浙江省中医药管理局重点科研项目
- 作品数：113 被引量：1,024H指数：17
- 相关作者：林胜璋童培建肖鲁伟金红婷何帮剑更多>>
- 相关机构：浙江中医药大学浙江大学温州医学院附属第二医院更多>>
- 发文基金：浙江省自然科学基金国家自然科学基金国家临床重点专科建设项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 淫羊藿苷伍用三七总皂苷对小鼠免疫功能的调节作用被引量：27
- 2006年
- 目的研究淫羊藿苷(icariin,ICA)伍用三七总皂苷(Panaxnotoginsengsaponins,PNS)对小鼠免疫功能的调节作用,为该组合药物改善阿尔茨海默病(Alzheimer'sdisease,AD)动物模型空间学习记忆能力的作用机制提供部分实验依据。方法采用血清药理学方法观察小鼠连续igICA+PNS[(40+320)、(80+640)、(160+1280)mg/kg]、单用ICA(80mg/kg)和PNS(640mg/kg)7d制得的含药血清对伴刀豆蛋白A(ConA)和脂多糖(LPS)诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖、IL-2分泌的影响,并观察脏器指数的变化。结果ICA伍用PNS[(80+640)、(160+1280)mg/kg]具有较强的协同作用,其含药血清能明显促进ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖(P<0.01、0.05),量效曲线呈倒U形;含药血清对LPS诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖无显著促进作用(P>0.05)。ICA+PNS[(80+640)和(160+1280)mg/kg]含药血清能明显促进IL-2生成(P<0.01),两组分合用作用强于单用,提示具有较强的协同作用,其量效曲线亦呈倒U形分布。单用ICA、PNS或两者合用均未明显影响小鼠脏器指数(P>0.05)。结论ICA伍用PNS对小鼠免疫系统具有一定的选择性调节作用,主要增强T细胞功能。
- 肖幸丰王志强楼宜嘉
- 关键词：淫羊藿苷三七总皂苷免疫调节作用血清药理学
- 脾虚型溃疡性结肠炎患者的肠道菌群特征研究被引量：13
- 2020年
- [目的]探讨脾虚型溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)患者的肠道菌群特征。[方法]收集2019年1月1日至2019年3月31日于浙江中医药大学附属第二医院、浙江省中医院、浙江省人民医院以及浙江大学附属第二医院门诊及住院的14例脾虚型UC患者、16例其他证型UC患者的粪便样本,同时收集同时间段至浙江中医药大学附属第二医院体检的8例健康者的粪便样本,提取三组粪便样本中菌群DNA,根据16S V3~V4区设计引物进行扩增,通过Illumina Miseq平台进行测序,以生物信息分析软件对测序结果进行分析,比较三组样本菌群组成和结构,分析脾虚型UC患者的肠道菌群特征。[结果]门分类水平上其他证型UC组中变形杆菌门的相对丰度显著高于健康人群组(P<0.01)。属分类水平上,脾虚型UC组和其他证型UC组中分枝杆菌属、包西氏菌属、丁酸单胞菌属的相对丰度显著低于健康人群组(P<0.05),而埃希氏菌属/志贺氏菌属、假单胞菌属的相对丰度明显高于健康人群组(P<0.05)。此外,代尔夫特菌属的相对丰度在脾虚型UC组中明显低于其他证型UC组和健康人群组(P<0.05)。[结论]脾虚型UC患者的肠道菌群特征与其他证型UC患者及健康人群相比存在一定的差异,代尔夫特菌属明显减少可能是脾虚型UC患者肠道菌群的特征性变化。
- 马芳笑吴佳倩柯一帆钟继红刘英超
- 关键词：溃疡性结肠炎脾虚肠道菌群
- 分离培养方法及冻存技术对犬骨髓间充质干细胞生长和增殖的影响被引量：5
- 2008年
- 背景:骨髓间充质干细胞在体外长期培养易发生自发分化,而失去多分化潜能,因此必须对培养的细胞及时冻存,需要时再进行复苏。目的:建立犬骨髓间充质干细胞体外分离、培养、增殖、冻存的方法。设计、时间及地点:对照观察细胞学实验,于2005-06/2008-06在浙江中医药大学附属第一医院骨伤研究所完成。材料:健康成年雄性Beagle犬用于骨髓间充质干细胞的提取。方法:采用密度梯度离心法结合贴壁培养法分离纯化骨髓间充质干细胞,并进行传代扩增培养。将第2代骨髓间充质干细胞与12.5%DMSO混匀置于冻存管中,采用慢冻快融法进行冻存和复苏:将冻存管置于-4℃冰箱2h,然后移入-30℃冰箱2h,再置于厚壁塑料泡沫盒中,扎紧密封,置-80℃冰箱过夜后,取出冻存管直接放入液氮中保存,或放入-80℃冰箱保存。复苏时将冻存管从液氮或-80℃冰箱中取出,立即置37℃水浴并轻轻摇动,1～2min内迅速解冻。主要观察指标:复苏前后细胞成生长活性及形态变化。结果:分离的骨髓间充质干细胞为以均一的梭形的成纤维细胞样贴壁生长,贴壁及增殖能力强,传代细胞贴壁较快。经过液氮长期冻存后,将复苏后的骨髓间充质干细胞再培养,细胞形态及生长状态与冻存前无差异,均呈长梭形均匀分布生长,细胞生长增殖旺盛。结论:采用密度梯度离心法结合贴壁培养法可获得犬骨髓间充质干细胞,应用慢冻快融技术进行冻存和复苏,较好的保持了冻存细胞的活力和功能。
- 童培建何帮剑金红婷赵红昌肖鲁伟
- 关键词：骨髓间充质干细胞体外培养生物学特性冻存
- 温补肾阳药对甲状腺切除的肾阳虚大鼠肝线粒体蛋白质组的影响被引量：12
- 2009年
- 目的:研究温补肾阳药对肾阳虚动物肝线粒体蛋白质组的影响。方法:12只SD大鼠,随机分为3组,每组4只。模型组和治疗组切除两侧甲状腺,正常组做相应的假手术,但不切除甲状腺。喂养7 d后模型组和治疗组大鼠出现拱背耸毛、大便稀溏等肾阳虚的症状。从第8天开始,治疗组每天喂饲温补肾阳药1次,给药剂量6.7 g.kg-1,其他2组喂饲等体积的生理盐水,连续6 d后,断头处死3组大鼠,分离提取其肝线粒体蛋白质,分别用荧光染料Cy3,Cy5标记,每个Cy3及Cy5标记的样品与等量Cy2标记的内标混合后在同一块凝胶中进行电泳分离,经不同光激发后扫描得到不同样品的蛋白质组图谱。经DeCyder 6.5软件进行差异蛋白质组分析,并对差异蛋白质进行质谱鉴定。结果:双向电泳后,平均每块胶检测到997个蛋白质点,其中所有图谱共有的点有687个,并从中筛选到22个差异蛋白,其中热休克蛋白60、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物、氨甲酰磷酸合成酶Ⅰ,ATP合成酶、乳铁传递蛋白、ATP酶质子通道蛋白、电子传递黄素蛋白和类钙离子激活中性蛋白酶12在肾阳虚状态下表达量均增加,而二氢硫辛酰胺支链酰基转移酶、脂酰辅酶A脱氢酶、鸟氨酸转氨酶和GTP结合调节蛋白在肾阳虚状态下表达量均降低。经温补肾阳药治疗后,热休克蛋白60、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物、ATP合成酶、乳铁传递蛋白、ATP酶质子通道蛋白、电子传递黄素蛋白二氢硫辛酰胺支链酰基转移酶、脂酰辅酶A脱氢酶和GTP结合调节蛋白表达量均增加,而氨甲酰磷酸合成酶Ⅰ和类钙离子激活中性蛋白酶12表达量减少。结论:温补肾阳药可能通过调节物质代谢、保护线粒体膜稳定性和维护细胞内信号传导而起到治疗肾阳虚的作用。
- 卢德赵沃兴德沃立科李毅唐利华杨贞
- 关键词：蛋白质组肾阳虚温补肾阳药线粒体
- 四物汤对血虚证模型大鼠肝线粒体蛋白质组的影响被引量：11
- 2010年
- 目的探讨四物汤治疗血虚证的机理。方法Wistar大鼠随机分为模型组、治疗组、正常组各6只。模型组和治疗组大鼠在第1、4、7d皮下注射2%乙酰苯肼生理盐水注射液,第4d起模型组生理盐水灌胃,治疗组给予四物汤灌胃,正常组给予生理盐水,连用7d后,检测外周血象、肝脾湿重;提取肝脏线粒体蛋白质,用双向电泳等蛋白质组学技术测定大鼠肝线粒体中有影响的蛋白质。结果模型组大鼠出现萎靡、苍白等血虚症状,肝脾明显肿大,红细胞数和血红蛋白量明显降低,白细胞、网织红细胞计数明显升高(P<0.01);四物汤治疗后外观较快恢复,红细胞、血红蛋白、网织红细胞数较上升(P<0.01);模型大鼠肝线粒体蛋白质与正常相比有14个能量代谢相关蛋白质的水平发生改变,四物汤可使这些改变的蛋白质水平有所恢复。结论四物汤可以调节肝线粒体内一些酶和伴侣分子,清除自由基和过氧化物,稳定线粒体结构,保护线粒体功能;改善糖、脂类、蛋白质代谢,从蛋白质分子水平改善血虚动物的虚损状况。
- 龚文君沃兴德卢德赵丁慧登李毅
- 关键词：四物汤血虚证肝线粒体蛋白质组中医药疗法
- 变应性鼻炎患者血清中Eotaxin、ICAM-1、ECP、IL-4、IL-5、IFN-γ的表达水平及临床意义被引量：20
- 2015年
- 目的检测变应性鼻炎患者血清中Eotaxin、ICAM-1、ECP、IL-4、IL-5、IFN-γ的表达水平,探讨其与变应性鼻炎持续状态及症状的相关性。方法 60例中度、重度变应性鼻炎患者,其中持续性、间歇性各30例,以30例健康体检者作为对照,应用ELISA法对受试者进行血清Eotaxin、ICAM-1、ECP、IL-4、IL-5、IFN-γ水平测定,分析各指标在间歇性与持续性变应性鼻炎患者间的差异性及与症状评分的相关性。结果中度、重度变应性鼻炎患者血清ICAM-1高于对照组,Eotaxin、ECP低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.01);IL-4、IL-5、IFN-γ鼻炎组与对照组均在检测敏感水平以下。持续性鼻炎组ICAM-1高于对照组;持续性鼻炎组ECP高于间歇性鼻炎组,差异均有统计学意义(P<0.01)。Eotaxin与间歇性鼻炎组喷嚏症状、持续性鼻炎组鼻塞症状均呈负相关(P<0.05)。结论 Eotaxin、ICAM-1、ECP参与中度、重度变应性鼻炎病理过程,且ECP、ICAM-1与持续状态有关,Eotaxin与喷嚏、鼻塞呈负相关。
- 陈益丹金肖青朱杰王强房瑛诸剑芳
- 关键词：变应性鼻炎嗜酸性粒细胞趋化因子细胞间黏附分子嗜酸粒细胞阳离子蛋白白介素-5
- 矢车菊素-3-葡萄糖苷抑制体内外卵巢癌生长的作用被引量：5
- 2012年
- 目的:探讨矢车菊素-3-葡萄糖苷对体内外卵巢癌生长的影响及其机制。方法:矢车菊素-3-葡萄糖苷作用人卵巢癌细胞株HO-8910PM后,CCK-8法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blotting检测卵巢癌细胞中Mucin-4蛋白表达;建立起裸鼠卵巢癌皮下移植瘤模型,观察矢车菊素-3-葡萄糖苷对裸鼠卵巢癌皮下移植瘤生长的影响;免疫组织化学法检测肿瘤组织中Ki-67和Mucin-4的阳性表达。结果:与对照组相比较,矢车菊素-3-葡萄糖苷可显著抑制体外卵巢癌HO-8910PM细胞生长,并明显诱导细胞凋亡;可显著下调卵巢癌细胞中Mucin-4的表达。矢车菊素-3-葡萄糖苷可显著抑制裸鼠卵巢癌皮下移植瘤生长;可明显降低卵巢癌肿瘤组织中Ki-67和Mucin-4的阳性表达。结论:矢车菊素-3-葡萄糖苷可显著抑制体内外卵巢癌生长,该作用可能通过抑制Mucin-4蛋白表达而实现。
- 曾林钗高洁张瑞
- 关键词：卵巢癌
- 赵宏利六经辨证治疗卵巢储备功能减退经验被引量：12
- 2019年
- 目的:总结赵宏利主任中医师治疗卵巢储备功能减退经验。方法:通过跟随临诊、学习验案、研读中医经典,分析其六经辨证治疗本病的思路,总结其临证经验。结果:赵宏利主任中医师从中医经典入手,认为卵巢储备功能减退可根据六经辨证理论,主要分为太阳少阳合病、少阴病、太阴少阴同病三大类,其中少阴病又可分为寒化、热化及心肾不交三型。累及脏腑包括膀胱、肝胆、心肾、肺脾。用药"因人分期"调治,衷中参西,药食同治,为中医治疗本病提供了新思路。结论:赵宏利六经辨证治疗卵巢储备功能减退经验特色鲜明,疗效显著,值得学习与推广。
- 陈贤微赵宏利
- 关键词：六经辨证
- 南方红豆杉水提物诱导人肺癌A549细胞凋亡及其分子机制的实验研究被引量：27
- 2011年
- 目的探讨南方红豆杉水提物诱导人肺癌A549细胞的凋亡作用及其分子机制。方法采用噻唑蓝(MTT)法检测南方红豆杉水提物对A549细胞的增殖抑制作用;以光镜、电镜、膜联蛋白Ⅴ-FITCPI(An-nexinⅤ-FITC/PI)标记法检测细胞凋亡;以蛋白印迹法分析南方红豆杉水提物对细胞外信号调节蛋白激酶1/2(ERK1/2),c-jun氨基未端激酶1/2(JNK1/2)和生存素(survivin)蛋白表达的影响。结果南方红豆杉水提物能抑制A549细胞的增殖;南方红豆杉水提物处理A549细胞后,光镜与电镜下可见到明显的凋亡细胞;Annexin Ⅴ-FITC/PI标记法的定量检测进一步证实了南方红豆杉水提物诱导细胞凋亡的作用;蛋白印迹检测表明南方红豆杉水提物能使survivin表达下降,对ERK1/2和JNK1/2表达无影响。结论南方红豆杉水提物能显著抑制A549细胞增殖,诱导细胞凋亡,主要通过调节survivin蛋白的表达来实现。
- 舒琦瑾李萍王彬彬
- 关键词：南方红豆杉人肺癌A549细胞凋亡
- 颈性眩晕的椎动脉起始段(V_1段)血管形态病理学改变被引量：7
- 2014年
- [目的]探索颈性眩晕的椎动脉起始段(V1段)血管形态病理学改变。[方法]回顾1999年至2011年以头晕为主症,符合寰枕痛、恶心(呕吐)、耳鸣(耳塞)、视物模糊(视物旋转)4项症状中2项以上,经颅多普勒检测有椎-基底动脉血流速增快或减慢患者1680例,分析这些患者的椎-基底动脉CT血管造影三维重建技术(3D-CTA)的血管形态影像资料,观察椎动脉V1段血管形态病理学改变情况。[结果]颈性眩晕患者椎动脉V1段血管形态病理学有椎动脉纤细、椎动脉痉挛、椎动脉穿孔位置异常、椎动脉走行迂曲、椎动脉起始源异常、椎动脉瘤(或伴钙化)6种改变。[结论]颈性眩晕的椎动脉V1段存在6种血管形态病理学改变,根据这些病理改变,有助于在临床上判断预后,选择不同手法进行针对性地治疗,并指导患者在生活中的注意事项。
- 范炳华许丽林敏李伟汪芳俊徐泉珍
- 关键词：颈性眩晕血管形态病理改变
