国家自然科学基金(39980038) 作品数:8 被引量:36 H指数:3 相关作者: 赵平 戚中田 曹洁 柯金山 赵兰娟 更多>> 相关机构: 第二军医大学 东北农业大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 上海市科学技术发展基金 军队“十五”医药卫生科研基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
表达HCV核心蛋白的重组减毒鼠伤寒沙门菌口服免疫小鼠的研究 被引量:3 2002年 构建了丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白原核表达质粒pQE-HCV,转化到减毒鼠伤寒沙门菌SL7207中,SDS-PAGE和Western blot检测到该重组菌能表达3种分子量的HCV核心蛋白,以该重组菌作为口服型活疫苗灌胃接种BALB/c小鼠,检测到小鼠产生的抗HCV核心蛋白IgG及迟发型超敏反应、T细胞增殖反应和细胞毒性T淋巴细胞反应,结果表明该重组菌能有效诱导免疫应答,尤其能高效诱导细胞免疫应答,这为研制高效免疫、成本低廉、接种方便的HCV疫苗提供了一个新的可行途径。 赵平 曹洁 曹明媚 朱诗应 戚中田关键词:HCV核心蛋白 丙型肝炎病毒核心蛋白 减毒鼠伤寒沙门菌 免疫应答 重组菌 HBV包膜-核心蛋白融合基因DNA疫苗诱导小鼠持久的细胞免疫应答 被引量:16 2002年 构建编码HBV包膜 核心蛋白融合基因的DNA疫苗pSC、pSS1S2C和编码HBV包膜蛋白或核心蛋白基因的DNA疫苗 pHBs、pHBc ,分别肌肉注射免疫BALB/c小鼠 ,检测小鼠的血清抗体、T细胞增殖和细胞毒性T淋巴细胞反应 ,比较融合基因DNA疫苗与单基因DNA疫苗诱生免疫应答的强度 ,发现融合基因DNA疫苗诱生抗体的效率明显不及单基因DNA疫苗 ,但其能诱导更强、更持久的细胞免疫应答 ,表明HBV包膜 核心蛋白融合基因DNA疫苗对于治疗慢性乙型肝炎可能比单基因DNA疫苗更为有效 . 赵平 姜春鹏 赵兰娟 温新宇 戚中田关键词:HBV DNA疫苗 小鼠 细胞免疫应答 IL-12对结构优化的HBV核心抗原DNA疫苗诱导免疫应答的影响 被引量:1 2003年 目的 探讨IL 12对一种结构优化的HBV核心抗原 (HBcAg)DNA疫苗免疫效果的影响。方法 将小鼠IL 12基因插入结构优化的DNA疫苗pST HBc,构成pST HBc/IL12 ,将pST HBc/IL12转染COS7细胞 ,ELISA检测培养上清中的HBcAg和小鼠IL 12。分别将pST HBc/IL12和pST HBc肌肉注射接种BALB/c小鼠 ,检测小鼠的体液和细胞免疫应答。结果 ELISA检测到培养上清液中的HBcAg和小鼠IL 12 ,pST HBc/IL12诱导的抗 HBc总IgG阳转率和抗体水平不及pST HBc ,但其诱导的脾细胞增殖反应和细胞毒性T淋巴细胞反应均强于pST HBc。结论 IL 12可进一步增强这种HBcAgDNA疫苗诱导的细胞免疫应答。 高军 赵平 柯金山 戚中田关键词:乙型肝炎病毒 DNA疫苗 白细胞介素-12 IL-12增强HBV融合抗原DNA疫苗在小鼠诱导的细胞免疫应答 被引量:1 2003年 A plasmid(DNA vaccine)pSC-IL12,coexpressing hepatitis B virus(HBV)envelope-core fusion antigen and murine IL-12,was constructed.After the plasmid was transfected into COS7 cells,HBsAg and HBcAg were detected in cytoplasm,murine IL-12 was detected in supernatant.BALB/c mice were vaccinated intramuscularly with this construct or HBV envelope-core fusion antigen DNA vaccine pSC.Following twice immunizations,humoral and cellular immune responses of the mice were detected.Results showed that pSC-IL12 induced weaker antibody but stronger T lymphocyte proliferative response and cytotoxic T lymphocyte response than pSC did,which indicated that HBV fusion antigen and IL-12 coexpressing DNA vaccine may be more useful for therapy of hepatitis B. 赵平 高军 王宏卫 曹洁 戚中田关键词:融合抗原 白细胞介素12 DNA疫苗 细胞免疫应答 乙型肝炎病毒表面—核心融合抗原和白细胞介素—12共表达DNA疫苗的免疫原性 2003年 乙型肝炎病毒(HBV)特异性细胞免疫应答对急性HBV感染的恢复起关键作用,其中HBV表面抗原和核心抗原均是重要的靶抗原.曾构建HBV表面-核心融合抗原DNA疫苗,可有效诱导小鼠细胞和体液免疫应答,为进一步增强该DNA疫苗诱导细胞免疫应答,在该疫苗分子中增加了小鼠白细胞介素-12(IL-12)基因,观察IL-12对其免疫应答的影响. 柯金山 赵平 吴淑梅 戚中田关键词:白细胞介素-12 DNA疫苗 免疫原性 HCV核心-包膜E2抗原融合基因DNA疫苗的构建及对小鼠的免疫应答试验 2002年 目的 观察一种结构新颖的HCV融合抗原DNA疫苗在BALB c小鼠的免疫效果 ,探讨其用于防治丙型肝炎的可行性。方法 用重叠延伸PCR拼接编码小鼠IgGkappa链信号肽和通用型辅助性T细胞表位PADRE的DNA片段 ,PCR分别扩增HCV核心抗原基因和包膜E2抗原基因 ,将 3段基因插入真核表达载体pcDNA3.1,构成重组表达质粒pST CE2t,转染COS7细胞 ,免疫组化检测HCV抗原的表达。将pST CE2t和HCV核心抗原DNA疫苗pcDNA3.1core分别肌肉注射接种BALB c小鼠 ,检测小鼠的血清抗体、T细胞增殖和CTL反应。结果 pST CE2t可在COS7细胞内表达HCV核心抗原和E2抗原 ,接种于BALB c小鼠能有效诱导体液和细胞免疫应答 ,其中抗HCV核心抗原免疫应答的强度明显超过pcDNA3.1core ,且更趋向于TH1型免疫应答。结论 pST 姜春鹏 赵平 朱诗应 王路 戚中田关键词:HCV 丙型肝炎病毒 丙型肝炎 DNA疫苗 核心抗原 HCV核心蛋白核酸疫苗转化的减毒鼠伤寒沙门菌在小鼠的免疫原性 被引量:1 2003年 目的 :观察以减毒鼠伤寒沙门菌为载体的丙型肝炎病毒 (HCV)口服型核酸疫苗在BALB C小鼠的免疫原性 ,探讨用该免疫方法预防丙型肝炎的可行性。方法 :将HCV核心蛋白真核表达质粒pcDNA3 1core(核酸疫苗 )转化到减毒鼠伤寒沙门菌SL72 0 7,将重组沙门菌和pcDNA3.1core分别口服或肌注接种BALB C小鼠 ,检测小鼠的体液和细胞免疫应答及观察其安全性。结果 :口服重组沙门菌或肌注接种核酸疫苗均在小鼠诱导相似水平的抗HCV核心蛋白IgG ,但口服重组沙门菌诱导的细胞免疫应答明显强于肌注接种核酸疫苗 ,未见小鼠出现明显毒副反应。结论 :减毒沙门菌作为HCV核酸疫苗的载体能增强其诱导的细胞免疫应答 ,这为研制高效免疫、成本低廉、接种方便的HCV疫苗提供了一个新的可行途径。 赵平 柯金山 曹洁 戚中田关键词:核心蛋白 核酸疫苗 减毒鼠伤寒沙门菌 小鼠 免疫原性