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广东省医学科学技术研究基金(20040544)
作品数:
1
被引量:1
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相关作者:
王沂峰
彭文明
梁晓萍
周峰
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刘风华
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2007
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小鼠阴道黏膜干细胞的分离、富集和鉴定
被引量:1
2007年
目的研究小鼠阴道黏膜干细胞的分离、富集和鉴定方法,为干细胞替代疗法或构建人工阴道黏膜治疗先天性无阴道提供依据。方法取7~8周龄小鼠的阴道黏膜上皮,用酶消化培养法原代培养阴道黏膜干细胞(VMSC)。用Ⅳ型胶原黏附法并连续传代分离和富集VMSC。显微镜下动态观察细胞生长特性;苏木精-伊红(HE)染色;透射电镜观察细胞超微结构;荧光显微镜下观察标记滞留细胞(LRC)。免疫组化sP法检测细胞表面标记物(β1整合素、细胞角蛋白19)进行鉴定。结果用酶消化培养法得到原代VMSC,用Ⅳ型胶原黏附法分离到较纯的VMSC,经连续传代,富集到大量VMSC。动态观察发现细胞呈克隆性生长的干细胞特性。HE染色细胞呈椭圆形或梭形、核质比例大等幼稚细胞特征。透射电镜发现细胞呈未成熟细胞特征。荧光显微镜下LRC的核呈亮黄色,标记滞留时间长。免疫组化SP法检测β1整合素和细胞角蛋白19呈阳性表达。结论用酶消化培养法可原代培养VMSC。用Ⅳ型胶原黏附法并连续传代可分离、富集VMSC。免疫组化SP法检测细胞表面标记物可鉴定VMSC。
刘风华
王沂峰
梁晓萍
彭文明
曹长安
周峰
关键词:
阴道黏膜
干细胞
细胞培养
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