国家自然科学基金(30760082) 作品数:11 被引量:62 H指数:4 相关作者: 刘志刚 王斌 吴捷 冉丕鑫 刘晓宇 更多>> 相关机构: 深圳大学 广州医学院第一附属医院 南昌大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 广东省粤港关键领域重点突破项目 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 理学 农业科学 更多>>
粉尘螨生殖系统形态学研究 被引量:4 2008年 粉尘螨Dermatophagoides farinae是一种重要的医学螨类。本文用光镜和扫描电镜研究了粉尘螨雌雄生殖系统的形态和结构。结果表明:雄性生殖系统由睾丸、输精管、附腺、射精管、阳茎及附属交配器官组成。睾丸位于血腔末端,不成对,精原细胞、精母细胞和精子依照精子发育的顺序有规则地分布在其内部。雌性生殖系统包括交配孔、囊导管、储精囊、囊导管、卵巢、输卵管、子宫、产卵管及产卵孔,其中卵巢由一个中央营养细胞和围绕其周围的卵母细胞组成。 吴桂华 刘志刚 孙新关键词:粉尘螨 生殖系统 形态学 扫描电镜 抗粉尘螨主要变应原Der f1单克隆抗体的制备与鉴定 被引量:1 2009年 目的制备和鉴定鼠抗粉尘螨主要变应原Der f1的单克隆抗体(monoclonal antibody,McAb)。方法利用重组Der f1蛋白为免疫原,免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤NS-1细胞融合。通过间接ELISA法筛选特异性分泌的杂交瘤细胞。用杂交瘤细胞株诱生小鼠腹水,应用蛋白A亲和层析法进行抗体纯化。采用Ig类与亚类鉴定试剂盒鉴定该单克隆抗体的Ig亚型;通过间接ELISA、Western Blotting鉴定该单克隆抗体的特性和交叉性。结果获得6株可稳定分泌鼠抗粉尘螨主要变应原Der f1的单克隆抗体,其Ig亚型均为IgG1,且6株单抗均具有良好的效价。ELISA和Western-blotting分析表明,该6株单抗均能识别重组Der f1蛋白和天然的粉尘螨提取物。其中,除了484不识别屋尘螨提取物,其他均能识别。结论成功制备了6株鼠抗粉尘螨主要变应原Der f1的单克隆抗体,为建立粉尘螨主要变应原Der f1检测及纯化方法奠定了基础。 顾耀亮 李佳娜 陈家杰 吉坤美 刘志刚关键词:F1 粉尘螨 主要变应原 单克隆抗体 屋尘螨重组变应原Der p 2的表达、纯化及免疫学活性鉴定 被引量:6 2009年 目的大量诱导表达含pET24a-Derp2质粒的BL21工程菌,表达产物以重组蛋白包涵体的形式存在,经包涵体洗涤与溶解后,使用结合6组氨酸的镍柱进行亲和层析纯化蛋白质,用梯度复性方法进行重组蛋白的复性,再用屋尘螨过敏性哮喘患者阳性血清经Western blot方法分析Derp2重组蛋白的免疫学特性。纯化后的融合蛋白Derp2具有较高的纯度及较强的免疫活性,可望作为有效的屋尘螨变应原诊断试剂和疫苗的候选分子。 刘晓宇 吉坤美 高波 刘志刚关键词:屋尘螨 蛋白表达 免疫印记 丁香花蕾油对粉尘螨杀灭活性的研究 被引量:4 2009年 用索氏提取法以石油醚为溶剂提取制备丁香花蕾中的挥发油组分,用直接接触法和熏蒸法分别测试不同剂量和不同作用时间丁香花蕾油对粉尘螨的杀灭活性,结果显示12.20μg/cm2丁香花蕾油直接接触粉尘螨后2.5h死亡率即达100.0%,相同剂量的丁香花蕾油在相对封闭的容器中熏蒸24h后,螨虫死亡率为100.0%,表明丁香花蕾油对室内粉尘螨具有较好的杀灭活性。 李静 吴海强 刘志刚关键词:粉尘螨 杀螨剂 纳米粒子-DNA疫苗治疗屋尘螨抗原过敏的研究进展 2010年 在屋尘螨多种变应原中,Derp1和Derp2是研制屋尘螨变应原疫苗主要的特异性抗原,而Derp2由于较Derp1更稳定和耐降解正逐渐取代后者。传统的过敏原特异性治疗的周期长、易产生不良反应、患者依从性差,口服DNA疫苗可以消除上述困难,但又难以克服消化道中的各种屏障,利用纳米粒子包被DNA疫苗可以有效保护DNA疫苗不被降解,因此得到了广泛认可。本文就纳米粒子-DNA疫苗治疗屋尘螨抗原过敏的研究进展作一综述。 崔运勇 杨慧关键词:屋尘螨 过敏 中国不同地理区域室内尘螨的调查研究 被引量:37 2010年 目的为了解我国不同地理区域内床尘螨的种类分布及物种丰富度。方法使用真空吸尘器分别对我国南部(广州和深圳,n=172)、中部(上海和南昌,n=126)和北部(北京和沈阳,n=112)地区的不同居室类型(家庭、宾馆和学生寝室)的床尘进行了采集、尘螨形态学鉴定和统计分析。结果灰尘样品尘螨阳性率59%(242/410),分离出螨8467只。分属于11科21属。麦食螨科的屋尘螨和粉尘螨为我国室内优势螨种,其中屋尘螨占总螨数的百分比为:南部:27.8%,中部:46.6%,北部:38,2%。粉尘螨为:32.3%、28.0%和23.1%。在非麦食螨科螨类中,热带无爪螨在我国南部的床尘中具有较高的数量(17.4%)。其它占有1%以上的螨有腐食酪螨(南部:1.0%,北部:1.2%)和纳氏皱皮螨(南部:5.8%),马六甲肉食螨(南部:3.7%,中部:1.2%,北部:1.2%),普通肉食螨(中部1.2%),阳单梳螨(南部2.2%),基氏蠊螨(中部1.2%)等,不论是螨的阳性率(χ2=29.6,P<0.001)还是螨的密度(χ2=41.8,P<0.001),我国南部和中部地区都要高于北部地区。环境因子和螨致敏危险性之间的相关性分析表明,南部地区和中部地区床尘螨的致敏危险性分别为北部地区的7.4倍和8.6倍(P<0.001)。家庭和学生寝室床尘中螨的致敏危险性要显著高于宾馆。随着楼层的增高,螨的致敏危险性则显著下降(P=0.009)。结论初步查明我国不同地理区域室内尘螨的种类和分布,为尘螨过敏性疾病的防治提供依据。 刘晓宇 吴捷 王斌 李盟 冉丕鑫 刘志刚粉尘螨变应原(Der f I)对DC2.4细胞的作用及其诱发哮喘机制的初步研究 2009年 分别通过对DC2.4细胞白介素-12(IL-12)和IL-10的ELISA检测,蛋白酶激活受体(PAR-2)的基因表达和丝裂原活化蛋白酶(MAPK)p44/42的磷酸化来观察Der f I对DC2.4细胞的作用及其诱发哮喘机制的初步研究。Der f I作用于DC2.4细胞的结果显示,Der f I可促进DC2.4细胞IL-10的分泌(P〈0.01),抑制IL-12的分泌(P〈0.05),但信号通路抑制剂U0126可以逆转细胞因子的分泌模式;促进磷酸化p44/42MAPK的表达(尤其是促进p42的磷酸化);抑制PAR.2受体的表达并呈时间依赖性。Th1/Th2失衡及Th2细胞功能亢进是过敏性哮喘的免疫基础,3312型免疫应答可能是哮喘发生的机制之一。本研究中由于Der f I作用于DC2.4细胞后抑制初始T细胞向Th1细胞分化而促使其向Th2细胞分化从而促使Th2型免疫应答,进而诱发过敏性哮喘,信号通路p44142MAPK的磷酸化加强和PAR-2受体表达的抑制也在诱发过敏性哮喘过程中起到促进作用。 沈小英 朱清仙 刘志刚 李湘辉关键词:粉尘螨 过敏性哮喘 MAPK PAR 椰子花粉过敏原profilin蛋白体外重折叠过程的光谱学研究 被引量:1 2010年 在基因工程技术中,采用原核表达系统获得的重组蛋白通常都是以包涵体的形式存在。利用圆二色性光谱、荧光光谱和同步荧光光谱对尿素诱导的重组椰子花粉泛过敏原profilin蛋白包涵体的复性过程进行了系统的光谱学研究,得到了profilin蛋白复性过程的光谱学特征;结合生物信息学方法,通过对profilin蛋白的二级结构和三级结构的预测,进一步分析了复性过程中profilin蛋白构象变化的特点,初步建立了一种新的检测重组变应原蛋白复性程度的光谱学实验方法,为重组蛋白包涵体复性机理的深入研究进行了有益的探索。 罗海梅 肖杰 邬玉兰 刘志刚 Jun Lu 徐宏关键词:变应原 PROFILIN 生物信息学 肉桂提取物对粉尘螨杀灭的实验研究 被引量:5 2009年 目的研究肉桂(Cinnamomum cassia Presl)不同溶剂提取组分对室内粉尘螨(Dermatophagoides farinae)的杀灭活性。方法肉桂粉碎后以石油醚、乙酸乙酯、甲醇为提取剂,分别用索氏提取法、浸渍法提取肉桂的不同有效组分;以作用浓度和作用时间为变量,分别用直接接触法测试肉桂石油醚、乙酸乙酯、甲醇提取组分对粉尘螨的杀灭活性,用熏蒸法测试肉桂石油醚、乙酸乙酯提取组份对粉尘螨的杀灭活性。结果直接接触法测试肉桂不同组分对粉尘螨杀灭活性的结果显示作用24h时肉桂石油醚提取组分和乙酸乙酯提取组分的LD50分别为4.64μg/cm2和1.44μg/cm2,甲醇提取组分对粉尘螨则不具有显著杀灭活性;从作用时间上看,石油醚组分作用时间最短,乙酸乙酯组分次之;熏蒸法测试结果显示肉桂石油醚、乙酸乙酯提取组分使用剂量为6.09μg/cm2和9.75μg/cm2时作用24h后对粉尘螨的致死率即达到100%。结论本文研究结果表明肉桂的石油醚和乙酸乙酯提取组分对粉尘螨具有良好的杀灭活性,呈剂量、时间依赖性,且与作用方式直接相关。 李静 吴海强 刘志刚 张彩芬 艾梅关键词:粉尘螨 杀螨 深圳某高校学生寝室床尘螨类调查及相关影响因子分析 被引量:10 2009年 为了解深圳某高校学生寝室床尘螨类的孳生情况及相关影响因子。共收集宿舍床尘308份,螨孳生率为88%(271/308)。共分离螨6163只,其中粉尘螨、屋尘螨和热带剥爪螨为优势螨类,分别占29.7%、21.7%和17.9%。性别(男/女)、床上覆盖物(竹席/床单)、空调安装与否和空调日使用时间(<2h、2~8h和>8h)对螨的阳性率无显著影响(P>0.05),但logistic模型分析显示男生寝室螨可能致敏危险性低于女生寝室(OR=0.55,P=0.038),使用床单的危险性高于竹席(OR=2.13,P=0.040)。随着楼层增高,螨的阳性率和致敏危险性显著递减。 王斌 吴捷 刘志刚 冉丕鑫 高俏 罗春慧 艾梅关键词:螨类 亚热带 高校寝室 环境因子