河南省科技攻关计划(072102140004)
- 作品数:13 被引量:90H指数:6
- 相关作者:徐引弟朱文豪郭成留王治方梁跃更多>>
- 相关机构:河南省农业科学院华中农业大学更多>>
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- PRRSV变异株与普通株二重RT-PCR鉴别方法的建立与应用被引量:6
- 2009年
- 参考GenBank发表的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的nsp2基因序列,在nsp2大缺失区下游的保守区设计了1条下游引物,在小缺失区设计1条上游引物,用于变异株的扩增。在大缺失区内部设计1条上游引物,与变异株共用下游引物,用于普通株的扩增,建立了PRRSV变异株与普通株二重RT-PCR鉴别方法。建立的RT-PCR方法用于临床病料的检测,部分阳性结果测序,变异株序列与报道的序列同源性在97%以上。结果表明,该方法特异、快速、简便,可以用于PRRSV变异株和普通株的鉴别。
- 徐引弟王治方朱文豪张青娴焦海燕郭成留
- 关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒
- 关节炎患猪中猪丹毒丝菌的分离与鉴定被引量:8
- 2012年
- 为给猪丹毒的防制提供依据,分离并鉴定了猪丹毒丝菌。将发生关节炎的猪关节液接种TSA培养基,挑取透明小菌落,染色,对G+小长丝杆菌进一步用猪丹毒丝菌16SrRNA基因的引物进行PCR鉴定。对鉴定为阳性的菌株进行药敏试验,结果显示,分离菌株对青霉素、头孢噻肟、头孢他啶、头孢曲松、头孢哌酮、头孢唑啉、氨苄西林、阿莫西林、克林霉素、四环素、强力霉素、环丙沙星等敏感,对新霉素、复方新诺明、庆大霉素、阿米卡星、万古霉素、痢特灵等完全耐药,临床上应根据上述结果指导用药。
- 梁跃徐引弟杨志昆朱文豪郭成留
- 关键词:关节炎药敏试验
- 副猪嗜血杆菌高免血清的制备与应用被引量:12
- 2010年
- 利用华中农业大学蔡旭旺博士分离鉴定的副猪嗜血杆菌作为标准菌株培养灭活后,2次免疫家兔后,耳静脉攻毒,心脏采血,琼扩试验检测抗体效价,抗体在1:8以上颈静脉放血,分离血清,用于琼扩试验检测河南省农科院畜牧兽医研究所传染病研究室从河南省发病猪场分离鉴定的副猪嗜血杆菌的血清型,所分离的33株菌中有12株4型,9株5型,6株13型,3株14型,2株12型,1株2型,未分出其他血清型。结果表明,河南省副猪嗜血杆菌主要以4型、5型和13型为主要流行的血清型。
- 徐引弟王治方朱文豪焦海燕梁跃郭成留
- 关键词:副猪嗜血杆菌高免血清琼扩试验血清分型
- 猪多杀性巴氏杆菌的分离鉴定和药敏试验被引量:17
- 2011年
- 为了对河南省猪高热综合征发生期间多杀性巴氏杆菌引起的感染有全面了解,从2006-2010年河南省发生猪高热综合征的245家规模化猪场568份病料中分离革兰氏阴性小球杆菌,通过培养特性试验、生化试验和PCR试验分离鉴定到35株。对分离菌进行毒力和药敏试验,结果显示所分离的猪多杀性巴氏杆菌对小鼠均有毒力,对头孢噻呋、头孢噻肟、环丙沙星、氟苯尼考敏感。
- 徐引弟王治方朱文豪梁跃许保疆郭成留
- 关键词:猪多杀性巴氏杆菌药敏试验
- 伪狂犬病病毒Ea株ORF-1基因在BHK-21细胞上的表达被引量:2
- 2009年
- 以伪狂犬病毒Ea株BamHⅠ5′片段为模板,PCR扩增出约0.6kbORF-1基因完整编码区序列,将该基因克隆到pBluescriptⅡSK+中,构建重组载体pSKORF1。进一步将该片段插入真核表达载体pEGFP-C1的增强型绿荧光蛋白EGFP下游,构建真核表达载体pEGFPORF1,脂质体法转染BHK-21细胞,G418加压筛选至正常细胞完全死亡。在倒置荧光显微镜下观察,可见pEGFPORF1转染的细胞在细胞膜和细胞浆中发出较强的荧光,证明ORF-1基因在BHK-21细胞中获得了表达。
- 徐引弟陈焕春肖少波
- 关键词:伪狂犬病病毒克隆
- crp缺失对猪霍乱沙门氏菌强弱毒株毒力的影响
- 2012年
- 猪霍乱沙门氏菌C500株是用化学方法将强毒株C78-1致弱,用于预防仔猪副伤寒的弱毒疫苗株,虽具有较好的免疫原性,但仍有一定的残余毒力。SC-1是临床分离的猪霍乱沙门氏菌强毒株。为了研制更加安全的弱毒株,利用重组自杀性质粒通过接合转移的方法构建了猪霍乱沙门氏菌C500株、C78-1及SC-1的crp缺失株。C78-1、crp-C78-1、SC-1、crp-SC-1、C500、crp-C500 6个毒株经小鼠毒力试验检测。LD50结果显示,crp缺失对猪霍乱沙门氏菌的毒力影响不大,毒力只是略为降低,其中以crp-C500株毒力最弱。综上所述,可以选用crp-C500株毒株作为猪霍乱沙门氏菌弱毒疫苗株的选择。
- 徐引弟梁跃王治方朱文豪郭成留
- 关键词:猪霍乱沙门氏菌LD50毒力
- 猪肠外致病性大肠杆菌的分离鉴定和药敏试验被引量:12
- 2011年
- 从2006-2009年河南省发生猪高热综合征的168家规模化猪场456份病料中,分离出粗大的革兰氏阴性杆菌,通过培养特性试验、生化试验和PCR试验,鉴定出了149株猪肠外致病性大肠杆菌。对分离菌进行小鼠毒力试验、血清分型及药敏试验,结果显示,所分离肠外致病性大肠杆菌对小鼠均有毒力,以O11、O161、O8、O138、O9、O101及O26最为流行,对头孢噻肟、头孢他啶、头孢哌酮、阿米卡星、头孢唑啉敏感。
- 徐引弟王治方朱文豪梁跃郭成留
- 关键词:药敏试验
- 规模化猪场传染性胸膜肺炎放线杆菌的分离鉴定被引量:5
- 2010年
- 徐引弟王治方朱文豪梁跃郭成留
- 关键词:传染性胸膜肺炎放线杆菌规模化猪场猪传染性胸膜肺炎传染性呼吸道疾病呼吸道症状继发感染
- 河南省规模化猪场猪高热综合征细菌性病原的分离鉴定
- 从2006年9月-2008年5月河南省发生猪高热综合征的113家规模化猪场222头病死猪的153份肺、54份关节液、66份心血、5份脑,8份脾脏.4份淋巴结和1份脓汁共291份病料中分离致病性细菌。通过培养特性试验、生化...
- 徐引弟王治方蔡旭旺焦海燕郭成留
- 关键词:猪高热综合征细菌性病原
- 文献传递
- 河南省规模化猪场高热综合征细菌性病原的分离鉴定被引量:8
- 2010年
- 为了对河南省规模化猪场高热综合征细菌性病原感染的防控提供依据,于2006年9月-2008年5月从河南省发生高热综合征的113家规模化猪场的291份病料中分离致病性细菌,通过培养特性试验、生化试验、PCR鉴定、毒力试验、血清学试验,鉴定了246株主要的致病细菌。其中,大肠杆菌和链球菌是主要致病菌;大部分病原菌对头孢类、氟苯尼考、阿齐霉素、阿米考星、氟喹诺酮类新药或临床应用较少的药物较为敏感。
- 徐引弟王治方朱文豪焦海燕郭成留
- 关键词:规模化猪场高热综合征细菌性病原