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教育部重点实验室开放基金(KLIB-KF-200507)
作品数:
1
被引量:7
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方慧英
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2007
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gsh 1基因的克隆及其在巴斯德毕赤氏酵母中的表达
被引量:7
2007年
利用PCR技术克隆了来源于Saccharomyces cerevisiae ALJ036的γ-L-谷氨酰-L-半胱氨酸合成酶(γ-glutamyl-cysteine synthetase)编码基因gsh1,连接多拷贝表达载体pGAPZA,转化Pichia pastorisx-33,构建了重组菌P.pastorisx-33(pGAPZA-gsh1);在高浓度Zeocin平板上筛选多拷贝阳性转化子,并通过PCR进行了验证.对阳性转化子的γ-L-谷氨酰-L-半胱氨酸合成酶酶活力进行了测定,结果显示,重组酵母的γ-L-谷氨酰-L-半胱氨酸合成酶的酶活是宿主菌的3.0倍,在液体YEPD中重组菌GSH的产量为42.2mg/L,是宿主菌的1.6倍.
饶志明
艾丽静
沈微
方慧英
诸葛健
关键词:
GSH
克隆
谷胱甘肽
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