北京市科委基金(Y0204002040111)
- 作品数：2 被引量：19H指数：2
- 相关作者：徐安健谷俊朝何大澄蒋单懿肖雪媛更多>>
- 相关机构：北京师范大学首都医科大学附属北京友谊医院更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金北京市科委基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 非小细胞肺癌血清标志蛋白HSP90α的鉴定及其临床意义被引量：16
- 2010年
- 目的证明HSP90α是否可以作为肺癌诊断的血清标志蛋白。方法利用SDS—PAGE和基质辅助解吸附时间飞行质谱（MALDI—TOF—MS），对具有不同转移能力的肺腺癌细胞系CL1-0（低转移）和CL1-5（高转移）的培养基上清进行分析，并对已鉴定的候选标志蛋白通过免疫印迹方法进行确定。此外，利用酶联免疫吸附技术（ELISA）对141例肺癌、37例良性肺病患者、及46例健康人血清对候选蛋白进行了进一步的分析。结果HSP90α在CL1—5的培养基中高表达，进一步发现HSP90α在非小细胞肺癌的血清中特异性升高。当ROC曲线（receiver operating characteristic，ROC）临界值取为0．535时，HSP90α能区分肺癌以及良性肺病患者和健康人，其敏感性为0．817，特异性为0．919，总体精确性为80．14％。结论HSP90α有望成为区分肺癌、良性肺病患者和健康人以及肺癌分期诊断的血清标志蛋白。
- 黄凌云徐安健蒋单懿郝佳谷俊朝肖雪媛何大澄
- 关键词：HSP90Α肿瘤转移
- 人组氨酸磷酸酶PHP14的原核表达及其体外互作蛋白的研究被引量：3
- 2010年
- 目的:表达和纯化人组氨酸磷酸酶PHP14蛋白,并寻找与其存在体外相互作用的蛋白。方法:PCR扩增PHP14的全长cDNA,并将其克隆至pGEX4T原核表达载体,构建重组表达质粒。用重组表达质粒转化大肠杆菌BL21菌株,经IPTG诱导后,使用Glutathione Sepharose 4B凝胶颗粒进行亲和纯化,通过SDS-PAGE电泳确定融合蛋白的表达。进行GST-Pulldown实验,寻找体外与PHP14相互作用的蛋白,并进行质谱鉴定。结果:在大肠杆菌BL21中成功了表达出了PHP14的可溶性融合蛋白;经Glutathione Sepharose4B凝胶颗粒纯化后,获得了纯化的GST-PHP14融合蛋白,GST-Pulldown实验和质谱鉴定结果发现PHP14与HSP90在体外存在相互作用。结论:实现了PHP14的原核表达和纯化,发现PHP14与HSP90在体外可能存在相互作用。
- 徐安健蒋单懿黄凌云谷俊朝肖雪媛何大澄
- 关键词：HSP90原核表达和纯化
