“十五”国家科技攻关计划(2004BA719A14)
- 作品数：20 被引量：289H指数：9
- 相关作者：郑永唐贾曼红陆林张高红王云华更多>>
- 相关机构：中国科学院云南省疾病预防控制中心昆明医学院更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项云南省科技攻关计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学更多>>
- HIV-1蛋白酶的表达、纯化及其抑制剂体外筛选方法的建立被引量：4
- 2006年
- 从HIV-1IIIB病毒RNA经RT-PCR得到HIV-1蛋白酶编码序列,克隆到pet28a质粒中构建HIV-1蛋白酶表达载体。阳性克隆转染E.coliBL21DE3,经IPTG诱导,蛋白酶以包涵体的形式表达,表达量占菌体总蛋白量的40%。包涵体经TritonX-100洗涤后溶解于8M尿素,溶解后的蛋白溶液经sephacyls-200H.R分子筛柱纯化后纯度达到90%以上,收集蛋白酶峰稀释复性并通过超滤进行浓缩。经检测,纯化的蛋白酶具有较高的活性。用荧光标记的蛋白酶底物检测不同浓度indinavir对蛋白酶活性的影响,表明该方法可以用于蛋白酶抑制剂的筛选。
- 王云华王睿睿杨柳萌李健峰徐维明郑永唐
- 关键词：HIV-1蛋白酶纯化抑制剂
- HIV-1核衣壳蛋白NCp7抑制剂体外筛选方法的建立被引量：1
- 2008年
- 目的表达HIV-1核衣壳蛋白(nucleocapside proteinp7,NCp7),并建立抑制剂筛选方法。方法从pBRU2/ADP202质粒经PCR得到HIV-1NCp7编码序列,克隆到pet28a质粒中构建HIV-1NCp7表达载体。阳性克隆转染E.coliBL21DE3,以IPTG诱导,细胞裂解液经Q SepharoseH.P和SP Sepharose H.P纯化后纯度达到90%以上。将具有锌离子逐出活性的H2O2和2,2′-联硫基二吡啶(2,2′-di-thiodipyridine,AT-2)与NCp7作用,用锌离子特异的荧光染料检测。用该方法检测KIZ-CM系列化合物。结果可以检测H2O2和AT-2的锌离子逐出活性,经该方法筛选,KIZ-CM10,18,19等化合物具有一定的锌离子逐出活性。结论在国内首次建立了HIV-1NCp7锌离子逐出方法,该方法可以用于NCp7抑制剂的筛选。
- 王云华王睿睿杨柳萌李健峰徐维明郑永唐
- 关键词：HIV-1纯化抑制剂
- 云南省德宏州HIV感染者的阴性配偶中新发感染率研究被引量：35
- 2010年
- 目的 了解德宏州HIV感染者的阴性配偶中HIV新发感染率.方法 2005年11月始在HIV感染者的阴性配偶中建立前瞻性队列,每6个月随访,进行问卷调查和HIV检测.结果 至2008年6月底共纳入研究对象790人,随访观察702人,2006-2008年随访期间发病密度为2.58/100人年,各年度发病密度分别为2.22/100人年、2.95/100人年、2.74/100人年.Cox回归模型结果显示,与发病风险有关的因素有：居住于盈江县[风险比（HR）=4.37,95%CI：1.48～12.90,P=0.008 ]、有吸毒史（HR=3.49,95%CI：1.09～11.18,P=0.035）以及配偶（指感染者）未接受过抗病毒治疗（HR=3.60,95%CI：1.41～9.16,P=0.007）.结论 德宏州HIV感染者的阴性配偶中HIV新发感染率较高,针对某些地区以及本人有吸毒史、或其HIV阳性配偶未接受抗病毒治疗的感染者配偶仍需加强HIV预防干预.
- 段松杨跃诚项丽芬叶润华贾曼红罗红兵赵余仙任达濮永成韩文香杨忠桔李维美王继宝李艳玲杨锦傅卓华何纳
- 关键词：艾滋病毒前瞻性队列
- 云南省1989-2005年艾滋病流行分析被引量：127
- 2006年
- 目的了解云南省不同地区、不同人群艾滋病流行特点和变化趋势。方法采用哨点监测、血清横断面调查和常规资料收集等方法进行血清学流行病学调查。采用Workbook模型对全省现存的艾滋病病毒（HIV）感染者人数进行估计。结果1989年首先在边境注射吸毒人群中发现HIV流行，截止2005年12月，全省共发现HIV感染者40157例，分布于全省16个地州的128个县（市），其中有4个州（市）进入高度流行期，12个州（市）进入中度流行期，估计实际存活感染者人数为9．2万。近3年注射吸毒人群HIV平均感染率为18．3％～22．6％，5个地区注射吸毒人群HIV感染率≥40％；女性性工作者平均感染率为0～5．2％，嫖客平均感染率分别为0～1．8％，67％的县区发现女性性工作者中存在HIV流行；男性性病患者HIV平均感染率为1．7％～2．6％，孕妇HIV平均感染率2003—2005年分别上升到0．37％、0．38％和0．36％，献血员的HIV感染率持续上升，仅昆明市2005年献血员HIV感染率达到0．127％。结论云南省艾滋病疫情地区范围继续扩大，HIV感染途径正发生明显改变，处于从高危人群向一般人群广泛扩散的关键时期。
- 陆林贾曼红马艳玲陆继云杨莉卢冉张强梅静远
- 关键词：艾滋病哨点监测
- 天花粉蛋白体外抗人白血病和淋巴瘤细胞的作用机制被引量：12
- 2007年
- 本研究的目的是探讨天花粉蛋白(TCS)对人白血病和淋巴瘤细胞系的杀伤作用机制。用台盼蓝染色法检测TCS对细胞生长的影响,应用流式细胞术检测TCS诱导细胞凋亡的情况及对细胞生长周期的影响。结果表明:12.5μg/ml浓度的TCS可以显著抑制各种白血病细胞系的增殖,但对T淋巴细胞系和巨噬细胞细胞系表现为诱导细胞凋亡的作用,而对B淋巴瘤细胞系则表现为生长抑制效应。通过细胞周期检测发现,TCS可以将B淋巴瘤细胞系细胞阻滞在S期,从而抑制细胞增殖,但对T淋巴细胞系则无明显影响。结论:TCS以不同的作用机制杀伤白血病细胞,根据不同的细胞类型分别表现为诱导细胞凋亡和阻滞细胞生长周期的作用。
- 王媛媛欧阳东云郑永唐
- 关键词：天花粉蛋白细胞周期白血病淋巴瘤
- 云南省18～49岁男性居民/村民艾滋病危险行为调查分析被引量：4
- 2007年
- 目的了解男性居民/村民艾滋病危险行为水平。方法采用分层抽样法选取5个县,采用概率抽样方法对18～49岁城市男性居民和农村男性村民共3008人进行问卷调查。结果被调查的男性城市居民和农村村民过去1a嫖娼比例分别为8.6%和9.9%,以少数民族和18～30岁的青年人较高。居民和村民最近1a与暗娼坚持使用安全套的比例分别为36.3%和34.2%,调查对象与不同类型性伴的安全套使用率存在较大差异。城市居民和农村村民自报过去1a中发生过同性性行为的比例分别为0.8%和0.7%,未发现地区和民族间存在差异。城市居民和农村村民自报曾经使用毒品的比例分别为1.4%和4.3%,目前仍在吸毒的比例分别为0.54%和0.55%,少数民族吸毒比例(4.9%)高于汉族(2.9%),艾滋病流行严重地区的居民吸毒率高于低流行地区。结论云南省因吸毒造成艾滋病传播的危险持续存在,规模较大的性乱人群加大了艾滋病性传播的危险。建议加大对青少年、少数民族地区和吸毒严重地区的防治力度,将同性性接触人群的干预纳入防治规划中。
- 贾曼红张强陆继云付丽茹卢冉罗红兵梅静远陆林
- 关键词：获得性免疫缺陷综合征流行病学
- 傈僳族地区预防保健工作者应对艾滋病能力的调查和干预
- 2006年
- 目的探讨傈僳族地区预防保健工作者的艾滋病(AIDS)预防知识、态度,并对之进行AIDS的培训,传授健康教育技能。方法对42名预防保健工作者先进行问卷调查,根据需求确定培训内容,用参与式方法进行培训,结束后进行效果评价。结果培训前问卷平均得分为56.71分,培训后问卷平均得分为83.93分,培训前后差异有显著的统计学意义(P<0.01)。结论应重视低流行区AIDS预防,参与式培训方式在少数民族地区AIDS宣传教育中效果显著。
- 陈青松刘苹
- 关键词：艾滋病病毒艾滋病问卷调查健康教育
- AIDS猕猴模型在HIV疫苗研究中的应用被引量：12
- 2007年
- 对HIV疫苗的研究一直是国际上艾滋病方面研究的热点和难点。动物模型则为疫苗研究必不可缺少的重要工具,缺乏合适的动物模型很大程度上制约了AIDS疫苗的研究。目前在国际上SIV或SHIV感染的猕猴模型为最常用的AIDS研究模型,受猕猴背景及病毒特性等多种因素的影响,使得以上两种模型在HIV疫苗研究中仍存在一定的局限性。为了更好地发挥猕猴模型在HIV疫苗研究中的巨大潜力,开发理想的AIDS猕猴模型已成为目前HIV疫苗研究的首要任务。本文简要介绍了AIDS疫苗的研发策略、研发概况以及SIV/SHIV猕猴模型在HIV疫苗中的应用,并对其中存在的问题及其应用前景进行了探讨。
- 张高红李明华郑永唐
- 关键词：艾滋病猴免疫缺陷病毒疫苗猕猴
- HIV-1核衣壳蛋白NCp7的功能及其抑制剂研究进展
- 2007年
- NCp7在HIV-1生活周期中多个步骤发挥重要的核酸分子伴侣作用。抑制NCp7的功能可阻断HIV-1复制。NCp7含有两个高度保守的锌指结构,对NCp7的功能起决定性作用。锌指结构突变将导致HIV-1丧失感染能力。NCp7抑制剂可望成为下一代不容易产生耐药突变的抗HIV-1药物。本文就NCp7抑制剂目前的研究进展作简略综述。
- 王云华杨柳萌郑永唐
- 关键词：HIV核衣壳蛋白锌指结构抑制剂
- 槐花提取化合物K3体外抗HIV-1活性的研究被引量：17
- 2006年
- 目的:研究槐花提取化合物K3的体外抗H IV-1活性,并对其抗H IV-1机制进行初步探讨。方法:采用MTT比色法检测化合物对各种细胞的毒性。用合胞体形成计数法,p24抗原捕获ELISA法及RT-PCR等多种方法研究化合物体外抗H IV-1活性。结论:槐花提取化合物K3体外有较好的抗H IV-1活性,能够抑制病毒实验株(H IV-1ⅢB,耐药株(H IV-174V)和临床分离株(H IV-1KM018)等多种病毒株的复制,且其作用机制是多靶点的,不仅可以抑制病毒的进入,还可以抑制H IV-1逆转录酶活性。
- 张高红郑永唐
- 关键词：HIV-1进入抑制剂逆转录酶
