广东省自然科学基金(31891) 作品数:10 被引量:31 H指数:3 相关作者: 于荣敏 赵昱 陈敏青 朱建华 金钱星 更多>> 相关机构: 暨南大学 浙江大学 中国药科大学 更多>> 发文基金: 广东省自然科学基金 广东省中医药管理局基金 教育部科学技术研究重点项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 更多>>
转基因西洋参冠瘿组织生物合成熊果苷的研究 被引量:13 2006年 目的应用悬浮培养转基因西洋参冠瘿组织生物合成熊果苷。方法向预培养20 d的西洋参冠瘿组织培养物中加入60 m g/mL对苯二酚溶液,共培养60 h后终止转化;通过TLC和HPLC方法检测产物,使用柱色谱法分离纯化产物,利用光谱数据对其结构进行鉴定。HPLC定量分析熊果苷产生的动力学变化曲线。结果产物同时在冠瘿组织培养物和培养基存在,并经过提取、分离得到其纯品,经理化性质和谱学方法将其鉴定为4-羟基苯-β-D-吡喃葡萄糖苷(熊果苷)。摩尔转化率在共培养60 h后达到最高(88.4%),同时,培养物和培养基中产物的量(63.69 m g/瓶,1.86 m g/瓶)以及产物的分泌百分率都达到最高(2.92%)。结论在国内外首次将转基因冠瘿组织用于生物转化系统并成功地得到具有多种药理活性的熊果苷。 张章 陈敏青 任胜芳 赵昱 于荣敏关键词:熊果苷 西洋参 生物转化 转基因西洋参冠瘿组织中人参皂苷类成分的分离鉴定 被引量:3 2008年 目的分离鉴定转基因西洋参冠瘿组织中的化学成分。方法以本研究组转导和培养的西洋参冠瘿组织为实验材料,体积分数为70%乙醇超声提取,硅胶柱色谱分离,用MS,~1H-NMR、^(13)C-NMR、HMBC等谱学方法确定结构。结果分离得到5个化合物,分别为20(S)-人参皂苷Rh_1(Ⅰ)、20(S)-人参皂苷Rg_3(Ⅱ)、人参皂苷Re(Ⅲ)、20(S)-达玛烷-3β,6α,12β,20,25-五醇-6-O-α-L-鼠李吡喃糖基-(1→2)-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(Ⅳ)和人参皂苷Rg_1(Ⅴ)。结论上述5个成分均为首次从转基因西洋参冠瘿组织培养物中分离得到,化合物Ⅳ为新天然产物。 朱建华 于荣敏 严春艳 宋丽艳 赵昱关键词:西洋参 人参皂苷 转基因西洋参冠瘿组织中多糖组分提取条件的优化考察 被引量:3 2007年 目的优化考察转基因西洋参冠瘿组织中多糖提取条件。方法用正交设计法优选西洋参冠瘿组织中多糖的最佳提取工艺,选取提取温度、加水量、提取时间和提取次数四个考察因素。结果正交实验结果显示:西洋参冠瘿组织中多糖的最佳提取工艺:提取温度为70℃,40倍溶剂,提取3次、3 h/次。结论优选得到的工艺简单易行,稳定性好。 于荣敏 陈敏青 杨威关键词:西洋参 多糖 转基因西洋参冠瘿组织化学成分研究 被引量:2 2008年 目的研究转基因西洋参Panax quinquefolium冠瘿组织中的化学成分。方法用大孔树脂、硅胶柱色谱等方法对西洋参冠瘿组织乙醇提取物进行分离,根据其理化性质及波谱数据对分离所得的化合物进行结构鉴定。结果分离并鉴定了9个化合物,分别为:20(R)-拟人参皂苷-RT5(Ⅰ)、人参皂苷Rh2(Ⅱ)、胡萝卜苷(Ⅲ)、棕榈酸甲酯(Ⅳ)、亚麻油酸甲酯(Ⅴ)、邻苯二甲酸二丁酯(Ⅵ)、9,12-十八碳二烯酸(Ⅶ)、棕榈酸(Ⅷ)和β-谷甾醇(Ⅸ)。结论9个化合物均为首次从转基因西洋参冠瘿组织中分离得到。 朱建华 李卫民 于荣敏关键词:西洋参 人参皂苷RH2 转基因西洋参冠瘿组织培养基中人参皂苷类成分的分离鉴定 被引量:3 2008年 西洋参冠瘿组织是本研究组利用植物转基因技术将根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)中Ti质粒上的一段DNA(Transferred DNA,T-DNA)插入西洋参植物细胞核基因组而得到的转基因植物组织.本试验在前期工作的基础上,从西洋参冠瘿组织培养基中分离得到5个化合物.经波谱解析,将其鉴定为:20-(R)拟人参皂苷PF11、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rb3和胡萝卜苷.上述化合物均为首次从转基因西洋参冠瘿组织培养基中分离得到. 张爱丰 朱建华 于荣敏关键词:转基因 西洋参 培养基 人参皂苷 西洋参冠瘿组织悬浮培养及其人参总皂苷的含量测定 被引量:4 2006年 目的:在西洋参冠瘿组织固体培养的基础上,进一步考察其悬浮培养条件及人参总皂苷含量,为利用西洋参冠瘿组织大规模生产药用成分提供科学根据。方法:考察固体培养和悬浮培养对西洋参冠瘿组织生长和人参总皂苷累积的影响,并检测悬浮培养液中碳源的消耗。结果:冠瘿组织在悬浮培养中生长速度快,生长量和总皂苷产量分别达到0.776 g DW/flask和19.4 mg/flask,是固体培养的2.11和1.64倍;培养基中蔗糖利用率达到91.8%,远远高于西洋参愈伤组织悬浮培养中的蔗糖利用率。结论:西洋参冠瘿组织悬浮培养既可大大提高生物工程产品的生物量,又能获得较高含量的人参总皂苷,可为大规模生产药用活性物质提供参考。 于荣敏 金钱星 赵昱关键词:西洋参 人参总皂苷 转基因西洋参冠瘿组织化学成分研究(Ⅱ) 被引量:1 2011年 目的研究转基因西洋参Panax quinquefolium冠瘿组织中的化学成分。方法采用大孔吸附树脂、硅胶柱等色谱技术对西洋参冠瘿组织乙醇提取物进行分离纯化,并根据理化性质及波谱数据对分离所得的化合物进行结构鉴定。结果从西洋参冠瘿组织乙醇提取物中分离得到10个化合物,分别鉴定为:尿嘧啶核苷(1)、α-D-呋喃果糖甲苷(2)、1-O-β-D-吡喃葡萄糖-(2S,3S4,R,8E)-2-[(2′R)-2′-羟基棕榈酰胺]-8-十八烯-1,3,4-三醇(3,脑苷脂)、豆甾醇(4)、奎酸(5)、奎酸乙酯(6)、十三碳-6-烯(7)、二十四烷醇(8)、邻苯二甲酸二异辛酯(9)、十六酸甲酯(10)。结论化合物3为首次从人参属植物中分离得到,10个化合物均为首次从转基因西洋参冠瘿组织中分离得到。 石效健 朱建华 杨丽 于荣敏关键词:西洋参 转基因 脑苷脂 转基因西洋参冠瘿组织中多糖的分离和纯化 被引量:1 2007年 目的分离纯化转基因西洋参冠瘿组织中多糖组分,为从该转基因材料中寻找重要生物活性前体多糖药物提供科学依据。方法用水醇提取法,以DEAE Sepharose FF和Sephacryl S-100柱色谱进行多糖的分离纯化,采用高效液相色谱测定单糖组成,色谱和光谱学方法鉴定其纯度和化学结构。结果分离得到4个精多糖(PPQ50-1、PPQ50-2、PPQ70-1和PPQ70-2),凝胶色谱法(Sephadex G-200)和旋光法证实了它们为化学均一性多糖;凝胶色谱法测得4种精多糖的相对分子质量分别为4.7×104,2.9×105,7.5×104和1.3×105;对得量较多的PPQ50-2和PPQ70-2进行了结构分析,证明二者均为葡聚糖;并利用NaIO4氧化反应和核磁共振谱等方法对PPQ50-2的化学结构进行了初步的糖基键合分析。结论首次从转基因西洋参冠瘿组织中分离得到4种化学均一性多糖成分,其中PPQ50-2和PPQ70-2均为葡聚糖。 陈敏青 于荣敏关键词:多糖 纯化 西洋参冠瘿组织悬浮培养及其人参皂苷类成分的分离(英文) 被引量:9 2005年 对西洋参冠瘿组织悬浮培养生长特征进行了考察,并对其悬浮培养物中的人参皂苷类成分进行了提取、分离和鉴定。研究得到了培养物最大生物量收获时间[18.62gL(dryweight)]及其中最高人参皂苷累积时间(620.4mgLonthe27thday)。培养基中碳源、磷、氨基氮、硝基氮的利用率分别为91.8%,100%,81%和97%。利用现代分离纯化方法从培养物中分离得到了4种人参皂苷类成分,利用理化及谱学技术分别鉴定为假人参皂苷F11(pseudoginsenosideF11,Ⅰ),人参皂苷Rd(ginsenosideRd,Ⅱ),人参皂苷Rb1(ginsenosideRb1,Ⅲ)和人参皂苷Rb3(ginsenosideRb3,Ⅳ)。 于荣敏 金钱星 孙辉 叶文才 赵昱关键词:西洋参 人参皂苷 西洋参冠瘿组织培养条件优化及其对多糖含量的影响 被引量:1 2009年 目的:考察西洋参冠瘿组织培养条件及其对多糖含量的影响。方法:采用正交设计法优化考察了转基因西洋参冠瘿组织的培养条件(如培养基、接种量、培养基pH值和无机元素等)及其对多糖含量的影响。结果:(1)该转基因组织能够在无激素的MS固体培养基中生长,并累积多糖;(2)得到了MS固体培养条件下冠瘿组织生长和多糖含量随时间变化的规律:培养21d时,多糖含量最高,培养24d时,冠瘿组织达到最大的生物量;(3)培养基pH值为5.6时,西洋参冠瘿组织生长状态良好,冠瘿组织生长量最高,多糖含量最高;(4)冠瘿组织接种量在4—7g(新重每瓶)时,对西洋参冠瘿组织生长较有利,但接种量对多糖含量无明显影响。结论:此培养方法能实现西洋参冠瘿组织多糖的高累积。 陈敏青 于荣敏关键词:西洋参 多糖含量