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北京市自然科学基金(7122055)
作品数:
1
被引量:1
H指数:1
相关作者:
徐有青
李鹏
朱圣韬
孙秀静
原标
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相关机构:
首都医科大学附属北京天坛医院
首都医科大学附属北京友谊医院
首都医科大学附属北京朝阳医院
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发文基金:
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相关领域:
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年份
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2014
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沉默PHF8重组慢病毒的制备及其对食管鳞癌细胞增生的影响
被引量:1
2014年
目的制备锌指蛋白8(plant homeodomain finger protein 8,PHF8)RNA干扰(RNA interference,RNAi)重组慢病毒(lentivirus)颗粒,建立PHF8表达沉默的人食管鳞癌(esophageal squamous-cell carcinoma,ESCC)稳定细胞系并观察PHF8对细胞增生的影响。方法将目的基因或阴性对照短发卡RNA(short hairpin RNA,shRNA)载体与包装载体共转染病毒包装细胞293T,收集并浓缩上清液获得重组慢病毒;测定病毒滴度后用于感染食管鳞癌细胞;通过荧光显微镜及流式细胞仪观察感染效率,嘌呤霉素筛选法建立稳定细胞系;定量PCR及Western Blotting检测PHF8的表达沉默;MTS法检测细胞的增生特性。结果成功制备了沉默PHF8的重组慢病毒;应用重组病毒感染食管鳞癌细胞后,PHF8 mRNA和蛋白的表达水平显著降低,细胞的增生明显下降。结论慢病毒介导的shRNA干扰能有效抑制食管鳞癌细胞的PHF8表达及细胞增生。
孙秀静
原标
朱圣韬
李鹏
徐有青
关键词:
慢病毒
食管鳞癌细胞
细胞增生
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