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教育部科学技术研究重点项目(705019)
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苗云霞
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苗云霞
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基于固体酶催化反应电化学测定酶含量
2009年
提出了以固体辣根过氧化物酶(HRP)对过氧化氢氧化邻苯二胺的催化作用为基础的测定HRP及其标记物的电化学方法。测定中以Au—Pt/PAN/GCE为工作电极,并详细叙述其制备过程。将一定浓度的HRP按规定方法固定在上述修饰电极上制得HRP/Au—Pt/PAN/GCE修饰电极,将此电极浸入含5.0×10^-3mol·L^-1邻苯二胺及2.5×10^-3mol·L^-1叫过氧化氢的磷酸盐缓冲溶液(pH5.0)中,反应10min后将电极取出,记录溶液中酶催化反应产物的方波伏安峰及峰电流。结果表明:酶催化反应前,底物在工作电极上于-0.488V(vs.SCE)处有明显的还原峰,在酶催化反应后,在-0.584V处出现一个更大的还原峰,电位负移160mV,且峰电流明显增大。峰电流值(Ip)与修饰在Au-Pt/PAN/GCE电极上的HRP的含量在1.0×10^-2~2.0×10^2μg·L^-1之间呈线性关系,方法的检出限(3S/N)为3.0ng·L^-1。
苗云霞
关键词:
电化学测定
辣根过氧化物酶
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