国家自然科学基金(30572029)
- 作品数：11 被引量：40H指数：5
- 相关作者：李晓明路秀英徐鸥屈永涛王茂鑫更多>>
- 相关机构：解放军白求恩国际和平医院中国人民解放军白求恩国际和平医院河北医科大学第二医院更多>>
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- 肿瘤乏氧检测方法研究进展被引量：1
- 2012年
- 自1955年Thomlinson和Gray对163例手术切除支气管癌的标本切片进行显微镜下观察，发现在正常增殖的细胞和坏死的细胞两者之间，有一层厚度为15～20μm的氧张力较低的乏氧细胞，从而证实恶性肿瘤内存在乏氧细胞以来，众多研究表明，乏氧细胞不仅能增加肿瘤对放化疗的抵抗作用，而且使得肿瘤具有更强的侵袭性，容易发生远处转移。如果能够准确地监测肿瘤的氧合状态，以指导治疗方案的制定和实施，将有助于提高肿瘤的治疗效果。
- 徐鸥李晓明
- 关键词：肿瘤乏氧氧分压
- 肿瘤微环境乏氧和相关基因研究进展被引量：1
- 2013年
- 微环境乏氧在肿瘤侵袭、转移和对放化疗抵抗方面发挥着重要作用.根据其形成机制不同,大体分为急性乏氧和慢性乏氧,二者对肿瘤细胞的影响具有很大的相似性,但又不完全相同.肿瘤微环境乏氧的存在使得肿瘤细胞一系列基因转录活性发生改变,其表达产物一方面对肿瘤细胞起到一定的保护作用,促其适应乏氧微环境;另一方面又对肿瘤生长、能量代谢、血管生成、转移和凋亡产生不良影响,造成肿瘤细胞侵袭力增强、凋亡下降、对放化疗抵抗.因此,针对肿瘤微环境乏氧和相关基因进行研究将会为肿瘤治疗带来新的曙光.
- 徐鸥李晓明
- 低氧对顺铂诱导的人喉鳞癌Hep2细胞凋亡及细胞周期分布的影响及其机制被引量：7
- 2006年
- 目的:建立体外低氧模型,探讨低氧对人喉鳞癌细胞Hep2细胞周期以及顺铂对其诱导的凋亡的影响。方法:将体外培养的人喉鳞癌细胞分为4组:A组(对照组)、B组(低氧培养组)、C组(常氧培养加顺铂组)、D组(低氧培养加顺铂组)。流式细胞仪检测HIF-1α蛋白表达、细胞凋亡及细胞周期变化;MTT法检测C、D两组在不同浓度顺铂作用24h后的细胞抑制率;RT-PCR检测各组细胞HIF-1αmRNA的表达水平。结果:低氧能明显增加Hep2细胞HIF-1α蛋白表达,而对HIF-1αmRNA的表达无明显影响。B、D组的Hep2细胞发生G0/G1期细胞周期阻滞,顺铂5"g/ml作用24h后C组细胞凋亡及抑制率(%)显著高于D组(P<0.05)。结论:低氧使Hep2细胞产生化疗抵抗,其中HIF-1α蛋白表达水平升高以及低氧造成的G0/G1期细胞周期阻滞可能在顺铂诱导的人喉鳞癌细胞凋亡中发挥重要的抗凋亡作用。
- 宋冬梅李晓明刘艳梅路秀英
- 关键词：低氧低氧诱导因子-1Α
- 纠正肿瘤微环境乏氧相关方法研究进展被引量：2
- 2012年
- 治疗头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)的手段尽管不断改善,患者生活质量水平有所提高,但患者术后5年生存率并没有得到明显提高。治疗抵抗和复发一直是头颈鳞癌治疗中的难题,但局部组织内缺氧造成的乏氧微环境与肿瘤治疗抵抗和复发的关系密不可分。如果能采取有效措施改善肿瘤微环境乏氧状况,就可能提高HNSCC的治疗效果。
- 徐鸥李晓明
- 关键词：肿瘤微环境乏氧
- 低氧对Hep-2细胞肿瘤干细胞特性和化疗抵抗的影响及其作用机制被引量：8
- 2012年
- 目的探讨低氧对Hep-2细胞肿瘤干细胞特性和化疗抵抗的影响，并分析其相关机制。方法构建针对低氧诱导因子-1α（hypoxia-inducible factor 1 apha，HIF-1d）的短发夹RNA重组质粒，转染Hep-2细胞，经筛选建立HIF-1仪基因敲除的Hep-2细胞并检测HIF-1α表达的变化；观察低氧条件培养的Hep-2细胞增殖、克隆形成、细胞周期、凋亡及CD133表型等细胞生理学特性变化；流式细胞仪分选CD133^＋细胞，观察CD133^＋细胞克隆形成及顺铂杀伤情况，并检测相关基因Oct-4、p53及survivin表达变化。用方差分析及两样本均数比较的#检验进行统计分析。结果成功建立HIF—lct基因敲除Hep一2细胞，HIF一1仪在mRNA和蛋白水平上的表达明显下调；低氧培养Hep-2细胞具有较高的增殖活性及克隆形成能力，凋亡率降低，细胞周期GO／G1期阻滞、CD133表达升高，而HIF-1α仪基因敲除后上述变化减弱；成功分选出Hep-2细胞中的CD133^＋细胞，CD133^＋细胞克隆形成能力高、顺铂杀伤抗性强，而HIF-1α基因敲除后上述能力降低，并出现Oct-4表达下调，p53表达上调，survivin表达下调。结论低氧能够诱导和强化Hep-2细胞的肿瘤干细胞特性，增强CD133^＋细胞的增殖分化和化疗抵抗能力，其作用机制可能与HIF-1α及其诱导的相关基因表达变化相关。
- 屈永涛李晓明徐鸥王茂鑫路秀英
- 关键词：低氧诱导因子1
- 缺氧诱导因子1α反义寡核苷酸对喉鳞状细胞癌的放疗增效作用被引量：2
- 2010年
- 目的探讨缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)反义寡核苷酸结合放射对人喉鳞状细胞癌(简称喉癌)裸鼠移植瘤生长抑制敏感性的影响。方法对25只裸鼠建立喉癌裸鼠模型,分为5组:A组(正义放疗)、B组(反义放疗)、C组(空脂质体放疗)、D组(放疗)和E组(空白对照),治疗期间每3 d测量1次鼠重、瘤体最大长径及最大垂直径,治疗21 d后将实验鼠脱颈处死,瘤体称重后应用流式细胞仪、免疫组化观察抑瘤、凋亡情况及相关蛋白表达。结果反义放疗组瘤重(1.037±0.106)g明显低于其余4组(P<0.05),抑瘤率(50.21±8.10)%和凋亡率(34.52±4.159)%明显高于其余4组(P<0.05)。免疫组化PV法染色显示:HIF-1α正义放疗组胞浆有大量棕色颗粒沉积着色,而反义放疗组表达较少;正义放疗组p53表达于胞核呈棕色颗粒浓染,而反义放疗组表达较少;VEGF正义对照组胞浆有大量棕色颗粒沉积着色,而反义放疗组表达较少。流式细胞仪检测结果显示:反义放疗组的HIF-1α、p53、VEGF蛋白表达的荧光指数(fluorescen-ceindex,FI)分别为0.98±0.28、2.13±0.03、1.09±0.36明显低于其余4组(P<0.05)。结论 HIF-1α反义寡核苷酸结合放疗可以抑制喉癌异体移植瘤的生长,增加肿瘤细胞凋亡率,其机制之一可能是HIF-1α的下调降低了喉癌组织中p53、VEGF的蛋白表达,因此HIF-1α反义寡核苷酸增加喉癌对放疗的敏感性。
- 李震屈永涛李晓明路秀英张佳宁
- 关键词：缺氧诱导因子1荷瘤裸鼠
- 组织缺氧诱导因子-1α及相关靶基因在喉鳞状细胞癌组织中的表达被引量：5
- 2012年
- 目的检测喉鳞状细胞癌（简称鳞癌）组织缺氧诱导因子-1α（hypoxia inducible factor 1 alpha，HIF-1α）、葡萄糖转运蛋白-1（glucose transporter protein-1，GLUT-1）、血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）的蛋白表达情况，并通过体外实验进一步验证低氧对喉鳞癌细胞HIF—1α及其下游靶基因GLUT-1、VEGF的表达上调方面的重要促进作用。方法采用SP免疫组织化学和免疫细胞化学方法检测喉鳞癌组织和Hep-2细胞中HIF-1α、GLUT-1、VEGF蛋白的表达，分析HIF-1α与GLUT—1、VEGF表达的相关性。结果35例喉癌患者组织切片中16例HIF-1α表达阳性（45．7％），16例GLUT-1表达阳性（阳性率45．7％），19例VEGF表达阳性（阳性率54．3％）。HIF-1α和VEGF的表达水平与喉癌病理分级和淋巴转移有关（P值均〈0．05）；GLUT-1表达水平与淋巴转移有关（P〈0．05）。体外实验结果显示，Hep-2细胞在低氧条件下HIF-1α、GLUT-1、VEGF的蛋白表达明显增加（P值均〈0．05）。结论HIF-1α可作为转录调控因子参与调控GLUT-1、VEGF的表达，进而在喉癌的发生、侵袭、转移过程中发挥重要作用。
- 徐鸥李晓明王茂鑫屈永涛路秀英单春光孙庆佳
- 关键词：喉肿瘤缺氧诱导因子1,Α亚基
- 低氧诱导因子-1α在声门上型喉癌中的表达及其对颈淋巴结转移的影响被引量：7
- 2015年
- 目的探讨低氧诱导因子-1α(HIF-1α)在声门上型喉癌中的表达及其在颈淋巴结转移中的作用。方法采用流式细胞术对63例声门上型喉癌手术标本中HIF-1α、血管内皮生长因子(VEGF)和VEGF-C蛋白表达进行测定;采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法观察肿瘤组织和20例癌旁正常组织标本中HIF-1αmRNA的表达;以CD34和LYVE-1表达观察肿瘤微血管和微淋巴管生成情况。结果 HIF-1ɑ、VEGF、VEGF-C在喉癌细胞中均有不同程度的表达。肿瘤组织和癌旁正常喉黏膜组织内HIF-1αmRNA表达无明显差异。HIF-1α、VEGF和VEGF-C在颈淋巴结转移灶中的表达量高于原发灶,有颈淋巴结转移者中的表达量高于无淋巴结转移者(P<0.05,P<0.01)。HIF-1α与VEGF、VEGF-C在肿瘤组织和转移灶中的表达均呈正相关(r=0.799,r=0.789,P<0.05;r=0.686,r=0.823,P<0.05)。CD34蛋白主要表达于肿瘤间质的微血管内皮细胞,LYVE-1主要表达于肿瘤实质和间质内的微淋巴管内皮细胞。颈淋巴结转移者微血管密度(MVD)和淋巴管密度(LVD)计数均高于无颈淋巴结转移者(P<0.05)。结论HIF-1α可能通过调节VEGF和VEGF-C表达影响肿瘤内MVD和LVD生成,进而对声门上型喉癌颈淋巴结转移产生影响。
- 李晓明宋琦路秀英邸斌
- 关键词：低氧诱导因子-1Α喉肿瘤淋巴转移
- HIF-1α反义寡核苷酸对喉鳞状细胞癌hep-2细胞放疗的增效作用被引量：12
- 2007年
- 目的:通过HIF-1α反义寡核苷酸转染hep-2细胞株,观察细胞凋亡及对放疗的反应情况。方法:体外培养人喉鳞状细胞癌hep-2细胞株,脂质体介导反义寡核苷酸转染,6 h后4 Gyγ射线照射。低氧培养24 h后RT-PCR检测HIF-1α mRNA表达,流式细胞仪检测HIF-1α蛋白水平及细胞凋亡率,MTT检测细胞存活情况。结果:低氧使人喉鳞状细胞癌hep-2细胞株对放射的敏感性下降;低氧并未影响HIF-1α mRNA的表达,HIF-1α蛋白在低氧6 h时表达已开始升高,低氧36 h时达高峰,之后表达逐渐下降;放射刺激对HIF-1α蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05);各浓度的反义寡核苷酸转染组降低HIF-1α的转录及蛋白水平;MTT结果显示随反义核苷酸浓度增高,其增殖抑制效应越强(P<0.05),正义对照核苷酸及脂质体对照没有显著的抑制效应(P>0.05),但转染浓度在400 nmol/L以上时,正义对照也表现出一定的增殖抑制作用(P<0.05);放疗后反义寡核苷酸转染组蛋白表达下降明显,较对照组及单纯放射组细胞凋亡率增加(P<0.01)。结论:低氧环境下人喉鳞状细胞癌hep-2细胞株对放射有抵抗作用,这种抵抗作用与低氧时HIF-1α蛋白表达上调有关,而放射本身并未上调HIF-1α蛋白的表达;HIF-1α反义寡核苷酸转染hep-2细胞株能够降低HIF-1α蛋白表达,提高低氧环境下人喉鳞状细胞癌hep-2细胞株对放疗的敏感性。
- 刘春玲李晓明路秀英张立坤
- 关键词：HIF-1Α喉肿瘤反义寡核苷酸放射疗法
- 肿瘤干细胞在低氧介导的喉癌放疗抵抗中的作用的初步观察
- 2011年
- 目的:观察体外低氧和常氧培养条件下喉癌Hep-2细胞系在放疗前后CD133+细胞比例及生长抑制率的变化,探讨肿瘤干细胞在低氧介导的喉癌放疗抵抗中的作用。方法:体外常氧和低氧环境下培养人喉癌Hep-2细胞,用western blot检测HIF-1α的表达。细胞汇合约80%左右时后分别给予0、5、10、15、20Gy的60 Co照射,检测各组细胞放疗后不同时间细胞生长抑制率和CD133+细胞比例的变化。结果:低氧和常氧条件下,Hep-2细胞放疗后24h细胞增殖抑制率达到高峰,并随放疗剂量的增加而增加。常氧组各个剂量和时间点的生长抑制率均高于低氧组,24h、10Gy时差异最大,有统计学意义(P<0.05)。放疗后CD133+细胞低氧和常氧组均有不同程度的富集,低氧组在各个剂量和时间点的CD133+细胞比例均高于常氧组,24h、10Gy时差异最大,有统计学意义(P<0.05)。结论:喉癌干细胞在低氧介导的喉癌放疗抵抗中有重要作用,并提示阻断低氧因素可能会增强喉癌的放疗敏感性。
- 王茂鑫李晓明路秀英屈永涛徐鸥孙庆佳
- 关键词：低氧诱导因子CD133肿瘤干细胞
