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山西省科技攻关计划项目(200903110582)

作品数:1 被引量:2H指数:1
相关作者:白凤薛朝霞潘喻飞杨保仲黄平更多>>
相关机构:山西医科大学第一医院更多>>
发文基金:山西省科技攻关计划项目更多>>
相关领域:医药卫生更多>>

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇肽类
  • 1篇细胞
  • 1篇细胞系
  • 1篇疗法
  • 1篇脑啡肽
  • 1篇脑啡肽类
  • 1篇基因
  • 1篇基因疗法
  • 1篇基因修饰

机构

  • 1篇山西医科大学...

作者

  • 1篇黄平
  • 1篇杨保仲
  • 1篇潘喻飞
  • 1篇薛朝霞
  • 1篇白凤

传媒

  • 1篇中华麻醉学杂...

年份

  • 1篇2012
1 条 记 录,以下是 1-1
排序方式:
人前脑啡肽基因修饰人胚胎肾细胞的构建被引量:2
2012年
目的构建人前脑啡肽基因(hPPE)修饰的人胚胎肾细胞(HEK293细胞)。方法重组质粒peDNA3.1(+)/hPPE经限制性内切酶HindHI和NotI进行双酶切获得hPPE基因,运用基因重组技术将hPPE基因与表达载体同源重组,转染293T细胞进行慢病毒包装、扩增、纯化,测定病毒滴度,再将重组的慢病毒载体转染HEK293细胞。用Westernblot法检测hPPE基因在HEK293细胞中的表达。结果重组慢病毒载体阳性克隆测序结果和基因库的hPPE基因序列完全一致。含有hPPE基因的慢病毒载体,滴度为2.07×10^8TU/ml。转染慢病毒载体后的HEK293细胞,在荧光显微镜下未见到GFP荧光。转染Ubc—GFP—L.V.空病毒载体的HEK293细胞,可见到较强的荧光。Westernblot法检测到经慢病毒载体转染后的HEK293细胞中hPPE基因表达呈阳性。结论成功构建了hPPE基因修饰的HEK293细胞,使hPPE基因可在HEK293细胞中稳定表达。
白凤杨保仲薛朝霞潘喻飞黄平
关键词:脑啡肽类细胞系基因修饰基因疗法
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