国家自然科学基金(30572026)
- 作品数：12 被引量：72H指数：6
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- 相关机构：首都医科大学北京市耳鼻咽喉科研究所更多>>
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- 嗅觉受体神经元体外培养
- 2008年
- 嗅觉受体神经元是嗅觉的外周感受器，可以将成千上万种化学信号转化为电信号，并且具有独特的可持续再生能力。嗅觉受体神经元功能缺陷或数量减少均可造成嗅觉障碍。由于在体内很难完成相关研究，体外培养嗅觉受体神经元成为重要的研究手段。本文将对嗅觉受体神经元的取材、支持物、培养方式、培养基及细胞鉴定方法等方面进行综述。
- 羡慕张罗韩德民
- 关键词：RECEPTOR
- 麻黄素对体外培养的人鼻腔纤毛运动的影响被引量：8
- 2006年
- 目的观察不同浓度麻黄素对体外培养的人鼻腔纤毛运动的影响。方法采用组织块培养法,观察在加有羟乙基哌嗪乙磺酸[4-(2-hydroxyethyl)-1-piperazineethanesulfonic acid,HEPES]的Hank平衡盐溶液(Hank balanced salt solution,HBSS)、2．5 g／L、5g/L、10g/L和20g/L的麻黄素作用下体外培养人鼻腔纤毛摆动频率(ciliary beat frequency CBF),并进行配对分析。结果①CBF在HBSS中10 min内无显著性变化;②在加入2．5 g／L、5 g／L、10 g／L和20 g／L的麻黄素后,1～2 min内CBF明显升高并达高峰,与加药前相比差异有统计学意义(P值均<0．05),后渐呈下降趋势,在10 min时2．5g/L和5g/L的麻黄素中CBF与加药前相比虽略低,但差异无统计学意义(P值均>0．05),而10 g／L和20 g／／L麻黄素中CBF与加药前相比明显降低,且差异有统计学意义(P值均<0．05);③2．5 g／L～20 g／／L的麻黄素作用1 min后CBF的增加量差异无统计学意义(F=0．697, P>0．05),10 min后随着浓度的增加而下降,10 g／L～20 g／L麻黄素CBF的下降值较2．5 g／L～5g/L的下降值差异有统计学意义(P<0．05)。结论麻黄素作为肾上腺素受体激动药物,2．5 g／L～20 g／L的麻黄素对体外培养的人鼻腔纤毛运动早期有一定的刺激作用,后期则表现为抑制作用,且随着药物浓度的增加,刺激作用逐渐缩短,抑制作用逐渐延长。5g/L麻黄素作用于鼻腔纤毛细胞刺激作用最大,而抑制作用较弱。
- 宋晓红张罗韩德民王鸿王奎吉
- 关键词：麻黄碱鼻黏膜上皮细胞纤毛
- 鼠尾胶原为底物的人鼻腔纤毛上皮细胞培养模式的建立被引量：11
- 2007年
- 目的建立以鼠尾胶原为贴附底物的人鼻腔纤毛上皮细胞的体外培养模式,为人鼻腔黏液纤毛运输系统的研究提供科学有效的方法。方法制备鼠尾胶原并铺片,以鼠尾胶原为贴附底物组织块培养法培养人鼻腔纤毛上皮细胞,培养7天时进行HE染色及扫描电镜和透射电镜观察细胞形态和结构,应用高速摄像技术测量纤毛摆动频率。结果鼠尾胶原要平坦均匀,平均厚度约为1mm;HE染色可见上皮细胞呈单层向周围爬开;扫描电镜下见纤毛上皮细胞呈不规则多角形,纤毛周围可见微绒毛;透射电镜下可见纤毛上皮细胞间为紧密连接;同一细胞任意两点纤毛摆动频率是相同的;同一来源体外培养的钩突和下鼻甲的纤毛摆动频率是相同的。结论以鼠尾胶原为贴附底物人鼻腔纤毛上皮细胞的体外培养模式的成功建立,为今后研究鼻内用药对纤毛清除功能的影响提供了良好的方法和途径。
- 宋晓红张罗韩德民范尔钟王鸿王奎吉李颖
- 关键词：鼻腔上皮细胞细胞培养技术鼠尾胶原
- 钙离子在呼吸道纤毛运动调控机制中的作用被引量：1
- 2009年
- 钙离子是细胞内普遍存在的第二信使，目前研究钙离子对纤毛摆动频率的调节机制已成为热点。近年来，随着高速数字化显微成像技术及显微荧光技术的联合应用，细胞内钙离子浓度和纤毛摆动频率得以同步测量，有助于进一步研究钙离子对纤毛运动的调控作用。
- 史凌改张罗
- 呼吸道纤毛上皮细胞的组织块法培养被引量：9
- 2006年
- 目的建立组织块法呼吸道纤毛上皮细胞原代培养模型,观察细胞生长分化情况,为深入研究黏液纤毛传输系统提供方法学基础。方法应用组织块法在鼠尾胶原上培养兔气管纤毛上皮细胞,对培养7天的标本行苏木素-伊红染色、黏蛋白5AC(mucin-5AC,MUC5AC)单克隆抗体免疫组织化学染色、扫描电镜及透射电镜观察、纤毛摆动频率测量。结果①细胞培养7天后可以见到大量的纤毛细胞和杯状细胞,纤毛形态正常,摆动活跃;②苏木素-伊红染色和黏蛋白MUC5AC单克隆抗体免疫组织化学染色可见分化良好的纤毛细胞和杯状细胞;③扫描电镜及透射电镜观察见纤毛细胞分化良好,纤毛形态正常;④(30±1)℃下测得纤毛摆动频率为(13.2±0.9)次/s。结论应用组织块法进行兔气管纤毛上皮细胞培养,可以得到分化良好的纤毛细胞和杯状细胞,纤毛摆动活跃,可应用此模型对黏液纤毛传输系统进行深入研究。
- 王奎吉张罗韩德民王鸿范尔钟宋晓红刘仲燕
- 关键词：纤毛上皮细胞细胞培养粘蛋白类
- 聚焦超声扫描对兔气管黏膜的影响被引量：2
- 2009年
- 目的观察聚焦超声扫描对兔气管黏膜的影响。方法对离体兔气管进行聚焦超声扫描,即刻行组织病理学观察黏膜形态学改变,同时另部分兔气管行组织块法,采用高速数字化视频成像技术,测量纤毛摆动频率,比较使用聚焦超声扫描后的兔气管上皮纤毛摆动频率与正常兔气管纤毛摆动频率是否有差异。结果聚焦超声扫描后的兔气管黏膜纤毛柱状上皮结构正常,黏膜下层出现水肿,散在凝固坏死,血管内皮细胞变性,腺体细胞部分坏死。聚焦超声扫描后的兔气管上皮纤毛摆动频率与正常兔气管纤毛摆动频率无显著性差异。结论聚焦超声扫描对黏膜表层功能有维护作用,而对黏膜下层组织有破坏作用。
- 张陛丞韩德民王琪张罗
- 关键词：超声疗法呼吸道黏膜高强聚焦
- 鼻生理功能及其临床评估被引量：19
- 2009年
- 中国的鼻科学在过去15年间有了长足发展,鼻内镜微创外科技术有了显著提高,相对而言鼻科学基础研究水平较薄弱,然其鼻生理学和病理生理学研究前景广阔,与临床工作有较多结合点。人类鼻腔的生理功能主要包括:呼吸功能、鼻阻力、嗅觉功能、黏液纤毛清除功能、过滤功能、空气调节功能、免疫功能、感知功能和嗓音共鸣功能等,多数功能具备相应的临床评估手段。
- 韩德民张罗
- 关键词：鼻窦生理学
- 兔气管纤毛蛋白磷酸化的初步研究
- 2009年
- 目的建立分离提取呼吸道纤毛的方法,为进一步研究纤毛蛋白磷酸化在纤毛运动调控机制中的作用提供方法学基础。方法用Triton X-100分离缓冲液孵育兔气管黏膜上皮,使纤毛上皮细胞的纤毛与细胞体分离,通过离心提取分离的纤毛,将提取的标本行透射电镜观察、Western blotting小鼠检测β微管蛋白(β-tubulin)和纤毛蛋白磷酸化情况。结果透射电镜观察可见提取的标本为浓集的纤毛,纤毛的横断面可见典型的"9+2"结构;②Western blotting检测可见高信号强度的β-tubulin条带;③Western blotting检测可见5条酪氨酸磷酸化的蛋白条带。结论经含有Triton X-100的缓冲液孵育的兔气管黏膜上皮离心后可提取到分离的纤毛标本,适于进行进一步的纤毛蛋白磷酸化研究。
- 刘晨韩德民张罗
- 关键词：纤毛磷酸化
- ATP对人鼻腔纤毛摆动频率的影响被引量：1
- 2009年
- 目的观察不同浓度三磷酸腺苷（adenosine triphosphate，ATP）对体外培养人鼻腔纤毛运动的影响。方法采用组织块培养法，应用高速数字化显微成像系统观察1umol／L、10umol／L和100umol／LATP对人鼻腔纤毛摆动频率（ciliary beat frequency，CBF）的影响。结果①Hanks平衡盐溶液（Hanks balanced salts solution，HBSS）对CBF无明显影响。②1umol／LATP使CBF由（9．2±1．8）Hz升至（10．3±2．0）Hz（n=10）（P〈0．05）。10umol／LATP使CBF由（9．5±1．7）Hz升至（11．5±2．0）Hz（n=10）（P〈0．05）。③100umol／LATP使CBF由（8．7±1．1）Hz升至（11．5±1．4）Hz（n=10）（P〈0．05）。结论ATP可刺激体外培养人鼻腔纤毛摆动频率升高，在1～100umol／L范围内，ATP对CBF的刺激呈浓度依赖性。
- 史凌改韩德民张罗
- 关键词：纤毛摆动频率三磷酸腺苷
- 桃金娘油对人鼻腔黏液纤毛传输系统的影响被引量：18
- 2009年
- 目的通过观察不同浓度桃金娘油对体外培养人鼻腔纤毛运动的作用,以及慢性单纯性鼻炎患者口服标准桃金娘油前后黏液纤毛传输时间的变化,探讨桃金娘油对人鼻腔黏液纤毛传输系统的影响。方法采用组织块法体外培养人鼻腔纤毛细胞,使用高速数字化显微成像技术,观察75μg/L、150μg/L和300μg/L的桃金娘油对纤毛摆动频率的影响。12名慢性鼻炎患者口服标准桃金娘油10d(300mg/次,3次/d),用药前后分别测定糖精清除时间,并对其中9名受试者用药前后分别进行相关鼻功能检查。结果①75μg/L、150μg/L和300μg/L的桃金娘油对体外培养的人鼻腔纤毛摆动频率未见显著影响。②12名慢性单纯性鼻炎患者口服药物后,糖精清除时间从用药前的(12.8±4.5)min缩短为(9.3±3.8)min(P<0.05)。③9名慢性鼻炎患者用药前后鼻阻力和鼻声反射结果差异均有统计学意义(P<0.05)。结论口服标准桃金娘油可改善鼻腔黏液纤毛传输系统功能和鼻腔通气功能,在体外未见75～300μg/L的桃金娘油对人鼻腔纤毛运动产生明显影响。
- 王楠韩德民宋晓红张伟张罗
- 关键词：鼻黏膜纤毛
