广东省科技计划工业攻关项目(2003C34008)
- 作品数：6 被引量：100H指数：5
- 相关作者：邓春华郭海彬刘建中孙祥宙高勇更多>>
- 相关机构：中山大学附属第一医院中山大学河南省人民医院更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目广东省医学科学技术研究基金广州市科委科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- PADAM动物模型进行同种异体睾丸间质细胞移植的研究被引量：14
- 2005年
- 目的老年SD大鼠进行同种异体睾丸间质细胞移植探讨中老年男性雄激素部分缺乏症(PADAM)动物模型的可行性和疗效.方法选10只符合PADAM模型标准的老年SD大鼠作为受体,用成年SD大鼠的睾丸进行体外分离和培养,将获得的高纯度和高活力的睾丸间质细胞移植到老年SD大鼠的大腿内侧肌群内,定期检查其移植前后血清睾酮和游离睾酮的水平变化,并观察移植部位的情况.结果未应用免疫抑制剂,移植后的睾丸间质细胞保持良好的分泌功能,老年SD大鼠的血清睾酮和游离睾酮水平均显著升高,并大约于移植后的7～12d开始稳定在一定的水平,可持续27d以上.移植部位未见异常.结论睾丸间质细胞同种异体移植安全、有效、无明显排斥反应.
- 孙祥宙邓春华郭海彬刘建中
- 关键词：睾丸间质细胞睾酮游离睾酮
- 成人睾丸间质细胞的培养和鉴定被引量：16
- 2005年
- 目的寻求一种有效的体外分离、纯化成人睾丸间质细胞的方法。方法利用4个梯度(60%、34%、26%、21%)的Percoll液分离、纯化成人睾丸间质细胞。对分离的细胞进行细胞学观察、锥虫蓝染色、3β羟基类固醇脱氢酶(3βHSD)染色、分泌睾酮能力和绒毛膜促性腺激素(hCG)对分离睾丸间质细胞的作用等检测。结果通过该方法能够获得高纯度(>90%)的成人睾丸间质细胞,并通过上述实验检测证实分离、纯化的睾丸间质细胞有良好的分泌睾酮能力。结论采用该方法对成人睾丸间质细胞进行初步的分离和纯化是简单有效的。
- 孙祥宙邓春华郭海彬刘建中
- 关键词：睾丸间质细胞纯化成年人
- 老年大鼠睾丸间质细胞结构和功能变化的实验研究被引量：14
- 2005年
- 目的:研究老年SD大鼠(PADAM动物模型)睾丸间质细胞形态、分泌功能变化,探讨老年大鼠睾丸间质细胞的功能状态。方法:分别取青年SD大鼠和老年各20只,静脉血测定血清总睾酮和游离睾酮的浓度,并通过组织切片和透射电镜观察两个年龄组大鼠睾丸间质细胞形态学变化;此外,分别用hCG、Forskolin刺激体外培养的两个年龄组大鼠的睾丸间质细胞,比较培养基中睾酮和孕酮的浓度。结果:老年大鼠的血清总睾酮[(3.07±0.75)nmol/L]和游离睾酮[(0.71±0.65)nmol/L]均比青年大鼠[(10.89±6.11)nmol/L和(2.42±1.02)nmol/L]显著降低(P<0.05);细胞形态有较显著差异;体外培养的大鼠睾丸间质细胞分泌能力显著降低(P<0.05)。结论:老年SD大鼠血清睾酮和游离睾酮浓度显著低于青年SD大鼠,原因在于睾酮合成酶系统整体功能衰退。
- 邓春华郭海彬刘建中
- 关键词：间质细胞睾酮老年
- 大鼠睾丸Leydig细胞的培养和鉴定被引量：40
- 2006年
- 目的:研究体外培养大鼠睾丸Leyd ig细胞的有效方法。方法:原代培养大鼠睾丸Leyd ig细胞,用4 U/m l人绒毛膜促性腺激素(hCG)作用细胞,对照组未用hCG,放射免疫法测定培养液中睾酮浓度,3β羟类固醇脱氢酶(3β-HSD)免疫组化染色观察睾丸Leyd ig细胞形态和生物学特性。结果:培养细胞成分均一、增殖旺盛、分化率高。接种72 h后大鼠睾丸Leyd ig细胞纯度达95%。接种后24 h内,hCG刺激组较对照组睾酮分泌量明显提高(P<0.05)。结论:体外培养的睾丸Leyd ig细胞可分泌高浓度的睾酮;睾丸Leyd ig细胞的纯化和培养方法的建立,可为中老年男性雄激素部分缺乏综合征睾酮替代治疗的基础和临床研究提供一条可行的思路。
- 刘建中郭海彬邓春华欧咏虹彭爱萍
- 关键词：LEYDIG细胞细胞培养睾酮体外研究
- 大鼠脂肪组织来源干细胞的分离、培养和生物学特性的研究被引量：22
- 2008年
- 目的:建立一种分离和培养大鼠脂肪干细胞的方法,并探讨获得的脂肪干细胞的部分生物学特性。方法:取SD大鼠腹股沟处的皮下脂肪,I型胶原酶消化法获取原代脂肪干细胞,接种至含10%胎牛血清的DMEM培养液,培养并适时传代,每日在倒置显微镜下观察记录细胞形态和增殖特征,测定其生长曲线,进行冻存复苏实验。第3代细胞使用成骨诱导液诱导其向成骨细胞分化,进行VonKossa染色;使用成脂诱导液诱导其向成脂细胞分化,进行油红O染色。结果:从大鼠脂肪组织中分离出脂肪干细胞,其在体外生长增殖迅速,呈成纤维样细胞生长。生长曲线表明第3代脂肪干细胞增殖能力最强,可以在地塞米松、维生素C、β-甘油磷酸钠的诱导下,表现出成骨细胞特性,VonKossa染色出现矿化结节;在IBMX(3-异丁基-1-甲基黄嘌呤)、吲哚美辛、胰岛素的诱导下,表现出脂肪细胞特性,油红O染色后发现胞浆内有脂肪滴。脂肪干细胞在液氮中冻存1个月后,其生长增殖活性和多向分化能力没有明显降低。结论:成功建立了一种简单有效的分离和培养大鼠脂肪干细胞的方法,获得的脂肪干细胞生长增殖旺盛,具有多向分化能力,可以方便地保存,有望作为细胞治疗和组织工程的种子细胞。在分离大鼠的脂肪干细胞时,NH4Cl裂解红细胞这一步可以省略,地塞米松在成脂诱导过程中不是必需的。
- 邓春华孙祥宙高勇罗道升刘贵华黄燕平
- 关键词：脂肪干细胞成骨诱导
- 大鼠脂肪干细胞体外诱导为神经元样细胞的研究被引量：2
- 2009年
- 目的建立将大鼠脂肪干细胞体外诱导分化为神经元样细胞的方法。方法取SD大鼠腹股沟处的皮下脂肪,分离出脂肪干细胞并培养传代。使用诱导剂IBMX诱导ADSCs向神经元样细胞分化,检测神经前体细胞标志Nestin和神经元标志NF200、MAP2,以明确分化结果,而且检测Nestin在诱导过程中的表达阳性率的变化情况,采用SPSS11.0软件进行统计学分析。结果从大鼠脂肪组织中分离出脂肪干细胞,经诱导剂IBMX诱导后,ADSCs表现出神经元样细胞形态,大部分细胞表达nestin,少部分细胞表达MAP2和NF200,随着诱导的进行,nestin的表达是升高的。结论成功地建立了一种将大鼠脂肪干细胞体外诱导分化为神经元样细胞的方法,ADSCs有希望成为治疗神经性勃起功能障碍的、理想的组织工程种子细胞。
- 高勇孙祥宙邓春华刘贵华黄燕平廖勇彬
- 关键词：脂肪干细胞神经元勃起功能障碍
