国家自然科学基金(30973232)
- 作品数：7 被引量：11H指数：2
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- 哮喘大鼠肺组织5-脂氧合酶mRNA,15-脂氧合酶mRNA表达失衡
- 2019年
- 目的观察哮喘大鼠肺组织中5-LO和15-LO的表达情况,与血清IgE、LXA4之间的关系,以及地塞米松对其表达的影响,明确哮喘大鼠肺组织中是否存在5-LOmRNA,15-LO mRNA表达失衡,并探讨其在哮喘病理生理中的意义。方法将21只雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为3组,即正常对照组、哮喘组和地塞米松组,每组各7只。采用鸡卵清白蛋白(OVA)致敏、激发,建立支气管哮喘大鼠气道炎症模型,RT-PCR法检测各组大鼠肺组织5-LO mRNA,15-LO mRNA表达水平;酶联免疫吸附实验(ELISA)测定血清脂氧素A4(lipoxinA4,LXA4)及OVA特异性IgE蛋白含量。结果5-LO mRNA在哮喘组(1.47±0.25)明显高于正常对照组(0.46±0.13),15-LO mRNA在哮喘组(0.63±0.17)明显低于正常对照组(1.08±0.39),P均<0.01。地塞米松干预后5-LO mRNA(0.62±0.14)、15-LO mRNA(0.96±0.24)出现回复性调节,与哮喘组比较,差异有统计学意义(P<0.05),与正常对照组比较,差异无统计学意义。IgE在哮喘组(86.36±2.32nmol/ml)较正常对照组(13.06±2.23nmol/ml)明显升高(P<0.01),地塞米松干预后为44.48±4.03nmol/ml,较哮喘组明显下降(P<0.01)。LXA4在哮喘组(478.04±89.73nmol/L)较正常对照组(382.68±75.65nmol/L)和地塞米松组(393.68±229.04nmol/L)有上升趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。相关性研究发现,5-LO mRNA水平与血清IgE含量呈显著正相关(r=0.793,P<0.001);15-LO mRNA水平与血清IgE含量呈负相关(r=-0.604,P<0.005),且受5-LO的影响;LXA4与血清IgE含量无显著相关性。当5-LO mRNA/15-LO mRNA<1时,LXA4与5-LO mRNA/15-LO mRNA呈正相关(r=0.619,P<0.05);而当5-LO mRNA/15-LOmRNA>1时,LXA4与5-LO mRNA/15-LO mRNA呈显著负相关(r=-0.879,P<0.01)。结论在支气管哮喘大鼠肺组织中存在5-LO,15-LO表达失衡,这是导致高IgE水平以及脂氧素合成障碍的重要原因。地塞米松的抗炎作用部分通过调节5-LO,15-LO表达平衡实现。15-LO对IgE有负调节作用,可能与LXA4无关。
- 陈泗虎革丽莎王小明李昌崇
- 关键词：5-脂氧合酶过敏性炎症脂氧素
- 糖皮质激素、香菇多糖对哮喘气道重塑大鼠肺组织c-Jun氨基末端激酶表达的影响被引量：3
- 2011年
- 目的研究糖皮质激素、香菇多糖(lentinan,LNT)对哮喘气道重塑大鼠肺组织c-Jun氨基末端激酶(JNK)表达的影响。方法 SD大鼠随机分为正常对照组、哮喘组、布地奈德(BUD)组、地塞米松(DXM)组、LNT组,以卵白蛋白致敏和激发复制哮喘气道重塑模型,干预组分别于每次雾化激发前以BUD雾化或DXM、LNT腹腔注射干预,正常对照组以生理盐水代替卵清白蛋白致敏和激发。留取支气管肺泡灌洗液(BALF)进行细胞分类计数。采用图像分析技术测定支气管壁厚度(Wat)和平滑肌厚度(Wam),免疫组化(IHC)检测肺内磷酸化JNK(p-JNK)蛋白表达,WESTERN BLOT检测肺匀浆p-JNK表达,直线相关分析肺组织p-JNK蛋白平均吸光度(Am)与BALF中嗜酸性粒细胞百分比(EOS%)的相关性以及Wat、Wam与p-JNK蛋白的相关性。结果哮喘组BALF中EOS%显著高于正常对照组(P<0.01),各干预组EOS%均显著低于哮喘组(均P<0.01),但仍高于正常对照组(P<0.05或P<0.01);哮喘组气道壁厚度较正常对照组显著增加,各干预组可抑制气道壁增厚;BUD、DXM组Wam比较,无显著性差异(P>0.05),二者均低于LNT组(均P<0.01);BUD、LNT组Wat比较无显著性差异(P>0.05),但均比DXM组高(P<0.05或P<0.01);IHC显示p-JNK蛋白主要表达于支气管上皮细胞、平滑肌细胞及散在炎性细胞的胞浆和胞核;IHC、WESTERNBLOT检测均显示哮喘组肺组织p-JNK蛋白表达增高;BUD、DXM、LNT均可抑制JNK磷酸化;BUD、DXM组p-JNK表达均较LNT组低(均P<0.01);肺组织p-JNKAm与BALF中EOS%呈显著正相关(P<0.01),Wat、Wam与p-JNKAm均呈显著正相关(均P<0.01)。结论 BUD、DXM、LNT有减轻哮喘气道EOS炎症,抑制哮喘气道重塑的作用,其机制可能与其下调JNK表达有关;LNT抑制气道重塑的作用较糖皮质激素弱。
- 林立李昌崇张维溪苏苗赏叶乐平项蔷薇张海邻
- 关键词：糖皮质激素香菇多糖哮喘气道重塑JNK丝裂原活化蛋白激酶类
- 地塞米松对急性哮喘大鼠肺组织15-脂氧合酶表达的影响被引量：4
- 2011年
- 目的 15-脂氧合酶(15-LO)是一种表达于哮喘肺组织,参与抗炎和促炎物质生成的过氧化物酶。基因队列研究认为它可能对过敏性哮喘起保护作用。本研究通过观察哮喘大鼠肺组织15-LO的表达以及地塞米松对其表达的影响,探讨15-LO在哮喘中的作用。方法将27只雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为:正常对照组、哮喘组、地塞米松组。采用卵清白蛋白(OVA)致敏、激发,建立支气管哮喘大鼠气道炎症模型。ELISA法测定肺组织匀浆15-LO蛋白含量;RT-PCR法检测肺组织15-LO mRNA表达水平。结果哮喘组大鼠肺组织匀浆15-LO蛋白含量(2080±73μg/mL)及肺组织15-LO mRNA转录水平(0.51±0.14)均显著低于正常对照组的(2472±106μg/mL)和(0.76±0.15)(P<0.01);地塞米松干预后15-LO蛋白(2562±218μg/mL)及mRNA(1.02±0.34)表达均上调(P<0.01)。结论哮喘大鼠肺组织15-LO表达低下,地塞米松可能部分通过上调哮喘大鼠肺组织15-LO而发挥抗炎作用。
- 革丽莎李昌崇张维溪梁亚峰张和
- 关键词：支气管哮喘炎症地塞米松
- JNK1基因沉默对肺成纤维细胞增殖的影响被引量：1
- 2013年
- 目的研究C-Jun氨基末端激酶1(JNK1)基因表达沉默对肺成纤维细胞MRC-5增殖的影响。方法设计针对JNK1基因的小RNA分子(siRNA),以脂质体转染法将双链siRNA转入MRC-5细胞后,采用流式细胞术检测最佳转染浓度,RT-PCR检测JNK1 mRNA表达变化,Western blot检测总JNK、磷酸化JNK(P-JNK)蛋白表达,用CCK-8法检测siRNA对MRC-5细胞增殖的影响。结果 siRNA转染MRC-5细胞的最佳浓度为50nmol/L;设计的两个靶位点siRNA,均可有效降低JNK1 mRNA表达,其中siRNA1抑制效果较siRNA2明显;siRNA1降低总JNK及P-JNK蛋白表达,有效抑制MRC-5细胞的增殖。结论 体外合成的siRNA可降低MRC-5细胞中JNK1基因的表达,降低JNK磷酸化水平,明显抑制细胞增殖。
- 林蓓蓓张慧林立崇蕾张维溪李昌崇张海邻
- 关键词：JNK1RNA干扰细胞增殖
- JNK信号通路在白介素-1β介导人胚肺成纤维细胞活化中的作用被引量：1
- 2017年
- 目的探讨c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号转导通路在白细胞介素-1β(IL-1β)介导的人胚肺成纤维细胞(FB)活化中的作用。方法体外培养人胚肺FB,用IL-1β、JNK抑制剂(SP600125)作用于细胞,采用免疫蛋白印迹法(Western blot)检测细胞JNK/SAPK磷酸化水平和α-平滑肌激动蛋白(α-SMA)的表达,RT-PCR方法检测纤溶酶原激活物抑制剂(PAI-1)、纤维连接蛋白(FN)、神经生长因子(NGF)和α-SMA mRNA的相对表达量,ELISA法检测培养上清液中NGF及白细胞介素-6(IL-6)水平。结果在IL-1β刺激下,人胚肺FB中α-SMA及磷酸化JNK蛋白表达显著高于对照组,同时PAI-1、FN、NGF和α-SMA mRNA的表达及培养上清液中NGF、IL-6水平均明显高于对照组(P<0.05);SP600125显著抑制IL-1β诱导的上述指标表达增加(P<0.05)。结论 IL-1β促进人胚肺FB活化及细胞外基质聚集,JNK信号转导通路参与这一过程。
- 张慧林蓓蓓张维溪林立李昌崇
- 关键词：白细胞介素-1ΒJNK信号通路人胚肺成纤维细胞细胞外基质
- IL-1β对体外培养MRC-5细胞增殖、表型转化的影响
- 2013年
- 目的探讨外源性白介素-1β(IL-1β)对体外培养的人胚肺成纤维细胞(MRC-5)表型转化的影响。方法体外培养人胚肺成纤维细胞(MRC-5),以不同浓度IL-1β(0、0.1、1、5、10ng/ml)刺激48h和同一浓度(10ng/ml)IL-1β刺激不同时间(0、24、48、72h);采用CCK-8法检测细胞增殖情况,半定量反转录聚合酶链式反应法(RT-PCR)、Western blot检测细胞表型转化标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的mRNA和蛋白水平。结果 IL-1β以浓度和时间依赖性方式调节MRC-5细胞α-SMA mRNA和蛋白表达。结论 IL-1β可能通过促进肺成纤维细胞增殖和肺成纤维细胞-肌成纤维细胞的细胞表型转化,促进气道炎症后的重塑进程。
- 张和金龙腾林立虞秀飞王丽李昌崇
- 关键词：细胞表型转化Α-平滑肌肌动蛋白白介素-1Β肺成纤维细胞
- 香菇多糖对白介素-1β诱导人胚肺成纤维细胞表型转化的影响被引量：2
- 2011年
- 目的研究白介素-1β(IL-1β)对人胚肺成纤维细胞(FB)向肺肌成纤维细胞转化的影响及香菇多糖(LNT)的作用。方法体外培养人胚肺FB,用不同浓度IL-1β和LNT作用于细胞后,采用CCK-8法检测细胞的增殖情况,免疫细胞化学染色检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA),RT-PCR检测纤维连接蛋白(FN)、Ⅰ型胶原蛋白(ColⅠ)和α-SAM mRNA的相对表达量。结果①IL-1β组细胞增殖的吸光度、α-SMA蛋白及FN、ColⅠ和α-SAMmRNA表达均高于对照组(P<0.01),且随着IL-1β浓度的增加,表达逐渐增高。②LNT呈浓度依赖性抑制IL-1β诱导的细胞增殖及α-SMA蛋白、FN、ColⅠ和α-SAM mRNA表达(P<0.01)。结论 LNT可抑制IL-1β诱导人胚肺FB增殖和肌成纤维细胞转化及细胞外基质积聚。[中国当代儿科杂志,2011,13(4):331-335]
- 金龙腾张和李昌崇张维溪林立
- 关键词：香菇多糖白介素-1ΒΑ-平滑肌肌动蛋白人胚肺成纤维细胞
