广东省科技计划工业攻关项目(2KM02505G)
- 作品数：2 被引量：80H指数：2
- 相关作者：蒋宗勇陈庄王珣章廖玲杨林更多>>
- 相关机构：广东省农业科学院中山大学更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 毕赤酵母植酸酶基因工程菌高密度培养及诱导表达被引量：3
- 2009年
- 研究了毕赤酵母基因工程菌高密度发酵培养方式和植酸酶基因高效表达策略。采用逐步增加流加方式进行高密度培养,结果发酵液中细胞干重达到64 g/L。通过在线检测细胞消耗甲醇的MSUR,估算细胞在单位时间内对甲醇需求量,从而确定甲醇流加速率,采用此种方法可使重组毕赤酵母高水平表达植酸酶,最终发酵上清液中总蛋白量为8.58 g/L,植酸酶活力达到853 U/mL。
- 王志林陈庄朱选蒋宗勇
- 人工合成的黑曲霉NRRL3135菌株植酸酶基因在毕赤酵母系统中的高效表达被引量：77
- 2001年
- 本文以黑曲霉 (Aspergillusniger)NRRL3135菌株植酸酶基因为对象 ,通过基因人工合成的方法去除了该基因的内含子与信号肽编码序列 ,换用在毕赤酵母 (Pichiapastoris)中使用频率较高的密码子以优化其表达。该人工合成植酸酶基因 (PhyA as)以N端融合的方式正确插入到毕赤酵母表达载体pPICZαA。通过电击将重组表达载体整合入酵母染色体DNA中得到重组转化子。SDS PAGE结果与表达产物酶学性质研究表明植酸酶得到分泌表达 ,且与天然产物性质基本一致。筛选得若干株高产基因工程菌 ,其中SPAN Ⅲ菌株达到了在摇床培养条件下 ,每毫升发酵液产生 16 5 0 0 0u植酸酶的水平 。
- 贝锦龙陈庄杨林廖玲王珣章蒋宗勇
- 关键词：植酸酶基因毕赤酵母表达系统
