温州市科技局科研基金(Y20100204)
- 作品数：2 被引量：5H指数：1
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- 小鼠模型疫苗HBV S-ecdCD40L表达载体的构建及其融合蛋白生物活性预测
- 2013年
- 目的制备小鼠模型疫苗HBV S-ecdCD40L融合基因表达载体并采用软件预测其所表达蛋白的合理性及生物活性。方法首先从质粒中扩增HBV S基因,并从小鼠淋巴细胞中扩增CD40L胞外段(extracellular domain,ECD)基因。然后通过RT-PCR法将其串联并与载体相连接,完成构建后采用软件分析其所表达蛋白是否与预期一致。结果构建小鼠模型表达载体并通过软件分析HBV S、ecdCD40L两个基因连接之后其蛋白的疏水性和亲水性无改变,也没有出现新的表位。连接链(linker)不影响融合蛋白的二级结构。结论该载体的设计符合预期,其表达的融合蛋白保留了HBV S和小鼠CD40L胞外段的生物学活性,为进一步研究奠定了基础。
- 徐英吴金明吴文治蓝松松吴乐灿
- HBV S-ecdCD40L治疗性疫苗对乙肝转基因小鼠肝脏中树突状细胞表型和功能的影响被引量：5
- 2014年
- 目的 :检测HBV S-ecdCD40L表达对乙肝转基因小鼠树突状细胞(DC)成熟分化和功能的影响及其可能机制。方法:乙肝转基因小鼠分别肌肉注射质粒pcDNA3.1-S-ecdCD40L、pcDNA3.1-S、pcDNA3.1或PBS,每只100μg/25 g,2、4周后各加强免疫一次。首次免疫6周后,取血,分离DC,检测细胞表型及功能,并用荧光定量PCR法检测血清HBV DNA含量。结果:注射pcDNA3.1-S-ecdCD40L小鼠DC中CD80、CD86、MHC Ⅱ及Toll样受体4(TLR4)的表达,白介素-12(IL-12)的分泌及刺激淋巴细胞的能力均高于其余组小鼠,而平均血清HBV DNA含量明显低于其余组小鼠。结论:pcDNA3.1-S-ecdCD40L重组表达载体介导的HBV S-ecdCD40L表达能有效地促进转基因小鼠的DC成熟分化和功能提高,激活DC中的TLR4可能是其机制之一。
- 吴文治徐英吴金明张欢
- 关键词：树突状细胞TOLL样受体小鼠
