重庆市科委地方病重大专项基金
- 作品数：61 被引量：106H指数：6
- 相关作者：李文桂蔡世飞王敏谭建蓉陈雅棠更多>>
- 相关机构：重庆医科大学附属第一医院重庆三峡中心医院重庆市大足区人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 日本血吸虫Sj14-3-3疫苗研究进展被引量：1
- 2014年
- 日本血吸虫病是由日本血吸虫引起的一类严重危害人类健康的人兽共患寄生虫病,研制疫苗防治该病是目前的研究热点.Sj14-3-3蛋白是一种有效的疫苗分子,该文就Sj14-3-3蛋白疫苗和核酸疫苗的研究进展进行综述.
- 谭建蓉李文桂
- 关键词：日本血吸虫疫苗
- 日本血吸虫重组Bb(pGEX-Sj32)疫苗诱导小鼠脾细胞增殖、凋亡及亚群变化的研究被引量：1
- 2015年
- 目的探讨日本血吸虫重组Bb(pGEX-Sj32)疫苗诱导BALB/c鼠脾细胞增殖、凋亡及亚群的动态变化。方法将88只BALB/c小鼠随机分为2组,每组44只,分别经口服和滴鼻接种日本血吸虫重组Bb(pGEX-Sj32)疫苗,在免疫后0、2、4、6、8、10、12、14、16、18和20周每组剖杀4只小鼠,取脾,分离脾细胞,经SjAWA刺激培养(设原液和ConA刺激对照组)后采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)检测脾细胞增殖情况;经Annexin V-FITC和碘化丙啶(PI)双染色后采用流式细胞仪检测脾细胞凋亡率;采用流式细胞仪检测免疫小鼠脾CD4+T细胞和CD8+T细胞亚群百分比。结果口服组和滴鼻组小鼠脾细胞增殖均于免疫后6周(口服组原液、SjAWA刺激及ConA刺激时分别为0.609±0.144、0.638±0.013及0.638±0.013;滴鼻组三者分别为:0.687±0.009、0.705±0.006及0.728±0.002)达高峰;口服免疫组小鼠脾细胞凋亡率无论有无刺激物作用,均在免疫后4周(原液和ConA刺激组峰值分别为0.092±0.005和0.126±0.002)达最高水平,而滴鼻免疫组在免疫后8周(原液和ConA刺激组峰值分别为0.086±0.005和0.109±0.008)达峰值;口服组CD4+T细胞和CD8+T细胞亚群分别于免疫后6周(0.321±0.001)和8周(0.080±0.001)达峰值,滴鼻组CD4+T细胞和CD8+T细胞亚群分别于免疫后8周(0.327±0.010)和12周(0.082±0.002)达峰值,口服组较滴鼻组峰值提前。结论日本血吸虫重组Bb(pGEX-Sj32)疫苗可诱导小鼠脾淋巴细胞增殖、T细胞亚群升高和抑制脾细胞凋亡,产生有效的免疫应答。
- 谭建蓉李文桂覃婷
- 关键词：两歧双歧杆菌细胞增殖
- 两歧双歧杆菌介导的铜绿假单胞菌外膜蛋白Ⅰ(Bb-OprⅠ)疫苗免疫增强小鼠对铜绿假单胞菌的抑制作用被引量：3
- 2017年
- 目的研究两歧双歧杆菌介导的铜绿假单胞菌外膜蛋白Ⅰ(Bb-OprⅠ)疫苗免疫及PA01株铜绿假单胞菌攻击后,小鼠肺细菌负荷和脾细胞的增殖、T细胞亚群分布及细胞凋亡情况。方法将5×10~9个菌落形成单位(CFU)疫苗灌胃接种BALB/c小鼠,每周3次,连续接种3周。在首次免疫后4周,用5×10~6个CFU的PA01株滴鼻攻击。在攻击后2周,处死小鼠取肺和脾脏,计数肺细菌负荷;MTT法检测脾细胞增殖,流式细胞术检测脾CD4^+T细胞亚群和CD8+T细胞亚群及脾细胞凋亡率。结果 Bb-OprⅠ疫苗免疫及PA01株铜绿假单胞菌攻击后,小鼠肺细菌菌落数减少,脾细胞增殖和CD4^+T细胞比例明显增加,细胞凋亡明显减少。结论重组Bb-OprⅠ疫苗灌胃接种可增加CD4^+T细胞比例,增强对铜绿假单胞菌的抑制作用。
- 刘潇李文桂
- 关键词：铜绿假单胞菌两歧双歧杆菌疫苗
- 日本血吸虫重组Bb(pGEX-Sj14-3-3)疫苗免疫小鼠脾细胞因子的动态观察被引量：6
- 2012年
- 目的探讨日本血吸虫重组双歧杆菌属两歧双歧杆菌（Bifidobacterium bifidum,Bb）（pGEX-Sj14-3-3）疫苗免疫Balb/c小鼠后脾细胞因子的动态变化。方法重组疫苗分别经口服灌胃及鼻腔粘膜接种小鼠;在免疫后0、2、4、6、8、10、12、14、16、18、20和22周各剖杀4只小鼠,取脾及分离脾细胞;脾细胞分别经未刺激、SjAWA和ConA刺激培养;收集培养的上清液,双抗体夹心ELISA法测定培养上清液的细胞因子水平。结果口服组小鼠脾细胞IFN-γ、IL-12、TNF-α和IL-10水平分别在免疫后2~12、6~8、2~12和2~8周显著升高,分别在免疫后8、8、6和4周达最高水平;鼻腔黏膜接种组小鼠脾细胞IFN-γ、IL-12、TNF-α和IL-10水平分别在免疫后2~20、2~10、2~16和2~16周显著升高,分别在免疫后2、2、4和4周达最高水平。结论重组Bb（pGEX-Sj14-3-3）疫苗能够诱导免疫小鼠产生有效的免疫应答。
- 张宁李文桂向进平
- 关键词：日本血吸虫细胞因子
- 寄生虫重组双歧杆菌疫苗研究进展被引量：6
- 2012年
- 寄生虫病是严重威胁人类和动物健康的传染病之一，研制疫苗防治该病是当前研究的热点领域之一。随着寄生虫病和寄生虫学研究的深入，该领域取得很多进展，重组双歧杆菌疫苗以其独特的优点成为一种可行的新型疫苗，该文就寄生虫病重组双歧杆菌疫苗的研究进展进行了综述。
- 向进平李文桂
- 关键词：寄生虫病双歧杆菌疫苗棘球绦虫日本血吸虫
- 日本血吸虫重组两歧双歧杆菌疫苗的构建及其表达被引量：5
- 2017年
- 目的构建及鉴定日本血吸虫（Sj）重组两歧双歧杆菌（Bb）疫苗[Bb（pGEX—Sj26GST—Sj14-3-3）]，并研究融合基因Sj26GST—Sj14—3—3在Bb中的表达情况。方法将重组质粒pGEX—Sj26GST—Sj14-3-3电转化至Bb中，构建重组Bb（pGEX—SjZ6GST-Sj14-3—3）疫苗，用异丙基硫代-β-D-半乳糖苷（IPTG）诱导表达。采用双酶切和聚合酶链式反应（PCR）鉴定重组Bb（pGEX—Sj26GST-Sj14—3—3）疫苗，采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS—PAGE）和蛋白免疫印迹法对表达产物进行鉴定。结果双酶切及PCR证实重组质粒pGEX—SjZ6GST—Si14—3—3成功转入Bb中。SDS—PAGE鉴定结果显示，诱导表达产物是相对分子质量约为67×10^3的重组蛋白，与预期结果相符。蛋13免疫印迹法鉴定结果显示，重组蛋白能被Sj感染的兔血清所识别。结论成功构建Sj重组Bb（pGEX—Sj26GST-Sj14-3—3）疫苗，Rb可表达具有特异抗原性的Sj26GST—Sj14—3．3重组蛋白。
- 罗广旭李文桂覃婷
- 关键词：融合基因两歧双歧杆菌疫苗
- 铜绿假单胞菌重组Bb-OprI疫苗诱导小鼠保护力和脾细胞因子基因表达变化的研究被引量：6
- 2018年
- 目的研究铜绿假单胞菌重组Bb-OprI疫苗免疫及PA01株攻击后,小鼠肺组织细菌菌落计数和脾细胞因子IL-2、IFN-γ和IL-12基因表达的变化。方法取5×109个CFU Bb-OprI疫苗灌胃接种BALB/c鼠,每周3次,连续接种3周。首次免疫后4周,用5×106个CFU的PA01株滴鼻攻击。攻击后2周处死小鼠,取肺脏,经常规培养后计数菌落数;取小鼠脾脏,制备脾细胞悬液,用PaAg刺激培养,48h后收集脾细胞,PCR扩增IL-2、IFN-γ和IL-12基因。结果Bb-OprI疫苗组、空载体对照组和Bb对照组小鼠肺组织菌落数分别为(0.46±0.09)×10~8 CFU、(5.42±0.79)×10~8 CFU和(6.20±0.95)×10~8 CFU,差异有统计学意义(P<0.01);疫苗组小鼠脾细胞扩增出453bp的IL-2基因、399bp的IFN-γ基因和300bp的IL-12基因,两对照组PCR扩增均阴性。结论重组Bb-OprI疫苗可诱导小鼠脾细胞因子IL-2、IFN-γ和IL-12基因表达升高,产生Th1型免疫应答从而抵抗Pa的感染。
- 刘潇李文桂
- 关键词：铜绿假单胞菌两歧双歧杆菌
- 转基因苜蓿的研究进展被引量：4
- 2009年
- 苜蓿(Medicago sativa)是一种优良的豆科牧草,应用基因工程技术对苜蓿进行开发和改造已成为国内外研究的热点。本文综述了病毒、细菌、寄生虫、抗逆基因、品质改良基因、抗除草剂基因、单克隆抗体和工业原料等转基因苜蓿的研究进展。
- 李文桂陈雅棠
- 关键词：苜蓿转基因植物疫苗
- 日本血吸虫重组Bb(pGEX-Sj26GST-Sj32)疫苗的构建及鉴定被引量：6
- 2012年
- 目的构建并鉴定日本血吸虫重组双歧杆菌属两歧双歧杆菌(Bb)(pGEX-Sj26GST-Sj32)疫苗。方法从本室保存的BL21(DE3)(pET28α-Sj26GST-Sj32)重组菌中抽提质粒pET28α-Sj26GST-Sj32,PCR扩增Sj26GST-Sj32融合基因,将该融合基因定向克隆到大肠埃希菌-双歧杆菌穿梭表达载体pGEX-1λT中,构建重组质粒pGEX-Sj26GST-Sj32。将此重组质粒转化至大肠埃希菌BL21(DE3)感受态细胞中,抽提质粒并进行BamHⅠ及EcoRⅠ双酶切,鉴定载体片段及目的基因片段长度。用电穿孔法将重组质粒pGEX-Sj26GST-Sj32转化至Bb,构建重组Bb(pGEX-Sj26GST-Sj32),抽提质粒,进行PCR鉴定。结果 PCR成功扩增出长度为1 991bp的Sj26GST-Sj32融合基因;双酶切证实Sj26GST-Sj32融合基因成功插入质粒pGEX-1λT中;PCR证实从重组Bb(pGEX-Sj26GST-Sj32)疫苗中扩增出1991bp的Sj26GST-Sj32融合基因。结论成功构建重组Bb(pGEX-Sj26GST-Sj32)疫苗。
- 向进平李文桂
- 关键词：疫苗两歧双歧杆菌质粒
- 铜绿假单胞菌重组Bb--OprH疫苗的构建及其免疫机制的初步研究
- 目的 构建铜绿假单胞菌重组Bb-OprH疫苗，研究疫苗免疫BALB/c鼠及PAO1株攻击后诱导的保护力及其免疫机制。 方法 将PCR扩增的OprH基因克隆到pGEX-1λT中，得到重组质粒pGEX-OprH;pGE...
- 江帆
- 关键词：铜绿假单胞菌免疫机制
