广东省科技计划工业攻关项目(2005B20201006)
- 作品数：3 被引量：38H指数：1
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- 口蹄疫病毒VP1与3ABC基因片段的克隆及表达被引量：1
- 2008年
- 根据GenBank中注册的O型口蹄疫病毒(FMDV)VP1和3ABC基因序列,设计了2对引物.采用RT-PCR方法从FMDV分离株O/HK/2001扩增得到VP1和3ABC基因.经对它们的核苷酸序列测序和同源性比较,显示与14株O型FMDV参考毒株中的O/HKN/2002同源性最高(分别为98.3%和98.6%),并且在VP1决定各种亚型FM-DV免疫原性的主要抗原决定族的144、148、154和208位关键氨基酸,比对均未发现变异.通过酶切将VP1和3ABC基因分别亚克隆到4个表达载体pET-30a、pPROEX HTb、pQE30和pQE9中构成重组表达质粒,利用IPTG诱导表达,经SDS电泳分析表明这些重组质粒在相应表达宿主菌BL21、DH5α和M15中,除pQE30-3ABC和pQE9-3ABC外均获得了表达,其中pET-30a和pPROEX HTb载体表达量较高.
- 索青利赵明秋琚春梅陈金顶王伟利陈立军
- 关键词：口蹄疫病毒VP1基因3ABC基因
- 食品中沙门氏菌PCR快速检测方法的建立被引量：37
- 2007年
- 目的寻求快速检测食品中沙门氏菌的技术方法支持。方法根据沙门氏菌编码侵袭蛋白E(invasion protean E,invE)的基因设计一对引物,对沙门氏菌株及非沙门氏株菌基因组DNA进行PCR扩增,建立了沙门氏菌特异、敏感和快速的PCR检测方法,并对食品中的沙门氏菌进行了检测。结果该方法能检测出3.0×102cfu/mL纯培养的沙门氏菌,4种人工染菌食品的模拟检测结果显示,当各食品中初始含菌量分别为1.5cfu/g(火腿肠)、2.4cfu/g(鲜猪肉)、1cfu/ml(包装鲜奶)和1cfu/g(鲜鸡蛋)时,分别经过6h、18h、12h和18h增菌,PCR检测为阳性,而阴性对照组均为阴性。结论方法具有耗时少,特异性强,敏感性高,操作简便,费用低的优点。
- 钟伟军赵明秋张彩虹陈金顶
- 关键词：食品沙门氏菌聚合酶链反应
- 口蹄疫病毒G-01株基因组编码区的序列分析
- 2007年
- 参考GenBank中注册的O型口蹄疫病毒（FMDV）全基因序列,分段设计了9对引物,应用RT-PCR方法对G-01株的基因组编码区序列进行了克隆和序列测定,获得了该毒株基因组编码区的核苷酸序列（6966 bp）并推导出其编码的氨基酸序列（2322 aa）.将获得的G-01株基因组编码区的核苷酸序列与参考的14株FMDV基因序列进行比较,结果表明,本毒株的3A蛋白的92～101位缺失10 aa,VP1基因的133～160位的关键位点没有变化,该毒株与以HKN/2002株为代表的7株O型毒株的同源性较高,与HKN/2002株遗传关系最近,而与另外7株O型毒株同源性较低,其遗传关系也较远.由此推断G-01与HKN/2002株属于遗传关系较近的毒株,这2株病毒有着相同的进化起源.
- 索青利赵明秋陈金顶陈立军黄忠强
- 关键词：口蹄疫病毒
- 口蹄疫病毒对猪树突状细胞的免疫生物学特性影响的研究
- 本研究通过分离、诱导培养猪外周血单核细胞来源的DC,用FMDV感染猪DC,采用空斑法、间接免疫荧光法、透射电镜、流式细胞术等方法,研究FMDV对猪DC的感染性及对其功能的影响。结果表明,FMDV能感染猪DC,在FMDV感...
- 沈海燕陈金顶琚春梅赵明秋贾俊涛王元川
- 关键词：树突状细胞FMDV细胞因子分泌
- 文献传递
