目的应用比较蛋白质组学方法分析手掌参醇提取物对染尘大鼠早期肺组织蛋白表达的影响，以寻找低毒有效的矽肺防治药物并初步探讨手掌参干预后的分子机制。方法随机将Wistar大鼠分为染尘组和手掌参干预组，每组4只，气管暴露法给予1ml SiO2混悬液（50mg／ml）建立大鼠模型。染尘后第2天，干预组给予手掌参醇提取物按0．8g/100g（0．8ml／100g）的量每天灌胃，染尘组给予蒸馏水2ml每天灌胃共14d处死大鼠。取肺组织，提取总蛋白，双向凝胶电泳（two—dimensional gel electrophoresis，2-DE）结合基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（matrix—assisted laser desorption／ionization time—of-flight mass spectrometry，MALDI-TOF-MS）分析鉴定差异蛋白。免疫印迹（Westernblot）法验证差异蛋白在肺组织中的表达。结果染尘组大鼠肺泡隔水肿增厚，淋巴细胞、巨噬细胞及少数中性粒细胞浸润，伴有较多的成纤维细胞和平滑肌细胞增生。胶原纤维聚集，肺泡结构破坏，出现斑片状纤维化，细胞性结节的数量多、体积大。手掌参干预组肺组织的变化与染尘组基本相似，但病理改变较之减轻。鉴定出组织蛋白酶D前体、硫氧还蛋白过氧化物酶-1（peroxiredoxin-1，Prx-1）和SECl4类蛋白33种表达差异的蛋白。与染矽尘组相比，手掌参干预组中组织蛋白酶D前体、Prx-1表达下调，SECl4类蛋白3表达上调，差异均有统计学意义（P〈0．01）。用Westernblot法分析显示，手掌参干预组大鼠肺组织中Prx-1表达为（0．26±0．02），明显低于染矽尘组（0．35±0．04），差异有统计学意义P〈0．01）。结论手掌参醇提取物可能多环节干预肺纤维化的形成，而组织蛋白酶D前体、Prx-1和SEC14类蛋白3可能是手掌参醇提取物起作用的相关蛋白。
目的探讨手掌参醇提物(Gymnadenia conopsea Alcohol Extract,GcAE)对染矽尘大鼠肺组织肿瘤坏死因子-α(Tumor Nec-rosis Factor-α,TNF-α)表达的影响。方法将Wistar大鼠随机分为对照组、染矽尘组、GcAE治疗组,每组40只。采用气管暴露法建立大鼠矽肺模型。灌胃给予GcAE(8g.kg-1.d-1)治疗后,在第7、14、21、28和60天时每组分别随机取8只大鼠宰杀,制作大鼠肺组织芯片,用免疫组织化学PV法检测组织芯片TNF-α的表达,用Image-Pro Plus Version 4.5 for windowsTM图像分析系统对TNF-α的表达做定量分析。结果矽尘组TNF-α的积分光密度各时间点均高于对照组,在第7、14、21、28天时有统计学意义(P<0.01)。手掌参组各时间点肺组织TNF-α的积分光密度低于染矽尘组,在第7、14、21、28天时有统计学意义(P<0.01)。结论GcAE能够明显抑制矽尘诱导的大鼠肺组织TNF-α的过度表达。
