山东出入境检验检疫局科研项目(SK200686)
- 作品数：1 被引量：4H指数：1
- 相关作者：孙颖杰陈晓周优王哲梁成珠更多>>
- 相关机构：山东出入境检验检疫局辽宁出入境检验检疫局中国海洋大学更多>>
- 发文基金：山东出入境检验检疫局科研项目国家质检总局科技计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 淋巴囊肿病毒实时定量PCR检测方法的建立和应用被引量：4
- 2009年
- 选取淋巴囊肿病毒(Lymphocystis disease virus,LCDV)主衣壳蛋白(MCP)基因保守序列,利用Primer Express2.0软件设计引物,通过优化反应条件,建立了SYBR GreenⅠ实时定量PCR的检测方法,并进行了敏感性、特异性分析。SYBR GreenⅠ实时定量PCR反应体系的最佳引物浓度为0.5μmol/L,方法的检测限为30个病毒拷贝,扩增产物的Tm值为74.5℃。该方法对淋巴囊肿病毒有特异性,不能扩增流行性造血器官坏死病毒(EHNV)、虎纹蛙病毒(TFV)、蛙虹彩病毒(BIV)、新加坡石斑虹彩病毒(SGIV)、鳜鱼传染性脾肾坏死病毒(ISKNV)及真鲷虹彩病毒(RSIV)。对12份发病牙鲆鱼样品进行检测,均感染淋巴囊肿病毒;20份无临床症状的牙鲆经检测不含淋巴囊肿病毒。建立的LCDV的SYBR GreenⅠ实时定量PCR方法,具有成本低、特异、灵敏、快速等优点,可用于淋巴囊肿病毒的早期诊断。
- 孙颖杰周优岳志芹陈晓梁成珠应骏王哲汪东风
- 关键词：淋巴囊肿病毒实时定量PCRSYBR
