晨万仙子杨湘玲杨成张薇钟翎
关键词:原代培养NMDA受体
共轭亚油酸单体诱导乳腺癌细胞SKBr3凋亡的PPARγ信号通路研究被引量:3
2009年
cis9,trans11-CLA和trans10,cis12-CLA是共轭亚油酸(CLA)二种抑瘤活性最强的主要单体.在以前报道二者诱导乳腺癌细胞凋亡的工作基础上,进一步探讨共轭亚油酸单体诱导乳腺癌细胞SKBr3凋亡的途径及机制.采用RT-PCR和Westernblot等方法,证实了CLA在SKBr3细胞中可显著提高PPARγ的转录及蛋白质表达水平,并发现CLA对PPARγ与凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2和caspase3的表达影响呈同步相关性,并表现出时间和剂量依赖性.通过PPARγ抑制剂GW9662实验表明它们之间存在协同关系.首次提出了PPARγ-Bcl-2-Caspase3信号通路的SKBr3细胞凋亡途径,为CLA有望作为PPARγ新型调节剂诱导肿瘤细胞凋亡在临床应用提供实验证据.
袁贤琳何峰陈青杨湘玲杨得坡王冬梅钟翎
关键词:细胞凋亡
原小檗碱类多靶点抗老年性痴呆症药理作用被引量:9
2009年
原小檗碱是一类异喹啉生物碱,具有相同的药效基团。本研究检测了以小檗碱和四氢黄藤素为代表的原小檗碱多靶点抗AD效应及分子作用机制。以人神经母细胞瘤SH-SY5Y为研究对象,利用Western blot检测药物对细胞全长APP和BACE1蛋白水平的影响;ELISA技术检测细胞外可溶性淀粉样前体蛋白α(sAPPα)的分泌;酶活性检测试剂盒检测乙酰胆碱酯酶(AChE)的活性。结果显示,药物处理细胞24 h后,二者均能显著地抑制BACE1蛋白的表达,并可使sAPPα的分泌显著增加,但未见细胞APP蛋白含量明显变化,同时对该细胞的AchE的活性具有显著的抑制作用。以上结果证明:原小檗碱生物碱药理活性涉及预防和减少Aβ沉积和增强乙酰胆碱对脑胆碱受体的作用,并通过细胞自身的代谢增加具有神经营养作用的sAPPα的分泌。提示此类化合物具有多靶点抗老年痴呆的潜能,通过结构优化改造,将有望获得副作用小的新一代抗AD有效药物。
陈青奉文尚何峰钟翎
关键词:淀粉样前体蛋白乙酰胆碱酯酶
共轭亚油酸单体诱导乳腺癌细胞MCF-7凋亡及其作用机制的研究被引量:4
2009年
目的:研究2种共轭亚油酸(conjugated linoleic acid,CLA)单体——顺9,反11-CLA(cis 9,trans11-CLA,c9,t11-CLA)和反10,顺12-CLA(trans10,cis12-CLA,t10,c12-CLA)诱导乳腺癌细胞MCF-7凋亡及其作用机制。方法:采用MTT法检测CLA对MCF-7细胞的生长抑制作用,锥虫蓝染色绘制CLA作用后MCF-7细胞的生长曲线;荧光显微镜观察及FCM检测MCF-7细胞的凋亡和细胞周期的改变;RT-PCR和Western印迹法检测MCF-7细胞PPARγ、Bcl-xL和Bcl-xS mRNA以及PPARγ、Bcl-2、Bax和caspase-3的蛋白表达。结果:2种CLA单体均可抑制MCF-7细胞增殖并诱导细胞凋亡,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);RT-PCR和Western印迹法检测结果显示,2种CLA单体均可以提高PPARγ、Bcl-xS mRNA和PPARγ、Bax、caspase-3蛋白的表达,降低Bcl-xL mRNA和Bcl-2蛋白的表达,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);且2种CLA单体对PPARγ与凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2和caspase-3的表达影响呈剂量和时间依赖性及同步相关性。结论:c9,t11-CLA和t10,c12-CLA对乳腺癌MCF-7细胞具有抑制生长和促凋亡的作用,CLA可能作为PPARγ的配体通过激活PPARγ-Bcl-2-caspase-3细胞凋亡信号通路而实现抑制肿瘤细胞生长的作用。
袁贤琳陈青杨湘玲钟翎
关键词:乳腺肿瘤细胞凋亡细胞周期细胞MCF-7
脱氢表雄酮调节HepG2/GFP-HBx细胞p16基因甲基化及其与细胞周期和凋亡的相关性
2009年
目的探讨HBx与p16基因甲基化的关系,研究脱氢表雄酮(DHEA)对p16基因甲基化以及细胞周期和细胞凋亡的调节作用。方法以HepG2、HepG2/GFP和HepG2/GFP-HBx三种细胞为材料,采用MTT法检测细胞生长;流式细胞术检测细胞周期和凋亡率;MSP-PCR检测p16基因甲基化水平。比较分析HBx与p16基因启动子甲基化、DHEA与各检测指标的关系。结果HepG2/GFP-HBx细胞与HepG2细胞和HepG2/GFP细胞相比,细胞的增殖速度提高(P<0.05),G0/G1期细胞减少,S期细胞增多(P<0.05),凋亡率降低(P<0.05);HepG2/GFP-HBx细胞的p16基因启动子呈现高水平甲基化,HepG2和HepG2/GFP细胞呈现高水平非甲基化。100μmol/L的DHEA使三种细胞的增殖速度降低(P<0.05),G0/G1期细胞增加,S期细胞减少(P<0.05),凋亡率提高(P<0.05)。DHEA可下调HepG2/GFP-HBx细胞的p16基因启动子甲基化水平,但对HepG2和HepG2/GFP细胞的p16基因启动子甲基化水平不产生影响。结论HBx引起肝癌细胞p16基因甲基化,并缩短细胞周期抑制细胞凋亡;DHEA可明显下调HBx引起的p16基因甲基化水平,延长细胞周期促进细胞凋亡,在无HBx基因整合的情况下,DHEA对肝癌细胞生长、细胞周期和凋亡的影响不通过p16基因甲基化的途径实现。
吕元邓春平黄冰郭中敏钟翎
关键词:P16基因甲基化脱氢表雄酮HBX细胞周期
Studies on mechanism of cis9,trans11-CLA and trans10,cis12-CLA inducing apoptosis of human breast cancer cell line MCF-7
2010年
Objective: The aim of the study was to explore the activities of cis9, trans11-CLA (C9, t11-CLA) and transl0, cis12-CLA (t10, c12-CLA) inhibiting tumor, and investigate their relationships with PPARy and apoptotic proteins, and mechanism of anti-cancer. Methods: The inhibitory rate, cell growth curve and apoptotic morphological observation of MCF-7 cells were obtained by MTT assay, trypan blue staining and Hoechst33342 fluorescence staining. The apoptotic rate and cell cycle were detected with flow cytometry. Transcriptional level of genes was detected with RT-PCR semi-quantitative method, and Western blot was performed to detect proteins levels. Results: The two CLA isomers could reduce cell proliferation (P 〈 0.05), increase apoptotic rate (P 〈 0.05), and increase obviously the transcriptional and protein levels of PPARy (P 〈 0.01). The synchronism and correlation between the effects of CLA to PPARy and apoptotic proteins Bax, Bcl-2, Caspase 3 changes were found with the dose- and time-dependent manners. There was cooperative relation between the levels of PPARy and the rates of Bax/Bcl-2, Caspase 3 (small fragment) by experiments of PPARy inhibitor GW9662 and ligand Rosiglitazone. Conclusion: The apoptotic pathway of PPARy-Bcl-2-Caspase 3 signaling was found. The C9, t11-CLA and tl0, c12-CLA could inhibit MCF-7 cell proliferation and promote apoptosis via activating PPARy-Bcl-2-Caspase 3 pathway. CLA may be a kind of activator of PPARv.
Xianzi Wan Xianlin Yuan Xiangling Yang Yichen Li Ling Zhong
关键词:APOPTOSIS
hK1-L-Fc融合蛋白在CHO细胞中的表达及其活性研究被引量:1
2011年
为进一步改造重组人激肽释放酶1(hK1),以期提高其生物活性,制备了通过柔性接头相连接的重组人激肽释放酶1-L-IgG1 Fc融合蛋白(hK1-L-Fc)。采用重叠延伸PCR技术构建hK1-L-Fc融合基因,克隆至表达载体pcDNA3.1,在中国仓鼠卵巢细胞(CHO-S)中表达。利用Protein A亲和层析柱纯化融合蛋白,SDS-PAGE、Western blotting、飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)、HPLC检测表达产物,底物法检测融合蛋白的体外活性。结果显示:成功构建pcDNA3.1-hK1-L-Fc重组表达载体;获得稳定表达融合蛋白的细胞株;无血清悬浮批式培养的表达量在0.7 mg/L以上;纯化的蛋白其纯度在95%以上,分子量约60 kDa;活性检测显示其比活性在9.2 U/mg以上,较hK1-Fc蛋白提高了18%以上。
邓春平陶建军侯永敏钟翎
关键词:融合蛋白CHO细胞
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