博士科研启动基金(201010)
- 作品数：1 被引量：3H指数：1
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- Coprinopsis cinerea漆酶基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达被引量：3
- 2012年
- 通过反转录反应从Coprinopsis cinerea okayama 7#130中克隆得到laccase 1,应用SignalP 3.0 Server软件分析其氨基酸序列后,设计不含信号肽序列的新引物扩增得到漆酶基因,构建重组酵母表达载体pPIC9K-lac1,电击转化毕赤酵母GS1115,并用甲醇诱导表达,之后研究重组酶的酶学性质。克隆得到的laccase 1碱基数为1 593 bp,编码530个氨基酸,其中信号肽包含18个氨基酸。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)显示重组蛋白大小约为65 kDa。酶学性质研究表明,该酶最适反应温度为45℃,最适pH值为4.3。成功分泌表达的漆酶活力达到1.108 U/mL。
- 华欣春陈丽丽毕云枫沈明浩
- 关键词：漆酶基因毕赤酵母分泌表达
