重庆市科技攻关计划(7830)
- 作品数：9 被引量：32H指数：4
- 相关作者：王景周王昌铭向静江德鹏李莹更多>>
- 相关机构：第三军医大学大坪医院第三军医大学西南医院北京军区总医院更多>>
- 发文基金：重庆市科技攻关计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人脐血间充质干细胞海马移植治疗大鼠血管性痴呆的实验研究被引量：1
- 2009年
- 目的:探讨人脐血间充质干细胞(MSCs)海马移植对血管性痴呆(VD)模型大鼠学习记忆能力的影响及其可能机制。方法:66只SD大鼠随机分为假手术组(n=6)、模型组(n=30)和细胞移植组(n=30);模型组及细胞移植组又分为术后3d组、7d组、14d组、30d组、60d组5个亚组各6只。假手术组仅分离颈总动脉,模型组采用两血管结扎法建立VD大鼠模型,细胞移植组在建立VD大鼠模型后于大鼠右侧海马CA1区移植经纯化、BrdU标记的人脐血MSCs。于术后第3、7、14、30、60天采用免疫组织化学染色观察大鼠脑内移植后BrdU阳性细胞的分布、存活情况及胆碱乙酰转移酶(ChAT)阳性细胞数。于术后60d采用Morris水迷宫系统检测大鼠学习记忆能力。结果:移植后BrdU阳性细胞主要集中在海马及邻近区域,以术后3d组(151.0±7.9)和7d组(95.3±6.4)最多,14d组(51.6±7.2)和30d组(29.4±5.2)则进行性减少,60d组仅可见少量BrdU阳性细胞(8.7±3.2)。与模型组比较,细胞移植组各时间点海马区ChAT阳性细胞数均较多(P<0.05),术后60d大鼠学习记忆能力明显恢复(P<0.05)。结论:海马移植入脐血MSCs可在VD大鼠脑内存活并向邻近区域迁移,能改善大鼠学习记忆能力,其机制可能与内外源性干细胞的增殖分化、海马微环境的改善和胆碱能神经元分化及生长有关。
- 李莹张微微魏微王景周
- 关键词：人脐血干细胞移植间充质干细胞痴呆胆碱乙酰转移酶
- 人脐血单个核细胞透过血脑屏障的可能性被引量：5
- 2005年
- 目的:探讨血脑屏障对脐血单个核细胞的选择性通透性。资料来源:应用计算机检索Medline和Elsevier全文数据库1996/2004与脐血单个核细胞及血脑屏障相关文章,检索词“umbilicalcordbloodcells,mononuclearcells,mesenchymalstemcells,Intravenous,Intraarterial,intracarotid,bloodbrainbarrier”,并限定文章语言种类为English。同时计算机检索中国期刊网专题全文数据库2002/2004期间的文章,检索词“脐血细胞、单个核细胞、间充质干细胞、血脑屏障”,限定文章语言种类为中文。资料选择:对资料进行初审。纳入标准:有关血脑屏障和脐血单个核细胞或间充质干细胞诱导分化、向脑实质定向迁移的文献。排除标准:文献中重复研究、综述类文章。资料提炼:共收集到38篇相关文献,其中10篇因系重复研究而被筛除。选取的28篇分别选自19种不同的杂志。资料综合:28篇文献对脐血单个核细胞如何透过血脑屏障进入脑实质进行综合分析。研究表明,移植脐血单个核细胞能够透过血脑屏障在宿主中枢神经系统内存活、分化为神经细胞,并迁移到病变部位与宿主神经细胞在形态结构和功能上形成整合而改善感觉、运动和认知等神经功能的缺损。不同的病理生理情况下血脑屏障对其有选择性通透作用,脐血单个核细胞进人脑组织的主要机制为黏附分子介导的特异性转移、血脑屏障固有簿弱环节、血脑屏障通透性的改变及病变组织的趋化作用等。结论:已证实脐血单个核细胞经外周血管输入可透过血脑屏障,并改善神经功能的缺损,这为移植干细胞治疗中枢神经系统疾病提供了理论基础。
- 王昌铭王景周
- 关键词：造血干细胞移植血脑屏障通透性
- 神经系统疾病中应用人脐血细胞对损伤的修复作用被引量：1
- 2005年
- 背景:脐血容易获得,富含干细胞,不会引起社会及法律问题。但脐血干细胞蕴含着能分化成神经系统细胞的潜能有多大?目的:就近年来脐带血细胞在神经系统的应用进行综述。资料来源:应用计算机检索Medline1995/2004和Elsevier全文数据库1995/2004的脐血细胞及神经系统疾病治疗的文章,检索词为“humanumbilicalcordbloodcells,nervecells,nervoussystemdisease”,并限定文章语言种类为English。计算机检索中国期刊网专题全文数据库2002/2004的神经干细胞方面相关文章,限定文章语言种类为中文,检索词为“神经元,神经干细胞等等”。资料选择:就检索到的文献进行初审,选取试验包括上述实验组和对照组的文献,筛除明显不随机实验的研究,以近5年且发表在较权威杂志者优先,排除综述类文献。对剩余的文献开始查找全文。资料提炼:共收集到40篇关于脐血细胞的文献,33个试验符合纳入标准。排除的7篇试验中,系重复的同一研究。资料综合:33篇中22篇关于脐血细胞应用,11篇为实验动物模型。总体来说脐血细胞在神经系统疾病中的应用已经取得了初步的效果。结论:脐血细胞在神经系统疾病中的应用将为细胞移植治疗神经系统疾病提供更广泛的来源,也为神经系统疾病的治疗带来了新的希望。
- 周毅王景周
- 关键词：脐带神经系统疾病
- 脐血单个核细胞体外定向分化为神经干细胞及其致瘤性的实验研究被引量：4
- 2007年
- 目的:探讨人脐血单个核细胞的分离培养和诱导后神经干细胞标志物mRNA的表达,并观察其致瘤性。方法:使用密度梯度离心法得到脐血单个核细胞,用体外贴壁生长的方法获得脐血间质干细胞(MSCs)。观察培养过程中脐血MSCs形态的变化,通过流式细胞仪检测干细胞表面抗原的表达。使用NGF和RA联合诱导后,用RT-PCR方法鉴定诱导前后神经干细胞(NSCs)标志物巢蛋白(Nestin)及Musashi-1蛋白mRNA的表达;收集培养后7d的MSCs,接种于裸鼠皮下,观察是否有增生物的出现,并观察细胞组织形态学变化。结果:脐血单个核细胞贴壁生长后大部分细胞呈梭形,诱导后可分化为神经元样细胞。流式细胞仪检测该细胞不表达CD34,CD11a和CD11b,强表达CD29,符合MSCs特征。诱导后,NSCs表面标志Nestin及Musashi-1表达明显增强(P<0.05),48h达高峰,然后逐渐减弱;细胞接种后12周,在裸鼠皮下不能形成肿瘤,与对照组相比,细胞形态学未出现恶性变化。结论:脐血中存在MSCs,分离后可以体外扩增,诱导后分化为神经元样细胞,并表达NSCs表面标志。在裸鼠体内不具有成瘤性。脐血能够成为NSCs的新来源。
- 向静王昌铭王景周
- 关键词：脐血单个核细胞神经干细胞诱导分化巢蛋白致瘤性
- 脐血单个核细胞体外分离和定向分化为神经干细胞的实验研究被引量：2
- 2007年
- 目的探讨人脐血单个核细胞的分离培养和诱导后神经干细胞(NSCs)标志物mRNA的表达。方法使用密度梯度离心法得到脐血单个核细胞,用体外贴壁生长的方法获得脐血间质干细胞(MSCs),观察培养过程中脐血MSCs形态的变化,通过流式细胞仪检测干细胞表面抗原的表达,使用NGF和RA联合诱导后,用RT-PCR方法鉴定诱导前后NSCs标志物巢蛋白(nestin)及Musashi-1蛋白mRNA的表达。结果脐血单个核细胞贴壁生长后大部分细胞呈梭形,诱导后可分化为神经元样细胞。流式细胞仪检测该细胞不表达CD34、CD11a、CD11b和强表达CD29,符合MSCs特征。诱导后,NSCs表面标志Nestin及Musashi-1表达明显增强,48h达高峰,然后逐渐减弱。结论脐血中存在间质干细胞,分离后可以体外扩增,诱导后分化为神经元样细胞,并表达NSCs表面标志。脐血能够成为NSCs的新来源。
- 向静王昌铭王景周
- 关键词：脐血单个核细胞MUSASHI-1
- 脐血干细胞海马移植对VD大鼠脑内Ach及AchE活性的影响被引量：7
- 2007年
- 目的观察海马移植脐血干细胞对血管性痴呆(VD)大鼠脑内Ach含量及AchE活性的影响。方法分离正常分娩胎儿的脐带血单个核细胞,以贴壁培养法得到间质干细胞(MSCs),采用RT-PCR方法检测Nestin及musashi-1。制作VD大鼠模型,8～10d后行脐血干细胞海马移植。移植4周后,检测大鼠的学习记忆能力,并检测其脑内乙酰胆碱(Ach)含量及乙酰胆碱脂酶(AchE)活性。结果脐血干细胞在分离后48h高表达Nestin及musashi-1;海马移植脐血干细胞4周后,治疗组与模型组比较,Ach含量及AchE活性明显升高(P<0.01),大鼠学习记忆能力增强。结论脐血中表达神经干细胞(NSCs)的标志物,海马移植脐血干细胞能明显改善VD大鼠胆碱能系统的功能,调节脑内Ach生理代谢,增强学习记忆能力,从而达到治疗VD的目的。
- 向静王昌铭江德鹏王景周
- 关键词：脐血干细胞乙酰胆碱乙酰胆碱脂酶
- 脐血单个核细胞体外培养和诱导后神经干细胞标志物mRNA的表达被引量：10
- 2005年
- 目的:探讨人脐血单个核细胞(humancordbloodmonocytes,HCMNCs)培养增殖过程中的形态变化及诱导后神经干细胞标志物mRNA的表达。方法:采用OLYMPUS倒置显微镜观察培养过程中HCMNCs形态的变化;RT-PCR方法鉴定MNCs用神经生长因子(NGF)和维甲酸(RA)诱导前后神经干细胞(neuralstemcells,NSCs)标志物巢蛋白(Nestin)及Musashi-1蛋白mRNA的表达。结果:HCMNCs培养前,胞体较小,呈均一的圆形;培养后,细胞胞体增大,有破骨样细胞和间质样细胞两种形态。破骨样细胞胞体较大,呈圆形,多个核。间质样细胞胞体呈较均一的长梭形,形态类似于骨髓MSCs,但较骨髓MSCs稍小。RT-PCR检测提示,诱导前HCMNCs中Nestin弱表达,Musashi-1无表达;诱导后两者均表达增强,之后逐渐减弱。结论:使用密度梯度离心法可以从脐血中分离得到具有多向分化潜能的HCMNCs,经过EGF和RA诱导后,神经干细胞标志表达一过性增强后减弱。
- 向静江德鹏王昌铭王景周
- 关键词：脐血单个核细胞巢蛋白MUSASHI-1
- 血管性痴呆发生机制及临床治疗研究被引量：2
- 2007年
- 王景周高唱高东姚国恩周红杰张莉莉黄志玉李强杨清武
- 关键词：血管性痴呆脑血管疾病痴呆综合征脑血管病低灌注
- 人脐血干细胞海马CA1区移植及GM1腹腔注射治疗大鼠血管性痴呆被引量：4
- 2008年
- 目的探讨人脐血干细胞(human cord blood stem cells,HCBSCs)海马移植对血管性痴呆(vascular dementia,VD)模型大鼠的治疗作用,并观察单唾液酸神经节苷脂(monosialoganglioside,GM1)是否具有协同作用。方法人脐血干细胞经培养和纯化,以BrdU标记;大鼠行双侧颈动脉(2VO)结扎制作血管性痴呆模型;按随机数字表法分为对照组、模型组、细胞移植组、GM1注射组、细胞移植联合GM1注射组(简称联合治疗组);Morris水迷宫系统检测大鼠行为学;立体定向仪将标记细胞立体定向注射到大鼠海马CA1区;比较术后24 h、3、7、14、21、28 d各时相点大鼠行为学变化;免疫组织化学染色观察BrdU标记细胞存活情况,大鼠脑内生长相关蛋白(growth associated protein-43,GAP-43)阳性细胞增殖情况。结果2VO模型大鼠术后28 d学习记忆能力下降;经治疗各组均有所恢复,治疗组与模型组相比有显著差异,联合治疗组差异最明显。BrdU标记细胞注射到大鼠脑中可存活,并在海马及血管周围区聚集,联合治疗组14 d后比细胞移植组存活多;注射周围区及皮层GAP-43阳性细胞增殖,GM1注射组也可促进GAP-43阳性细胞增殖,联合治疗组阳性细胞数量最多。结论脐血干细胞立体定向注射至大鼠海马CA1区可存活,并可刺激GAP-43阳性细胞增殖,GM1治疗有协同作用。
- 李莹王景周
- 关键词：人脐血干细胞血管性痴呆
