保定市科技攻关计划项目(11ZF015)
- 作品数:3 被引量:2H指数:1
- 相关作者:张敬国张立华陈冬王晓春葛昆更多>>
- 相关机构:河北大学河北省第六人民医院更多>>
- 发文基金:河北省卫生厅科研基金保定市科技攻关计划项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- SEREX技术分析筛选乳腺癌自身抗体标志物的研究被引量:2
- 2014年
- 目的:自身抗体是目前最受关注的一类肿瘤标志物候选分子,有助于提高乳腺癌检测的敏感性和特异性。鉴于单一一个乳腺癌文库的丰度有限,而且乳腺癌和肺癌发生来源相近,本研究从肺癌文库筛选乳腺癌特异性自身抗体标志物。方法:重组cDNA表达文库血清学分析(SEREX)联合生物淘洗富集技术从肺癌cDNA T7噬菌体文库中筛选乳腺癌相关蛋白,测序鉴定得到噬菌体表达蛋白信息。免疫印迹和酶联免疫吸附(ELISA)分析每一个开放阅读框架内的噬菌体表达蛋白的自身抗体水平。逻辑回归模型和留一交叉验证评估诊断价值。结果:筛选得到2个开放阅读框架内蛋白序列信息。通过免疫印迹和ELISA分析,这2个噬菌体表达蛋白能显著区分出病人和正常人。逻辑回归模型联合检测的敏感性达到82.4%,特异性达到88.2%;留一交叉验证两者联合的预测值敏感性和特异性分别达到78.5%和82.1%。结论:SEREX是有效的肿瘤自身抗体标志物筛选技术,从肺癌文库筛选乳腺癌特性抗原的方法是可行的,同时HSPA4L和RINT-1蛋白的血清自身抗体联合对乳腺癌的检测准确率要好于其中任何一种标志物。
- 葛昆张敬国陈冬王晓春
- 关键词:乳腺癌SEREX自身抗体
- 乳腺癌自身抗体标志物的筛选和鉴定
- 2013年
- 目的:应用自身抗体技术从乳腺癌cDNA T7噬菌体展示文库筛选乳腺肿瘤相关抗原。方法:运用生物淘洗富集技术、噬菌斑转印分析和免疫化学检测方法,用正常人和乳腺癌病人血清从一个乳腺癌cDNA T7噬菌体文库中筛选肿瘤相关噬菌体克隆。通过PCR和测序的方法分析开放阅读框架内的序列,BLAST比对识别出这些噬菌体表达蛋白。然后用酶联免疫吸附(ELISA)的方法对87个乳腺癌病人和87个正常人血清样品,检测每一个开放阅读框架内的噬菌体表达蛋白的自身抗体。用逻辑回归模型和留一交叉验证评估单个标志物和多标志物联合诊断的准确率。结果:筛选得到3个开放阅读框架之内的噬菌体克隆ASB-9,SERAC-1和RELT。用87份乳腺癌病人血清和87份正常人血清对这3个噬菌体表达蛋白进行验证,逻辑回归模型联合检测的敏感性达到80%,特异性达到100%;留一交叉验证3者联合的预测值敏感性和特异性分别达到76.5%和82.4%。ROC曲线分析和留一法都表明多个标志物联合检测的价值要高于单标志物,预示着多标志物联合在诊断中的重要性。结论:对乳腺癌来说,血清自身抗体是其早期检测和诊断的一种有效方法,而且多抗体联合应用可实现更高的诊断准确率。
- 张立华张敬国
- 关键词:噬菌体展示