国家高技术研究发展计划(2001AA234011)
- 作品数：6 被引量：69H指数：4
- 相关作者：南发俊王鸿鹤朱孝峰冯公侃刘宗潮更多>>
- 相关机构：中国科学院中山大学中国科学院大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金中国科学院西部之光基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学更多>>
- 组织蛋白酶天然抑制剂研究
- 组织蛋白酶(Cathepsin)是半胱氨酸蛋白酶家族的主要成员,它是一类主要存在于溶酶体中的胞内蛋白酶,到目前为止从组织蛋白酶A到组织蛋白酶Z都已有报道。除组织蛋白酶C的分子量为200KDa 外,大多数组织蛋白酶的分子量...
- 谭宁华曾广智潘蓄林贾锐锐张玉梅熊江
- 关键词：组织蛋白酶活性筛选
- 文献传递
- 人细胞周期蛋白D1/CDK4基因的真核表达及生物活性鉴定被引量：4
- 2003年
- 通过生物工程获得人重组细胞周期蛋白 (cyclinD1 )及细胞周期蛋白激酶CDK4蛋白 ,作为抗癌药物筛选的分子靶点 .从人HL 6 0细胞中获得细胞周期蛋白D1 CDK4基因的cDNA ,先克隆至pGEMT Easy载体上 ,再经重组构建供体质粒pFastBac D1和pFastBac CDK4 .重组供体质粒转化感受态DH1 0Bac细胞 ,挑取确证为白色克隆的菌落振荡培养 ,分离制备高纯度杆粒DNA .以重组病毒适量感染昆虫细胞Tn 5B1 4 ,利用Bac to Bac杆状病毒表达系统在昆虫细胞Tn 5B1 4 (Hi5 )中表达相应的重组蛋白 .应用昆虫杆状病毒表达系统 (Bac to Bac)在昆虫细胞Tn 5B1 4中分别高效表达了人细胞周期蛋白D1和CDK4蛋白 .SDS PAGE分析表明 ,表达量占细胞可溶性蛋白质的 2 0 %左右 ,表达产物经Ni2 + NTA亲和层析纯化后纯度达 85 %以上 .研究表明 ,昆虫细胞表达的细胞周期蛋白D1和CDK4蛋白能促进Rb蛋白的磷酸化 ,具有生物活性 .成功构建了细胞周期蛋白D1及CDK4真核杆状病毒表达载体 ,并且在昆虫细胞中正确表达了具有生物活性的细胞周期蛋白D1及CDK4融合蛋白 .
- 王鸿鹤朱孝峰谢冰芬冯公侃沈竞康刘宗潮
- 关键词：细胞周期蛋白D1昆虫杆状病毒表达系统分子靶点真核表达生物活性
- Caspases抑制剂的研究进展被引量：18
- 2006年
- 目前证明Caspases蛋白酶家族在细胞凋亡的过程中起关键作用,因此也就成为药物发现的潜在靶点。Caspases抑制剂被认为是治疗细胞过度凋亡引起的相关疾病的有效手段。本文着重介绍了近些年来发展的Caspases抑制剂,特别是那些处于临床或接近临床阶段的候选药物。
- 陈益华张华杰南发俊
- 关键词：细胞凋亡CASPASES抑制剂
- 组织蛋白酶及其抑制剂研究进展被引量：37
- 2005年
- 组织蛋白酶是半胱氨酸蛋白酶家族的主要成员,在生物界已发现20余种,人体中主要存在11种,它们与人类肿瘤、骨质疏松、关节炎等多种重大疾病密切相关,是近年来备受关注的一类靶标蛋白酶。自从20世纪90年代以来,多种组织蛋白酶的晶体结构陆续明确,有关其研究进展较快。本文以人类组织蛋白酶为重点,主要介绍近15年来组织蛋白酶结构、功能和抑制剂研究方面的一些重要进展。
- 曾广智谭宁华贾锐锐潘蓄林
- 关键词：组织蛋白酶抑制剂
- 天然产物Diazonamide A的全合成研究进展
- 2005年
- 综述了海洋天然产物DiazonamideA全合成的研究进展,分析了各合成路线的关键步骤,讨论了各方法的特点。简单描述了DiazonamideA类似物构效关系的研究成果。参考文献17篇。
- 王文龙南发俊
- 关键词：全合成构效关系
- 海洋微生物杂环串联环(拟)肽生物活性研究进展被引量：2
- 2005年
- 综述了海洋微生物杂环串联环(拟)肽生物活性研究的最新进展,在此基础上对这类环肽的潜在药用前景作了展望。
- 王文龙姚德勇邢雅成南发俊
- 关键词：海洋微生物生理活性
- 人细胞周期蛋白D1及细胞周期蛋白激酶CDK4的原核表达及鉴定被引量：8
- 2003年
- 【目的】构建表达人细胞周期蛋白D1及细胞周期蛋白激酶CDK4融合蛋白的重组体。【方法】用RT-PCR从HL-60细胞中扩增细胞周期蛋白D1及CDK4基因片段,克隆到pGEM-Teasy载体上。测序鉴定后切下相应的片段,连接到表达载体pET-22b(+)上,重组质粒转化大肠杆菌BL21(DL3),使之高效表达融合蛋白细胞周期蛋白D1及CDK4。SDS-PAGE电泳及Westernblotting鉴定表达蛋白。【结果】用PCR扩增得到了正确的目的基因片段并构建成pET-cyclinD1和pET-CDK4两个原核表达载体。将其转化大肠杆菌,Westernblot检测证实了转化的大肠杆菌能表达细胞周期蛋白D1及CDK4融合蛋白。【结论】本研究成功构建了细胞周期蛋白D1及CDK4原核表达载体,后两者在细胞内能正确表达细胞周期蛋白D1及CDK4融合蛋白。
- 王鸿鹤朱孝峰谢冰芬冯公侃沈竞康刘宗潮
- 关键词：HL-60细胞肿瘤
