国家自然科学基金(30270876)
- 作品数：4 被引量：7H指数：2
- 相关作者：吴云锋王秀敏郝兴安王睿杨栋更多>>
- 相关机构：西北农林科技大学北京林业大学更多>>
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- 烟草蚀纹病毒外壳蛋白基因的克隆及在毕赤酵母中的表达被引量：3
- 2009年
- 利用RT-PCR方法获得烟草蚀纹病毒(TEV)外壳蛋白(CP)基因,大小为789bp。经过EcoRI和Not Ⅰ双酶切、定向克隆到pPIC9K,构建了真核表达载体pPIC9K-TEVCP。将重组质粒用Sal I线性化后电转化导入毕赤酵母GS115中,经PCR鉴定为阳性的菌落,利用甲醇进行诱导表达,筛选出了高效表达菌株GS115-11和GS115-14,表达的蛋白大小约为37kD。表达产物经SDS-PAGE割胶纯化后,免疫家兔,制备了特异性抗血清,ELISA法检测效价为1:1500。Western blot结果显示,制备的抗血清可以用来检测田间的发病植株。
- 王秀敏吴云锋韩烈保
- 关键词：烟草蚀纹病毒外壳蛋白
- 马铃薯Y病毒N株HC-pro基因的序列分析与表达被引量：2
- 2005年
- 马铃薯Ｙ病毒(Potato virus Y,PVY)是马铃薯Ｙ病毒属(Potyvirus)的典型成员,是烟草、马铃薯和辣椒等茄科作物病毒病的主要病原之一,分布于世界各地.近年烟草上的 PVY在全国范围内特别是陕西、黄淮和东北烟区流行呈上升趋势,且以PVY坏死株系（PVY-N)为主,重病田发生率达40%以上,并常与烟草花叶病毒、黄瓜花叶病毒混合侵染,严重影响烟草品质造成巨大的经济损失.
- 王睿吴云锋郝兴安付宏岐杨栋樊兵
- 关键词：HC-PRO基因马铃薯Y病毒
- 西瓜花叶病毒基因组全序列分析及其蚜虫体内受体蛋白的分离与鉴定
- ＜正＞西瓜花叶病毒（WMV）是马铃薯 Y 病毒属成员,由蚜虫以非持久性方式传播,广泛分布于世界各地, 主要危害西瓜和甜瓜,引起花叶病。近几年该病害发生严重,已经成为制约西瓜和甜瓜高产稳产最主要的因素之一。本文完成了我国西...
- 张建新吴云锋
- 文献传递
- 马铃薯Y病毒N株系HC-Pro基因在毕赤酵母中分泌表达与鉴定
- 2007年
- 以克隆载体pGEMT-PVY-NHC为模板,用PCR方法获得HC-Pro基因,构建表达载体pPIC9K-HC,将重组质粒经SalI单酶切后电转化PachiapichiaGS115菌株,筛选出对G418有高抗性和在MM培养基上生长缓慢的转化子。经摇瓶发酵和1%甲醇诱导后,SDS-PAGE检测发酵液上清,在66kD处有1个特异条带表达,目的条带蛋白占上清液总蛋白的40%。Westernblot鉴定表明,表达蛋白可以和HC抗体发生结合反应。
- 杨栋吴云锋王睿
- 关键词：HC-PRO基因毕赤酵母
- 西瓜花叶病毒2号hc-pro基因的克隆与原核表达
- ＜正＞西瓜花叶病毒2号（WMMV-2）是马铃薯Y病毒属的成员,它能被蚜虫以非持久性传播,造成瓜类大面积感病而减产。西瓜花叶病毒2号是单链正义RNA病毒,其编码的辅助成分/蛋白酶（hc-pro）是一种多功能的非结构蛋白,它...
- 杨旭光吴云锋黎登寨郝兴安王睿杨栋
- 文献传递
- 烟草蚀纹病毒对玉米矮花叶病防治效果的研究被引量：3
- 2007年
- 为了研究烟草蚀纹病毒(Tobaccoetch virus,TEV)对玉米矮花叶病(病原为甘蔗花叶病毒(SCMV))的预防效果,在防虫网室内,采用人工摩擦接种病毒的方法进行生物学试验,并用RT-PCR和实时荧光定量PCR技术对预防效果进行了检测。结果表明,经过TEV保护接种后再接种SCMV的植株长势明显优于只接种SCMV的植株,其叶长、叶宽和株高的差异均达到显著水平(P<0.05);在只接种SCMV全部发病10 d后,有13.8%经保护接种的植株叶片开始轻微褪绿,极大地延迟了花叶症状的发生;攻击接种50 d后,经TEV保护接种后再接种SCMV的玉米植株,体内SCMV CP基因表达量为只接种SCMV玉米的0.113 4倍。说明,SCMV能够有效地减轻玉米矮花叶病的发生及危害。
- 马琼吴云锋杨艳王秀敏郝兴安
- 关键词：烟草蚀纹病毒甘蔗花叶病毒玉米矮花叶病荧光定量PCR检测
- 西瓜花叶病毒外壳蛋白和辅助蛋白与介体蚜虫体内相关蛋白的相互作用
- 西瓜花叶病毒(WMV)是马铃薯 Y 病毒属成员,由蚜虫以非持久性方式传播,广泛分布于世界各地,主要为害西瓜和甜瓜,引起花叶病。该病害已经成为制约西瓜和甜瓜高产稳产最主要的因素之一。本实验室完成了我国西瓜花叶病毒的基因组全...
- 张建新吴云锋
- 文献传递
