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湖北省自然科学基金(2011CDC059)
作品数:
1
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相关作者:
董红霞
黄新芳
王芸
刘玉平
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相关机构:
武汉市蔬菜科学研究所
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发文基金:
湖北省自然科学基金
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1篇
2012
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芋ISSR-PCR扩增反应体系的建立
2012年
目的:获得清晰可靠、重复性较好的ISSR-PCR扩增反应体系,应用于芋种质资源进行遗传多样性的研究中。方法:以芋的幼叶提取基因组DNA为材料,采用正交试验设计L16(45),从模板DNA浓度、引物浓度、Mg2+浓度、dNTPs浓度及TaqDNA聚合酶的用量5因素4水平出发,构建芋最佳反应体系。结果:芋ISSR-PCR的最佳反应体系为:在25μl的反应体系中,40ng DNA模板、0.4μmol/L引物浓度、2.5 mmol/L Mg2+、0.2 mmol/L dNTPs、1 U Taq DNA聚合酶。结论:利用芋种质资源对最佳反应体系的验证,结果显示该反应体系具有扩增稳定性。
董红霞
钟兰
王芸
黄新芳
孙亚林
刘玉平
刘义满
柯卫东
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ISSR
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