国家自然科学基金(30470764) 作品数:13 被引量:80 H指数:5 相关作者: 王恩华 徐洪涛 戴顺东 齐凤杰 刘楠 更多>> 相关机构: 中国医科大学 中国医科大学附属第一医院 锦州医学院附属第一医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
Hsp90抑制TNFα诱导的细胞凋亡及线粒体细胞色素c的释放 被引量:2 2005年 目的应用热休克蛋白90(Hsp90)过表达系统探讨Hsp90是否抑制肿瘤坏死因子α(TNFα)诱导的细胞凋亡及线粒体细胞色素c的释放。方法采用电穿孔技术建立稳定过表达Hsp90的细胞克隆,应用激光共聚焦显微镜和流式细胞仪观察TNFα和放线菌酮(CHX)诱导的细胞凋亡。应用W estern b lotting方法检测细胞色素c的变化。结果相差显微镜观察Hsp90过表达细胞与对照细胞相比悬浮细胞较少(分别为18%和41%),PBS冲洗后剩余黏附细胞较多。应用共聚焦显微镜进行TUNEL测定结果显示大部分对照细胞发生凋亡,相对较少的Hsp90细胞发生凋亡。W estern b lotting检测Hsp90细胞中细胞色素c的表达与对照组相比明显减少。结论Hsp90过表达抑制TNFα诱导的细胞凋亡及线粒体细胞色素c释放,提示其在凋亡信号传导通路线粒体水平发挥抑制作用。 范垂锋 戴顺东 徐洪涛 王恩华关键词:热休克蛋白90 肿瘤坏死因子Α 细胞色素C 凋亡 热休克蛋白90抑制NIH3T3成纤维细胞凋亡 被引量:7 2006年 目的实验应用Hsp90过表达系统观察Hsp90抑制TNFα诱导的细胞凋亡,探讨其可能的作用机制。方法采用电穿孔技术建立稳定过表达Hsp90的细胞克隆,应用激光共聚焦显微镜和流式细胞仪观察TNFα和放线菌酮诱导的细胞凋亡,应用比色分析和Western blotting方法检测caspase的变化。结果1)在稳定过表达Hsp90的NIH3T3细胞中,Hsp90能够抑制TNFα诱导的细胞凋亡。2)在凋亡信号转导通路中,Hsp90作用于caspase-8下游、caspase-3上游。结论1)Hsp90能够在细胞凋亡信号转导通路中发挥负性调节因子的作用。2)Hsp90抑制剂作为抗肿瘤药物的机制之一,可能是通过促进caspase-3活化而促进肿瘤细胞凋亡。 赵月 徐洪涛 戴顺东 王恩华关键词:热休克蛋白90 凋亡 CASPASE β-连环素与T细胞因子4在非小细胞肺癌中表达关系及意义 被引量:2 2007年 背景与目的β-连环素(β-catenin)和T细胞因子4(TCF-4)表达与非小细胞肺癌(NSCLC)临床病理因素相关,本研究的目的是分析NSCLC中β-连环素与TCF-4的关系和意义。方法应用免疫组化方法观察NSCLC中β-连环素表达情况;应用免疫荧光、免疫共沉淀、原位杂交等方法分析NSCLC中β-连环素异常定位、蓄积及与TCF-4的关系。结果NSCLC中β-catenin的蛋白和mRNA水平明显高于癌旁正常肺组织,β-连环素在NSCLC肿瘤细胞胞浆和(或)胞核异常表达率为78.74%(100/127),其中核表达率为37.01%(47/127)。β-连环素异常表达与分化程度(P=0.0008)和淋巴结转移(P=0.017)相关。TCF-4在86.67%(52/60)的肿瘤细胞核和(或)浆表达,中、低分化肺癌组织的TCF-4表达强度显著高于高分化癌组织。免疫共沉淀检测发现β-连环素和TCF-4核内共同表达的病例中有76.47%(13/17)存在β-连环素/TCF-4复合体,其中核内61.54%,浆内38.46%。结论β-连环素蛋白和 mRNA的异常表达与NSCLC的恶性表型有关。TCF-4的表达与肺癌的低分化程度相关,β-连环素/TCF-4复合体在NSCLC中较普遍存在。 王妍 刘楠 戴顺东 徐洪涛 王恩华关键词:Β-连环素 非小细胞肺癌 Connexin 43和E-cadherin在非小细胞肺癌中表达及相关性研究 被引量:5 2005年 背景与目的 由连接蛋白(connexin,Cx)构成的细胞间隙连接(gap junction)对细胞的增殖和分化起着重要的调控作用,Cx表达下降将导致细胞恶化。上皮钙粘蛋白(E cadherin)为上皮细胞与细胞之间及细胞与细胞外基质粘附的跨膜糖蛋白分子,其功能抑制或表达下降可使细胞间粘附能力下降,细胞易于分离。本研究旨在探讨连接蛋白43(Connexin 43,Cx43)和E cadherin在非小细胞肺癌中的表达及两者的相互关系。方法 采用免疫组织化学S P法检测85例原发性非小细胞肺癌组织的Cx43和E cadherin蛋白表达,并进行两者的相关性分析。结果 Cx43和E cadherin蛋白在非小细胞肺癌中表达显著下降,其下降程度与肺癌的细胞分化程度、pTNM分期和有无淋巴结转移均有密切关系,而与组织学分型无明显关系。Cx43 和E cad herin蛋白表达之间存在明显的相关性。结论 Cx43和E cadherin蛋白在非小细胞肺癌中表达显著下降,且两者存在着明显的相关性,可能是肺癌发生和发展过程中的共同事件。 张永兴 徐洪涛 王恩华关键词:非小细胞肺癌 CONNEXIN 免疫组织化学 肺癌中HDPR1表达下调与不良预后相关 Dapper(Dpr)是Dishevelled(DVL)的拮抗因子。我们最近报道了非小细胞肺癌中DVL的表达与β-catenin的异常蓄积存在相关性。另有对爪蟾胚胎的研究指出,XDpr能够稳定Xp120ctn的蛋白分子作... 杨志强 赵月 刘洋 张俊毅 王恩华关键词:P120CTN Β-CATENIN 肺癌 预后 文献传递 p120ctn亚型在肺鳞癌、腺癌中的表达减弱或缺失与临床病理因素相关 目的探讨p120ctn亚型在肺鳞癌、腺癌中的表达及其与各临床病理因素的关系。方法采用免疫荧光、Western Blot和RT-PCR方法检测肺鳞癌、腺癌及对应癌旁正常肺组织和肺癌 PG细胞系中p120ctn各亚型的表达情... 刘洋 徐洪涛 戴顺东 韦强 苑希明 王恩华关键词:免疫荧光 RT-PCR 文献传递 caveolin-1在肺癌中的表达及意义 目的探讨caveolin-1(窖蛋白-1) 在肺癌组织中的表达情况及其与微血管密度 (MVD)和肺癌临床病理因素之间的关系。方法对154例原发性肺癌、相应癌旁正常肺组织及36 例淋巴结转移癌行caveolin-1免疫组化... 于涓瀚 韦强 齐凤杰 徐洪涛 王恩华关键词:肺癌 窖蛋白-1 文献传递 肺癌PG细胞系中导入Axin基因对β-catenin的影响 目的探讨Axin在肺癌细胞中的表达与β-catenin等相关分子表达、定位的关系和对肺癌细胞增殖,细胞周期和凋亡等的影响。方法将Axin基因导入Axin低表达的肺癌PG细胞系,采用免疫荧光方法观察转染前后Axin表达和定... 徐洪涛 韦强 刘洋 戴顺东 于涓瀚 刘楠 王恩华关键词:肺癌 AXIN 转染 Β-CATENIN 文献传递 p120^(ctn)在非小细胞肺癌组织中的表达及其临床意义 被引量:16 2005年 目的 探讨p120ctn在非小细胞肺癌组织中的表达及与各临床病理因素和预后的关系。方法 应用p120ctn单克隆抗体,采用免疫组织化学SP法检测143例非小细胞肺癌p120ctn表达情况,其中36例同时应用Westernblot方法对其蛋白表达和亚型情况进行了观察。结果 免疫组织化学:正常支气管黏膜细胞p120ctn表达为细胞膜强阳性,而在非小细胞肺癌中绝大多数表现为膜表达减弱或出现胞质内异位表达,其异常表达率为79 .7% ( 114 /143 )。异常表达与组织学类型无关(P>0 .05),但与肿瘤分化程度、TNM分期和淋巴结转移相关(P<0 .05),与非小细胞肺癌患者不良预后正相关。胞质的异位表达更容易出现在胞膜表达减弱的病例中,鳞癌中胞质异位表达高于腺癌。Westernblot:正常组织中p120ctn总蛋白量明显高于非小细胞肺癌,二者差异有统计学意义(P=0 .003)。正常肺组织p120ctn以亚型1(相对分子质量120 000)和亚型3(相对分子质量100 000)表达为主,而肿瘤组织中则以亚型1表达缺失或减弱为主。结论 p120ctn在非小细胞肺癌组织有异常表达,可作为评估预后的辅助指标。 谢成耀 王亮 刘洋 刘楠 邱雪杉 王恩华关键词:非小细胞肺癌 癌组织 非小细胞肺癌中NDRG1与HIF-1α表达模式及相关性的研究 2012年 目的探讨非小细胞肺癌组织中NDRG1(N-myc下游调节因子1)与HIF-1α(缺氧诱导因子1α)的表达模式及关联。方法应用免疫组织化学方法检测105例非小细胞肺癌及癌旁肺组织中NDRG1和HIF-1α的蛋白表达。应用Western Blotting检测12对新鲜肺癌组织及癌旁肺组织中NDRG1及HIF-1α的蛋白表达。结果 NDRG1与HIF-1α在非小细胞肺癌组织中具有相似的表达模式,均主要表达于细胞浆,阳性率分别为55.2%(58/105)及50.5%(53/105),部分病例伴有细胞核(分别为20.0%(21/105)及35.2%(37/105))和细胞膜(分别为11.4%(12/105)及7.6%(8/105))的表达,总的阳性率分别为60.0%(63/105)及53.3%(56/105)。NDRG1在癌旁肺组织中的表达(17.1%(18/105))低于癌组织(<0.05),HIF-1α在癌旁肺组织中的表达(46.7%(49/105))与癌组织中的表达无显著差异(>0.05),NDRG1与HIF-1α在非小细胞肺癌组织中的表达水平呈正相关(r=0.210,<0.05)。Western Blotting结果显示NDRG1在肺癌组织中的表达高于癌旁肺组织(<0.05),其在癌组织中的表达与HIF-1α的蛋白表达呈正相关(<0.05)。HIF-1α在癌及癌旁组织中的表达无明显差异(<0.05)。结论 NDRG1在非小细胞肺癌高表达与HIF-1α表达呈正相关,二者可能在肿瘤内部缺氧诱导的应激反应过程中存在相互作用。 范垂锋 毛晓韵 刘娣 王恩华关键词:缺氧诱导因子1Α 非小细胞肺癌