国家自然科学基金(81371067) 作品数:9 被引量:39 H指数:4 相关作者: 陆晓和 吴伟 彭玲 符敏 钟彦彦 更多>> 相关机构: 南方医科大学 中山大学 中南大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 广东省自然科学基金 广东省科技计划工业攻关项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
高糖抑制角膜缘干细胞间质性及其迁移能力的研究 被引量:1 2018年 目的探讨高糖环境对角膜缘干细胞增殖、迁移能力及表面分子标志的影响。方法通过细胞免疫荧光、细胞增殖检测(CCK-8)、划痕和Transwell实验观察角膜缘干细胞在高糖环境下的迁移及增殖能力的改变。选取16只SPF级大鼠用链脲霉素进行糖尿病造模,14只正常SPF级大鼠作为对照组,刮除两组大鼠角膜上皮观察上皮创伤愈合情况,采用HE染色和免疫组织化学染色探讨糖尿病对角膜缘干细胞表面分子标志及细胞状氉态的影响。结果高糖可导致体外培养的角膜缘干细胞增殖减慢,24 h、48 h及72 h增殖率为0.728、0.345及0.395,较对照组明显降低(P<0.05),迁移功能障碍(48 h时正常对照组迁移率为100%,高糖组为17.6%);高糖组细胞表面分子β-catenin和vimentin的mRNA和蛋白表达水平降低、细胞内定位异常。糖尿病大鼠角膜上皮创伤后愈合延迟,角膜组织HE染色发现糖尿病大鼠角膜上皮层变薄,基底细胞结构紊乱、形态异常。角膜免疫组织化学染色发现与对照组相比,角膜基底细胞的vimentin和β-catenin蛋白表达明显降低。结论高糖可导致角膜缘干细胞迁移障碍和增殖抑制,其损伤机制与高糖导致角膜缘干细胞表面分子标志的丢失有关。 马文贝 冯松福 韦诗羽 陈慧 梁丽芳 钟彦彦 陆晓和关键词:角膜缘干细胞 Β-CATENIN VIMENTIN 细胞外ATP激活P2X7R--NF--κB通路促进小鼠髓源性树突状细胞成熟的机制研究 目的:树突状细胞对免疫的调控与其成熟度密切相关。一般情况下,成熟树突状细胞促进免疫排斥,而未成熟树突状细胞诱导免疫耐受。通过干预树突状细胞的成熟来诱导免疫耐受,对角膜移植免疫具有重要意义。本课题组前期研究发现,在免疫排斥... 虞莹关键词:髓源性树突状细胞 核转录因子 omega-3治疗大鼠干眼的实验研究 被引量:4 2016年 目的 探讨omega-3治疗苯扎氯铵诱导的大鼠干眼的疗效及其可能机制。方法 45只6~8周龄SD大鼠,随机分为3组,每组15只。生理盐水组用生理盐水灌胃,橄榄油组用橄榄油灌胃,omega-3组用omega-3灌胃,连续2个月。2个月后,3组分别接受15d的苯扎氯铵诱导干眼,干眼诱导期间大鼠灌胃同前。在干眼诱导当天、第5天、第10天、第15天观察泪液分泌量、泪膜破裂时间(tearbreak-uptime,BUT)和角膜荧光素染色评分,干眼诱导第15天行大鼠角膜和结膜组织的HE染色。结果 干眼诱导第15天omega-3组泪液分泌量比橄榄油组和生理盐水组明显增多,差异均有统计学意义(P=0.023、0.027)。干眼诱导第10天、第15天omega-3组BUT较橄榄油组和生理盐水组明显变长,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。干眼诱导第15天omega-3组角膜荧光素染色评分比橄榄油组和生理盐水组明显减少,差异均有统计学意义(P=0.012、0.015)。干眼诱导第15天omega-3组角膜、结膜组织与正常角膜、结膜组织相似。橄榄油组和生理盐水组角膜上皮细胞层次明显增加,表层细胞不规则缺失,基底细胞排列紊乱,基质层少许水肿;结膜上皮结构不完整,排列不规则,结膜上皮细胞增生,基底层细胞排列不整齐,可见炎性细胞浸润。结论 omega-3能有效抑制泪液分泌量,增强泪膜稳定性,保护角膜和结膜组织。 蔡伟浩 彭玲 陆晓和 吴伟 李妍 李阳关键词:干眼 苯扎氯铵 氟他胺诱导干眼模型大鼠角膜和泪腺组织病理变化及TNF-α、IL-1α的表达 被引量:9 2016年 目的通过雄激素受体拮抗剂氟他胺溶液灌胃建立大鼠干眼模型,观察干眼大鼠角膜及泪腺组织病理变化及TNF-α、IL^(-1)α的表达。方法取32只SPF级SD雌性大鼠随机分为4组,氟他胺高、中、低浓度组和对照组,每组8只,每天分别用浓度为16 mg·kg-1、13 mg·kg-1、10 mg·kg-1氟他胺溶液和1 m L生理盐水灌胃。给药后0周、2周、4周、8周、16周、20周分别检测各组基础泪液分泌试验(SchirmerⅠtest,SⅠt)值、泪膜破裂时间(break-up time,BUT)及角膜荧光素钠染色情况。给药后0周、10周、20周采用放射免疫法检测各组血清睾酮浓度。给药后20周处死大鼠取各组角膜与泪腺组织行病理学观察,免疫组织化学方法检测各组TNF-α、IL^(-1)α的表达情况。结果给药后4周时高、中浓度组SⅠt值开始减小,与对照组比较差异均有统计学意义(均为P<0.05)。8周时高、中、低浓度组的SⅠt值均小于对照组(均为P<0.05),20周时高(3.23±0.31)mm、中(3.98±0.36)mm、低(4.73±0.18)mm浓度组的SⅠt值进一步减小,且均较对照组(9.60±0.60)mm下降大于50%(均为P<0.05),高、中、低浓度组两两比较差异均有统计学意义(均为P<0.05)。给药后4周时高浓度组大鼠即出现BUT缩短,8周时,高、中、低浓度组的BUT均短于对照组(均为P<0.05),20周时高(2.40±0.61)s、中(4.32±0.68)s、低(6.10±0.81)s浓度组的BUT较对照组(9.12±0.73)s进一步缩短,各组之间两两比较差异均有统计学意义(均为P<0.05)。给药后4周时高、中浓度组开始出现角膜上皮点状荧光素钠着色,16周时中、低浓度组出现小片状着色,高浓度组可见角膜上皮弥漫性大片状着色,20周时各组染色评分两两比较差异均有统计学意义(均为P<0.05)。给药后20周时睾酮浓度高浓度组(5.08±0.21)pg·m L^(-1)、中浓度组(4.23±0.16)pg·m L^(-1)、低浓度组(3.58±0.24)pg·m L^(-1)较对照组(2.24±0.15)pg·m L^(-1)不同程度升高,与对照组比较差异� 彭玲 蔡伟浩 陆晓和 钟彦彦 易锐文关键词:雄激素受体拮抗剂 氟他胺 白细胞介素-1Α RelA基因修饰的树突状细胞在大鼠角膜移植免疫排斥反应中的作用 被引量:1 2017年 目的探讨RelA基因修饰供体骨髓来源的树突状细胞(dendritic cells,DC)在大鼠角膜移植免疫排斥反应中的作用。方法以SD大鼠为供体,Wistar大鼠为受体,建立大鼠穿透性同种异体角膜移植动物模型。将60只受体大鼠随机分为4组,每组15只,分别为对照组(造模前7 d尾静脉注射PBS 1 mL)、mDC组(造模前7 d尾静脉注射mDC 1 mL,共5×10~6个细胞)、imDC组(造模前7 d尾静脉注射imDC 1 mL,共5×106个细胞)及RelA-DC组(造模前7 d尾静脉注射RelA修饰的DC 1 mL,共5×10~6个细胞)。术后每天观察角膜植片免疫排斥反应情况并记录角膜植片的存活时间;术后14 d每组随机处死5只受体大鼠取其角膜作组织病理学观察。结果 RelA-DC组角膜植片存活时间为(26.2±2.3)d,较对照组(11.4±1.3)d、mDC组(9.3±1.3)d及imDC组(19.4±2.6)d均明显延长,差异均有统计学意义(均为P<0.05);imDC组的存活时间显著长于对照组、mDC组(均为P<0.05);与mDC组比较,对照组植片的存活时间延长,差异有统计学意义(P>0.05)。角膜植片组织病理学(HE染色)结果显示,对照组、mDC组角膜植片明显增厚、水肿,基质层胶原纤维排列紊乱,可见大量炎症细胞浸润以及新生血管;imDC组角膜植片呈不同程度水肿,基质层胶原纤维排列轻度紊乱,可见少量炎症细胞浸润;RelA-DC组角膜植片轻度水肿,基质层胶原纤维排列较规则,几乎没有单核细胞浸润。结论静脉输注RelA基因修饰的DC能抑制大鼠角膜移植术后免疫排斥反应的发生,明显延长角膜植片的存活时间。 易锐文 易果果 冯松福 杨济泽 彭玲 陆晓和关键词:树突状细胞 免疫排斥反应 Concentration change of TGF-β1 in aqueous humor of rabbits 2014年 Objective:To observe the influence of the the transforming growth factorβ1(TGF-β1)eve drops on rabbit aqueous humor TGF-β1 concentration,and to analyze the best drug concentration.Methods:A total of 30 New Zealand white rabbits were randomly divided into5 groups with 6 in each.Habits in control group had PBS eye drops,group A,B.C,D adopted TGF-β1 eye drops at 0.5,1.0.2.0.4.0 mg/L,respectively.4 times a day.Aqueous humor of right eye was extracted 1 week after administration lo delect concentration changes of TGF-β1 by ELISA;rabbits in fpur hroups adopted 2.0 mg/L eye drops to left eyes 4 times a day,0.2 mL aqueous humor was extracted left eye at the scheduled time point 0,30 min,2 h,4 h,24 h for testing,the slit lamp was used to observe the cornea,chamber and lens.Results:No obvious pathological changes in conjunctiva,cornea,rabbit conjunctival,anterior chamber,and the lens was found.Concentration of TGF-β1 in rabbit aqueous humor in C.D group was significantly higher than the control group(P<0.05).Conclusions:TGF-β1 eye drops at 2.0 mg/L.4.0 mg/L can significantly increase concentration of TGF-β1 in rabbit aqueous humor,withe good ocular surfac permeability. Xiao-Yi Yu Wei Wu Xiao-He Lu关键词:TGF-Β1 DROPS AQUEOUS HUMOR TRANSFORMING 小牛血去蛋白提取物与重组人表皮生长因子促进兔角膜上皮损伤愈合和血管新生 被引量:7 2014年 目的探讨小牛血去蛋白提取物与重组人表皮生长因子(recombinant human epithelial growth factor,rhEGF)对兔角膜上皮损伤修复及血管新生的作用。方法建立兔角膜上皮损伤及新生血管模型,随机分为三组(每组5只5眼):小牛血去蛋白提取物组(速高捷组)、rhEGF组和生理盐水组(NS组)。术后1 d开始分别滴速高捷、rhEGF和生理盐水,每天4次,观察角膜上皮损伤修复及新生血管面积变化。结果术后1 d,rhEGF组、速高捷组与NS组角膜上皮愈合率分别为(51.83±8.87)%、(39.35±6.92)%、(43.32±5.42)%,三组间差异有统计学意义(F=6.475,P=0.012),rhEGF组角膜上皮愈合率高于速高捷组(P=0.004)和NS组(P=0.041)。术后2 d、3 d,三组间角膜上皮愈合率差异均无统计学意义(均为P>0.05)。术后18 d,速高捷组角膜新生血管面积(58.27±5.42)mm2小于rhEGF组(79.98±8.63)mm2和NS组(77.16±12.59)mm2,差异均有统计学意义(P=0.040、0.008)。术后8 d、12 d、15 d和21 d,三组间角膜新生血管面积差异均无统计学意义(均为P>0.05)。结论 rhEGF早期(2 d内)较速高捷促进兔角膜上皮损伤修复作用明显,rhEGF和速高捷促进角膜新生血管作用不明显。 吴伟 李朝阳 王智崇 陆晓和 符敏关键词:角膜 损伤愈合 新生血管 糖尿病视网膜病变全视网膜光凝术后玻璃体视网膜界面的变化 被引量:5 2014年 目的观察比较不同时期糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)患者全视网膜光凝术(panretinal photocoagulation,PRP)前后玻璃体视网膜界面状态的变化。方法将确诊为2型糖尿病的患者132例217眼随机分为四组:单纯糖尿病组、轻中度非增生期糖尿病视网膜病变(non-proliferative diabetic retinopathy,NPDR)组、重度NPDR组和增生期糖尿病视网膜病变(proliferative diabetic retinopathy,PDR)组,另选取正常对照组26例52眼。采用裂隙灯显微镜加前置镜、B超、光学相干断层扫描(optical coherence tomography,OCT)观察各组患者玻璃体视网膜界面的状态,比较各组玻璃体后脱离(posterior vitreous 氉detachment,PVD)的发生率,观察NPDR组、PDR组患者行PRP前后PVD的变化。结果重度NPDR组(48.3%)和PDR组(51.7%)PVD发生率高于正常对照组(7.6%),差异均有统计学意义(P<0.01)。重度NPDR组(38.3%)和PDR组(32.8%)PRP术后完全性PVD发生率(38.3%、32.8%)高于治疗前(16.7%、12.1%),差异均有统计学意义(均为P<0.01)。结论DR常合并异常玻璃体视网膜界面,PRP可以促进增生期DR患者形成完全性PVD,有利于延缓或者阻止DR病变进展,防止视网膜脱离,有利于提高手术疗效。 符敏 吴伟 唐罗生 陆晓和关键词:糖尿病视网膜病变 玻璃体视网膜界面 玻璃体后脱离 全视网膜光凝 Omega-3治疗干眼的研究进展 被引量:10 2016年 干眼是眼科常见病、多发病,可以引起一系列严重影响患者视功能的并发症。近年来流行病学调查显示干眼患病率逐年增加。由于干眼病因繁多,发病机制复杂,目前临床上对干眼缺乏有效的治疗。近期学者们发现,口服omega-3甚至局部使用omega-3滴眼可以起到治疗干眼的作用。本文就omega-3治疗干眼的研究进展及其治疗干眼的机制作一综述,为干眼的治疗提供新的思路。 蔡伟浩 彭玲 陆晓和 吴伟关键词:干眼 多不饱和脂肪酸 lncRNA-MEG3通过P53途径介导视网膜母细胞瘤凋亡 被引量:3 2017年 目的探讨MEG3是否参与视网膜母细胞瘤的形成及其分子机制。方法应用实时荧光定量PCR技术检测视网膜母细胞瘤组织及瘤旁正常视网膜组织标本中MEG3的表达水平;通过转染pcDNA-MEG3或siRNA-MEG3上调或干扰视网膜母细胞瘤细胞SORB50及HXO-RB44中MEG3的表达水平,随后用流式细胞仪检测转染后的细胞凋亡率变化,用Western blot检测转染前后P53蛋白表达水平的变化。结果视网膜母细胞瘤组织中MEG3的表达较瘤旁正常视网膜组织出现显著下降(P=0.014)。转染了pcDNA-MEG3的SO-RB50细胞MEG3表达显著增加(P=0.002),转染了siRNA-MEG3的HXO-RB44细胞MEG3表达显著减少(P=0.004)。流式细胞仪检测结果显示,MEG3表达上调后的SORB50细胞凋亡率显著增加(P<0.05);干扰MEG3表达后的HXO-RB44细胞凋亡率显著减少(P<0.05)。Western blot检测结果显示,转染了pcDNA-MEG3的SO-RB50细胞中P53蛋白的表达较阴性对照组显著增加(P<0.05),转染了siRNA-MEG3的HXO-RB44细胞中P53蛋白的表达较阴性对照组显著减少(P<0.05)。结论视网膜母细胞瘤组织中MEG3的表达下调,且MEG3可能通过促进P53蛋白的表达诱导视网膜母细胞瘤细胞的凋亡,从而影响视网膜母细胞瘤的发生和发展。 高亚莉 陆晓和关键词:视网膜母细胞瘤 长链非编码RNA 细胞凋亡 P53蛋白