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国家自然科学基金(81020108023)
作品数:
4
被引量:10
H指数:2
相关作者:
杨桦
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杨松巍
杨学超
杨光
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2014
3篇
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白细胞介素-22对缺氧条件下肠上皮屏障的保护作用及其机制
被引量:7
2013年
目的观察白细胞介素-22(IL-22)对缺氧肠上皮T84细胞屏障功能的影响,探讨其分子机制。方法对T84细胞进行2%02缺氧6h(Hx组)及100μg/L重组IL-22(Hx+rlL-22)处理,分别检测跨上皮电阻(TER),IL-22受体A1(IL-22RAl)及紧密连接蛋白:ZO-1、Occludin、Claudin-1及Claudin-4的mRNA与蛋白表达。结果缺氧引起IL-22RAl的mRNA及蛋白表达较常氧分别下降30.0%及63.0%,并引起TER降低54.7%,经rlL-22预处理使得TER较Hx升高43.8%。缺氧处理使ZO.1、Occludin、Claudin.1及Claudin-4表达明显降低,而rlL-22预处理则可缓解该现象(mRNA及蛋白表达较Hx组分别升高:44.3%、36.4%、77.6%、61.2%及109.3%、77,6%、153.3%、79.6%,P〈0.01)。结论IL-22与其受体作用后可以维持肠屏障功能,稳定渗透性,调控紧密连接蛋白的表达。
杨学超
杨松巍
杨光
孙力华
杨桦
关键词:
白细胞介素-22
肠上皮屏障
紧密连接蛋白
Hedgehog信号通路在缺氧肠上皮屏障功能调控的作用
被引量:1
2013年
目的探讨Hedgehog(Hh)信号通路在缺氧肠上皮屏障功能调控的作用。方法大鼠小肠上皮细胞系IEC-6细胞分为3组:常氧组(21%氧浓度)、缺氧组(2%氧浓度)、缺氧+环巴胺组(用5mmol/L的环巴胺预处理30min后,再给予2%氧浓度进行缺氧处理)。RT-PCR检测Hh信号通路IHH、PTCH、GLI-1mRNA的表达变化,电阻测定仪检测跨上皮电阻(TER),Westernblot检测IHH、紧密连接蛋白经典表达分子胞质附着蛋白(ZO-1)、咬合蛋白(Occludin)、闭合蛋白(Claudin-1)的表达情况。组间比较采取单因素方差分析,两两比较采用LSD-t检验。结果RT-PCR检测结果表明:常氧组Hh信号通路IHH、PTCH、GLI-1mRNA的相对表达量分别为0.056±0.009、0.459±0.087、0.142±0.023;缺氧组分别为0.303±0.052、0.678±0.073、0.483±0.061,两组比较,差异有统计学意义(t=一14.05,一11.85,一6.52,P〈0.05)。Westernblot检测结果显示:常氧组和缺氧组的IHH相对蛋白表达量分别为0.39±0.06和0.91±0.15,两组比较,差异有统计学意义(t=一8.08,P〈0.05)。常氧组、缺氧组和缺氧+环巴胺组的TER分别为(134±5)Ohm/cm。、(100±6)Ohm/cm2、(118±5)Ohm/cm2,3组比较,差异有统计学意义(F=1.0d,P〈0.05)。与常氧组比较,缺氧组下降约27.7%(t=7.84,P〈0.05);与缺氧组比较,缺氧+环巴胺组回升约16.4%,但仍低于常氧组(t=4.23,P〈0.05)。常氧组胞质附着蛋白一1、咬合蛋白、闭合蛋白一1的表达分别为1.184-0.24、0.80±0.13、0.90±0.09,缺氧组分别为0.58±0.08、0.32±0.05、0.50±0.09,缺氧+环巴胺组分别为0.92±0.21、0.43±0.10、0.82±0.11,3组比较,差异有统计学意义(F=4.95,2.88,10.09,P〈0.05)。缺氧组较常氧组分别降低48.7%、40.0%、55.6%(t=12.86,
杨光
杨学超
陈国庆
孙力华
杨桦
关键词:
HEDGEHOG信号通路
环巴胺
紧密连接蛋白
缺氧条件下环磷酸腺苷对肠黏膜屏障功能的调控研究
被引量:2
2013年
目的探讨缺氧条件下环磷酸腺苷(cAMP)水平的变化对肠黏膜屏障功能的影响。方法采用人结肠癌Caco.2细胞建立肠上皮细胞缺氧模型,分为常氧组、常氧加Forskolin组、缺氧8h组和缺氧8h加SQ22536(腺苷酸环化酶抑制剂)组。采用cAMP检测试剂盒,检测实验各组cAMP水平的变化;RT-PCR及Westernblot方法分别检测各组肠上皮紧密连接蛋白claudin-1和occludin的mRNA和蛋白表达水平的变化:Millipore电阻抗系统法检测各组肠上皮细胞跨上皮电阻(TER)的变化情况。结果缺氧8h组肠上皮cAMP含量较常氧组明显升高[(6.30±0.50)pmol/L比(2.38±0.18)pmol/L,P〈0.01],而claudin.1和occludin的mRNA及蛋白表达水平均明显降低(均P〈0.05),TER值下降了6.30±0.64(P〈0.01)。与缺氧8h组相比,缺氧8h加SQ22536组肠上皮cAMP含量明显降低[(2.12±0.23)pmol/L比(6.30±0.50)pmol/L,P〈0.01],claudin-1和occludinmRNA及蛋白表达水平明显升高(P〈0.01),TER值升高了32.96±2.16(均P〈0.05)。结论缺氧条件下cAMP水平升高,而下调cAMP水平可增加肠道紧密连接蛋白claudin-1及occludinmRNA及蛋白水平的表达,从而减轻缺氧对肠上皮屏障的损伤。
杨洋
王文生
邱远
孙力华
杨桦
关键词:
缺氧
环磷酸腺苷
肠黏膜屏障
紧密连接蛋白
去乙酰化酶Sirt3沉默对缺氧条件下肠上皮Caco-2细胞缺氧诱导因子-1α表达的影响及其对肠上皮屏障功能的作用
被引量:1
2014年
目的 采用RNA干扰(RNAi)技术,使去乙酰化酶Sirt3基因表达下调或缺失,观察其下调或缺失后对缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达的影响及其对肠屏障功能的作用.方法 体外培养Caco-2细胞,分别检测跨上皮电阻(TER),常氧和低氧(1%O2)条件下Sirt3-小干扰RNA(siRNA)转染前后HIF-1α和紧密连接蛋白:ZO-1、Occludin、Claudin-1的mRNA与蛋白表达.结果 常氧与低氧条件下,Sirt3-siRNA转染后Sirt3的蛋白表达分别下降52%、35%;HIF-1α的蛋白表达(0.72±0.01、0.93 ±0.01)比转染前(0.38 ±0.01、0.81±0.03)明显升高(P<0.01);低氧条件下,Sirt3-siRNA转染后Occludin、Claudin-1、ZO-1的蛋白(0.71 ±0.03、0.69±0.01、0.72±0.02)和mRNA (0.80±0.01、0.84±0.01、0.88 0.03)表达比转染前明显降低(P<0.01);低氧条件下,经Sirt3-siRNA转染后TER下降30.8%.结论 缺氧条件下,Sirt3可以调控HIF-1α的表达.沉默Sirt3后紧密连接蛋白表达降低,从而影响肠屏障功能.
逯顶松
杨松巍
陈国庆
刘勇
马远航
杨桦
关键词:
缺氧诱导因子-1
紧密连接蛋白
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