中央高校基本科研业务费专项资金(11D10531)
- 作品数:2 被引量:3H指数:1
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- 人胰岛素B27K-DTrI前体在毕赤酵母中发酵条件的优化被引量:2
- 2011年
- B27K-DTrI(B27位突变为赖氨酸的去三肽胰岛素)具有单体性质好,生物活性高等特点,是潜在的速效人胰岛素药物。在前期实验中,筛选到了一株高拷贝、高表达B27K-DTrI前体的S菌株。为提高人胰岛素B27K-DTrI前体在重组毕赤酵母S菌中的表达量,优化了S菌5 L发酵条件(温度、pH)。结果显示:pH 5.0,温度25℃,诱导108 h后,人胰岛素B27K-DTrI前体蛋白的表达量最高,可达114 mg/L。
- 郝贺龙黄志伟张兴群于铭文陈婷
- 人胰岛素B27K-DTrI前体在毕氏酵母中表达条件的优化被引量:1
- 2011年
- 目的优化甲醇酵母表达系统,提高B27K-DTrI前体表达量。方法用不同浓度的G418 YPD平板、联合Real-time PCR筛选高拷贝菌株。优化高拷贝菌株的最佳起始诱导吸光度A、诱导时间、诱导剂浓度等表达条件。结果筛选到高拷贝菌株S3菌,最佳诱导条件为诱导起始A600约6.0,甲醇诱导浓度0.75%,诱导时间72 h,目的蛋白表达量118 mg/L。结论通过条件优化实验,为人胰岛素B27K的产业化提供了可靠的实验基础。
- 郝贺龙陈婷乔元昊黄旋江致君张兴群
- 关键词:速效胰岛素甲醇酵母