国家自然科学基金(31170888)
- 作品数：14 被引量：25H指数：3
- 相关作者：陈永进陈慧李轶杰赵寅华赵萤更多>>
- 相关机构：第四军医大学第四军医大学口腔医院河北联合大学附属医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- Wnt信号通路在压力调控骨髓间充质干细胞膜片成软骨响应中的作用被引量：2
- 2014年
- 目的:研究经典(Wnt/β-catenin,Wnt)信号通路在压力调控骨髓间充质干细胞(bone marrow-derived mesenchymal stem cells,BMSCs)膜片成软骨响应中的作用。方法:体外分离、培养兔BMSCs,经鉴定后用含有抗坏血酸的培养基构建BMSCs细胞膜片,并将其随机分2组;对照组在常规条件下培养4 d,实验组施以120 KPa静态压力,1 h/d、连续4 d。然后通过Western Blot检测经典Wnt信号通路相关蛋白的表达水平;Real-time PCR检测Wnt信号通路相关基因和成软骨基因的表达水平。结果:兔BMSCs传代后生长状态稳定,呈梭形;成骨成脂分化诱导实验结果阳性;Western Blot检测显示,实验组β-catenin和p-GSK3β蛋白表达水平均明显高于对照组(P<0.05);Real-time PCR检测显示,实验组经典Wnt信号通路相关基因β-catenin、p-GSK3βmRNA以及成软骨相关基因Col-Ⅱ、Sox-9、Aggrecan mRNA的表达水平均明显高于对照组(P<0.05)。结论:Wnt/β-catenin信号通路介导兔BMSCs膜片在一定的压力刺激下的成软骨响应过程。
- 黄锦梅程百祥马媛媛刘晓波张旻陈永进
- 关键词：WNT软骨形成
- P38MAPK信号通路在压力调控骨髓间充质干细胞膜片成软骨响应中的作用被引量：2
- 2013年
- 目的研究P38丝裂原激活的蛋白激酶(P38MAPK)信号通路在压力调控骨髓间充质干细胞(BMSCs)膜片成软骨响应中作用。方法将含有抗坏血酸培养基构建的兔BMSCs细胞膜片分为空白对照组和加压组(静态液压加载装置给予细胞膜片120kPa、1h/d、连续4d的压力刺激),采用Western blot及real time-PCR检测P38MAPK信号通路的表达,real time-PCR技术检测成软骨基因的表达。结果兔BMSCs传代后细胞生长状态稳定,呈梭形;成骨诱导后,茜素红染色可观察到矿化结节,碱性磷酸酶活性染色呈阳性,成脂诱导后油红O染色细胞内出现红色脂滴;Westernblot结果显示,与对照组(0.165±0.035)比较,压力刺激下兔BMSCs细胞膜片中P38MAPK蛋白表达量(0.820±0.108)显著升高(P<0.05),同时realtime-PCR结果表明:加压组兔BMSCs细胞膜片中P38MAPK的mRNA表达量(0.651±0.105)高于对照组(0.166±0.046)(P<0.05),且成软骨基因(Sox-9、Aggrecan及Col-Ⅱ)的mRNA表达量(3.323±0.729、0.901±0.162、1.151±0.105)也明显高于对照组(0.541±0.121、0.335±0.094、0.466±0.158)(P<0.05)。结论 P38MAPK信号通路在压力调控BMSCs膜片成软骨响应中起正调节作用。
- 程百祥张旻杜静陈慧李轶杰陈永进
- 关键词：间质干细胞P38MAPK
- 压力调控BMSCs/PRF双膜复合体修复髁突软骨缺损的实验研究
- ＜正＞目的构建骨髓间充质干细胞（BMSCs）/富血小板纤维蛋白（PRF）双膜结构的基质复合体以构建优化的关节软骨再生微环境。筛选对BMSCs/PRF双膜结构适宜的压力刺激条件,并将压力微环境预调的BMSCs/PRF双膜结...
- 张旻赵寅华陈慧李轶杰黄锦梅
- 文献传递
- 骨髓间充质干细胞复合富血小板纤维蛋白异位成软骨的实验研究被引量：3
- 2013年
- 目的:探讨富血小板纤维蛋白(platelet-rich fibrin,PRF)复合兔骨髓间充质干细胞膜片在软骨微环境下异位成软骨的可行性。方法:取3～4月龄雄性新西兰兔骨髓,体外分离、培养骨髓间充质干细胞;经来源鉴定后,取第3代细胞诱导培养形成细胞膜片;抽取同一只兔动脉血制备PRF后与自体骨髓间充质干细胞膜片复合。取4周龄BALB/C裸鼠30只,随机分组;实验组(n=15)于背部两侧植入骨髓间充质干细胞膜片复合富血小板纤维蛋白与兔耳软骨碎块的双膜结构复合物;对照组(n=15)背部两侧仅植入骨髓间充质干细胞膜片与兔耳软骨碎块的单膜结构复合物。分别于植入后2、4、8周取材,HE、甲苯胺蓝染色,用IPP 6.0软件对图片进行着色强度分析。所得结果用SPSS 13.0软件进行统计处理。结果:HE染色显示,实验组2、4、8周均可见软骨细胞生成,对照组仅8周时有少量软骨细胞生成。IPP分析显示,实验组2、4、8周甲苯胺蓝着色强度呈逐渐增加趋势,各时间点间OD值相比差异均有统计学意义(P<0.05);而且实验组各时间点OD值均显著高于同时间点的对照组(P<0.05)。结论:骨髓间充质干细胞与PRF复合的双膜结构在软骨微环境中具成软骨能力。
- 李轶杰陈慧刘鹏张旻陈永进
- 关键词：骨髓间充质干细胞富血小板纤维蛋白软骨分化裸鼠
- 持续及周期流体静压力对大鼠BMSCs增殖及凋亡的影响被引量：2
- 2014年
- 目的:通过观察持续及周期静压力刺激对骨髓间充质干细胞(BMSCs)体外增殖和凋亡的影响,以期为软骨组织工程研究中力学加载方式的选择提供实验依据。方法:全骨髓贴壁分离法分离大鼠BMSCs,经表面标志物检测后,分为对照组(control)、持续流体静压力45Kpa组(45Kpa)、周期流体静压力45Kpa组(0～45Kpa)、持续流体静压力90Kpa组(90Kpa)及周期流体静压力90Kpa组(0～90Kpa),压力加载时间1h,连续加压2天,周期流体静压力的频率为0.1Hz。流式细胞术检测细胞周期和凋亡,激光共聚焦显微镜下观察细胞骨架。结果:90Kpa及0～90Kpa流体静压力作用下细胞增殖指数显著高于对照组(P<0.05);BMSCs加载45Kpa、0～45Kpa、90Kpa及0～90Kpa流体静压力后,细胞骨架光密度值显著高于对照组(P<0.05);90Kpa及0～90Kpa流体静压力可导致细胞凋亡(P<0.05),其中90Kpa持续流体静压力中细胞凋亡率与对照组相比差异极显著(P<0.01)。结论:高强度周期流体静压力可促进细胞增殖,而高强度持续压力则导致细胞凋亡,低强度周期压力可促使细胞骨架重组。
- 刘岩正赵萤赵红萍王军慧张旻
- 关键词：流体静压力骨髓间充质干细胞增殖细胞骨架凋亡
- 压力对两种成体干细胞与PRF复合后成软骨能力影响的比较研究
- <正>骨髓间充质干细胞(BMSCs)和脂肪干细胞(ADSCs)两种成体干细胞因均具有成骨、成软骨等多向分化潜能且来源广泛、体外扩增能力强等特点而被广泛应用于骨软骨组织工程研究,但两种干细胞之间在相同的培养环境下成软骨能力...
- 李轶杰陈慧杜静程百祥张旻陈永进
- 文献传递
- 压力调控下骨髓间充质干细胞与脂肪干细胞成软骨能力的比较研究被引量：1
- 2014年
- 目的:探讨压力调控对BMSCs和ADSCs两种干细胞在PRF复合生长因子支持下体外成软骨效应的影响。方法:体外分离培养同一个体兔的BMSCs和ADSCs,经鉴定后诱导形成细胞膜片,分别与其同体PRF膜复合制成BMSCs/PRF、ADSCs/PRF双膜复合体。然后分别取其单膜和双膜,并各分为2组(压力刺激组和对照组),各压力刺激组置于细胞加载装置中施加以120 KPa静压力刺激,每天1 h;对照组常规培养。培养后2、4、6 d各取一组,采用实时定量PCR检测增殖基因PCNA mRNA、以及成软骨相关基因Sox-9、Aggrecan、Col-ⅡmRNA的表达水平。结果:与对照组相比,无论是单膜还是双膜复合体,压力刺激均可明显上调BMSCs的细胞增殖基因以及各成软骨相关基因的表达水平(P<0.05);而对ADSCs各基因的表达均无明显作用(P>0.05)。BMSCs各组与ADSCs各组的两两相比,除单膜对照组两者各基因的表达水平无显著差异(P>0.05)外,其余各组的PCNA、Sox-9、Aggrecan及Col-ⅡmRNA表达水平均为BMSCs明显高于ADSCs(P<0.05)。结论:压力对BMSCs的促增殖、促成软骨效应明显强于ADSCs。
- 田义赵萤陈慧杜静陈永进张旻
- 脂肪干细胞应用于软骨缺损修复的研究新进展被引量：2
- 2012年
- 由创伤、感染、自身免疫、肿瘤等因素引起的各种关节表面疾患以及儿童骨骺生长板的创伤﹑早闭﹑坏死等,都容易导致软骨病损[1]。由于软骨本身无血管和较低的细胞有丝分裂活性,其一旦损伤,自我修复的能力极其有限[2]。有研究表明,直径小于3mm的缺损可获得部分或全部的修复,但修复产生的纤维软骨会逐渐退化,且会使周围正常软骨恶化坏死[3],因此如何治疗软骨缺损具有重要的临床意义。
- 陈慧陈永进张旻
- 关键词：软骨缺损修复脂肪干细胞自身免疫关节表面
- RhoA信号通路在流体静压力调控大鼠BMSCs成骨响应中的作用被引量：1
- 2014年
- 目的:观察流体静压力对骨髓间充质干细胞增殖、细胞骨架及成骨分化的影响,及RhoA发挥的作用。方法:分离培养BMSCs,随机分为对照组、RhoA激动剂组、拮抗剂组、压力组、激动剂+压力组及拮抗剂+压力组。流式细胞仪、共聚焦显微镜检测细胞周期、细胞骨架,Real-time PCR检测成骨标志基因。结果:压力依赖RhoA的活性促进细胞周期启动、细胞骨架装配及成骨分化早期标志基因表达。结论:RhoA在压力导致的细胞周期启动、骨架装配及成骨早期分化的过程中具调控作用。
- 陈骥刘艳丽赵寅华李强赵萤
- 关键词：流体静压力细胞周期细胞骨架成骨分化
- P38MAPK/NF-κB信号通路在压力调控BMSCs/PRF双膜复合体成软骨响应中作用的研究被引量：1
- 2013年
- 目的本课题组前期观察到120 KPa每天1 h压力刺激可以促进BMSCs/PRF新型软骨组织工程双膜复合体移植物中BMSCs细胞的增殖和成软骨分化,但其分子机制不明。本实验即从分子生物学角度出发,研究压力刺激兔BMSCs/PRF双膜复合体后BMSCs中P38MAPK和NF-κB信号相关分子的表达,探讨P38MAPK和NF-κB在压力调控兔BMSCs/PRF成软骨响应过程中的具体作用及其信号途径。
- 张旻赵寅华程百祥刘岩正黄锦梅
- 关键词：成软骨复合体双膜信号通路
