“十五”国家科技攻关计划(2001BA705B09)
- 作品数：25 被引量：107H指数：7
- 相关作者：高琪周华云曹俊李菊林朱淮民更多>>
- 相关机构：江苏省寄生虫病防治研究所第二军医大学湖北省疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项World Health Organization江苏省卫生厅资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学经济管理更多>>
- 重组恶性疟原虫醛缩酶鉴定及其单克隆抗体的制备被引量：1
- 2006年
- 目的鉴定重组表达的恶性疟原虫醛缩酶(ALD),制备针对此酶的单克隆抗体。方法用PCR法扩增恶性疟原虫海南株ALD基因,经大肠埃希菌表达并纯化的ALD免疫BALB/c小鼠,腹腔注射免疫3次,每次间隔2周,加强免疫后3d取免疫小鼠脾细胞制备单克隆抗体。同时用获得的免疫血清进行间接荧光抗体试验(IFAT)和蛋白质印迹(Westerntblotting)分析。结果ELISA检测表明,小鼠能产生较高的针对ALD免疫应答,3次免疫后血清中特异性抗体滴度达1∶105,IFAT显示免疫血清能特异性识别疟原虫体内的抗原;Westernblotting分析显示免疫血清识别的疟原虫蛋白相对分子质量(Mr)约41000;所制备的免疫血清与人红细胞内醛缩酶无交叉反应。经ELISA检测3次,筛选获得7株分泌针对ALD的单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其中3株分泌的单克隆抗体能识别培养的恶性疟原虫;抗体亚型鉴定结果显示均为IgG1型。结论本实验构建并表达了重组疟原虫糖酵解醛缩酶,并获得特异性的单克隆抗体。
- 张瑞娟朱淮民郑徽宁北芳
- 关键词：恶性疟原虫醛缩酶基因表达单克隆抗体
- 环境因素对实验室驯化按蚊的影响被引量：2
- 2004年
- 较系统地阐述了实验室驯化按蚊 (Anopheles)所需的环境条件 ,环境因素对驯化的影响和驯化时应注意的问题及本实验室驯化的经验。
- 曹文波徐芬李春亮王国秀
- 关键词：按蚊驯化温度影响
- 江苏省传疟按蚊对菊酯类杀虫剂抗药性的监测被引量：27
- 2004年
- 目的 了解连续多年采用菊酯类杀虫剂处理蚊帐灭蚊后媒介按蚊的抗性情况。方法 采用 WHO成蚊滤纸接触法 ,以全国蚊类抗性监测网提供的区分剂量法来判定抗性级别。结果 连续采用菊酯类杀虫剂处理蚊帐 5年以上地区的中华按蚊对溴氰菊酯和二氯苯醚菊酯均已产生初级抗性 ,5年以下地区中华按蚊对这两种杀虫剂尚未产生抗性 ;连续灭蚊 5年以上地区未捕获嗜人按蚊 ,5年以下地区嗜人按蚊对菊酯类杀虫剂仍较敏感。结论 嗜人按蚊对溴氰菊酯和二氯苯醚菊酯尚未产生抗性 ,中华按蚊虽已产生抗性 ,但抗性水平仍较低 。
- 周华云李菊林金小林王伟明朱国鼎顾亚萍曹俊高琪
- 关键词：疟疾按蚊杀虫剂抗药性
- 恶性疟原虫FCC1/HN株醛缩酶编码区基因的克隆及表达被引量：1
- 2004年
- 目的 克隆恶性疟原虫海南株 (FCC1/HN)株糖酵解醛缩酶 (ALD)编码区基因。 方法 利用已知ALD基因序列设计一对特异性引物 ,从基因组DNA中用PCR扩增ALD基因 ,将其克隆入pQE 3 0载体 ,阳性克隆经酶切鉴定后测序 ,在此基础上将重组质粒转化大肠埃希菌M15进行表达。 结果 PCR扩增后获得特异性扩增片段 ,测序结果显示我国的恶性疟原虫FCC1/HN株与恶性疟原虫 3D7株ALD基因序列完全相同。重组融合蛋白通过镍 次氮基三乙酸 (Ni NTA)亲和层析及阳离子交换层析进行纯化。 结论 我国的恶性疟原虫FCC1/HN株与文献报道的恶性疟原虫 3D7株ALD编码区基因序列相同 。
- 张瑞娟朱淮民曹毅周爱国郑志强张青锋郑徽
- 关键词：恶性疟原虫FCCLHN醛缩酶PCR引物
- 赫坎按蚊种群近缘种核糖体基因内转录第二间隔区序列分析被引量：9
- 2004年
- 目的 分析赫坎按蚊种群内 4个近缘种核糖体基因内转录第二间隔区 (rDNAITS2 )特征。 方法 采用特异性ITS2 引物对中华按蚊和嗜人按蚊江苏实验株、辽宁省沈阳市和朝鲜开城现场捕获的嗜人按蚊、八代按蚊和雷氏按蚊rDNAITS2 进行PCR扩增、基因测序和限制性内切酶酶切位点图谱分析。 结果与结论 赫坎按蚊种群近缘种中华按蚊、嗜人按蚊、八代按蚊和雷氏按蚊rDNAITS2 分别为 472、45 2、45 6和 45 6bp 。
- 高琪周华云李菊林李凤华Choe Tong GyuYom Sung Chan朱国鼎曹俊
- 关键词：嗜人按蚊蚊种核糖体基因近缘种转录
- 混合样本方法检测蚊虫子孢子阳性率数学模型的再研究被引量：10
- 2002年
- 目的 对混合样本方法检测蚊体内子孢子阳性率进行理论分析与方案设计。 方法 以均方误差达到预定精度要求为准则,确定混合样本大小与混合样本量。 结果 本文给出的混合检测方案是基于严格的统计分析得到的结果,与传统的逐一检测方法相比,可以大大减少检测次数并在一定程度上减少样本总量。 结论 依据感染率预估值确定混合样本大小与混合样本量的研究思路,具一定的可行性。与传统的无偏估计相比,用混合样本阳性数在样本总量中的比例作为感染率估计值具有计算简单、精度较高的优点。
- 孙庆文陆柳程翔方影朱淮民顾政诚
- 关键词：数学模型参数估计疟疾
- 湖北省嗜人按蚊分布区不同灭蚊措施的效果评价被引量：2
- 2005年
- 目的评价嗜人按蚊分布区不同灭蚊措施的疟疾防制效果。方法比较分析2.5%溴氰菊酯(15mg/m2)浸帐,结合用5%氯氰菊酯(25mg/m2)对畜房、人群活动场所、卧室作滞留喷洒灭蚊措施与仅采用2.5%溴氰菊酯(15mg/m2)浸帐灭蚊措施对控制嗜人按蚊密度和降低疟疾发病率的效果。结果浸帐加喷洒措施区,人帐、半通宵、牛栏、猪栏嗜人按蚊密度平均下降率83.77%,叮人率下降98.46%,疟疾发病率下降100.00%。单一浸帐措施区各场所嗜人按蚊密度平均下降49.89%,叮人率下降92.00%,疟疾发病率下降90.91%,经统计学处理,2种措施对降低疟疾发病率和嗜人按蚊叮人率差异无统计学意义(χ2=0.0000086～0.9962,P>0.05)。结论浸帐灭蚊措施比浸帐加喷洒措施经济,且降低嗜人按蚊叮人率和疟疾发病率效果二者差异无统计学意义。
- 黄光全张华勋李汉帆陈国英兰明祥刘井元罗山虎
- 关键词：嗜人按蚊分布区疟疾防制效果
- 辽宁法库县、广东横琴岛可疑嗜人按蚊与四川嗜人按蚊杂交及唾腺染色体观察被引量：9
- 2004年
- 目的 了解中国嗜人按蚊的分布 ,判定辽宁法库县、广东横琴岛可疑嗜人按蚊和四川嗜人按蚊是否存在生殖隔离 ,有无种间差异 ,是否为同一蚊种。方法 采用遗传学方法进行人工杂交 /自然交配 ,并对杂交后的子代进行多腺染色体制片观察。结果 辽宁法库县、广东横琴岛可疑嗜人按蚊与四川嗜人按蚊亲代杂交、回交、子代自交均能产生正常子代 ,并能大量繁殖。子代唾腺染色体制片观察未发现不联会现象。结论 辽宁法库县、广东横琴岛可疑嗜人按蚊与四川嗜人按蚊不存在生殖隔离 ,也无种间差异 ,系不同地域分布的同一种嗜人按蚊。
- 杨文许国君康杨高琪郁涛席云华魏红雨陈怀录
- 关键词：嗜人按蚊唾腺染色体种间差异杂交
- 抗环子孢子蛋白保守II^+区单克隆抗体的制备及鉴定被引量：1
- 2004年
- 目的 获得针对恶性疟原虫环子孢子蛋白 (CSP)保守II+ 区 (RegionII+ )的单克隆抗体。 方法 采用恶性疟原虫保守II+ 区十二肽 (EWSPCSVTCGNG)免疫BALB/c小鼠 ,经融合 ,ELISA 3次筛选 ,获得 3株分泌针对保守II+ 区单克隆抗体的杂交瘤细胞株。 结果 ELISA检测结果显示单抗能与重组表达的恶性疟原虫CSP片段及天然CSP特异性反应。间接荧光抗体检测显示 ,单抗不仅能识别恶性疟原虫子孢子 ,也能识别约氏疟原虫子孢子。 结论 成功地获得了针对恶性疟原虫CSP保守II+
- 张瑞娟朱淮民李翔宇
- 关键词：疟原虫属单克隆抗体环子孢子蛋白ELISA疟疾
- PCR-RFLP技术用于鉴别赫坎按蚊复合体近缘种按蚊的研究被引量：16
- 2004年
- 目的 区别赫坎按蚊种团内近缘种。方法 应用聚合酶链式反应连接的限制性片段长度多态性方法 (PCR- RFL P)技术 ,对辽宁省现场捕获的按蚊用特异性 ITS2 引物进行 PCR扩增 ,限制性内切酶 Rsa 和 Hinf 消化 ,琼脂糖凝胶电泳分析。结果 中华按蚊的 PCR扩增产物能被限制性内切酶 Rsa 酶切成 35 0 bp和 2 0 0 bp两条酶切 DNA条带 ;嗜人按蚊核糖体 DNA (r DNA)的 PCR扩增产物能被限制性内切酶 Hinf 酶切成 4 10 bp的酶切 DNA条带 ;雷氏按蚊的 ITS2 基因 PCR扩增产物能分别被限制性内切酶 Rsa 和 Hinf 酶切 ,分别显示 35 0 bp和 4 0 0 bp的酶切 DNA条带 ;八代按蚊的 PCR扩增产物没有显示明显的限制性内切酶 Rsa 或 Hinf 酶切条带。结论 依据r DNA的 ITS2 区段基因特征建立的 PCR- RFL P技术可用于鉴别赫坎按蚊种团的中华按蚊、嗜人按蚊、雷氏按蚊和八代按蚊
- 周华云高琪顾政诚朱国鼎李菊林曹俊
- 关键词：嗜人按蚊中华按蚊ITS2核糖体DNA
