河北省医学适用技术跟踪项目(GL200635)
- 作品数：5 被引量：7H指数：2
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- 胶体金免疫层析法检测鼠疫F1抗原的研究被引量：3
- 2010年
- 目的 研究胶体金免疫层析试纸条检测鼠疫F1抗原的敏感性和特异性.方法通过鼠疫F1抗原单克隆抗体（F1MAb）捕捉F1抗原的胶体金免疫层析（GICA）试纸条,检测308只强毒鼠疫耶尔森菌（鼠疫菌）感染鼠脏器标本和225份对照鼠（达乌尔黄鼠217只,小白鼠5只,豚鼠3只）标本,同时用鼠疫反向间接血球凝集试验（RIHA）微量法和细菌培养做平行检测.结果 225只对照鼠鼠疫细菌学检验及GICA和RIHA的F1抗原检测均为阴性,GICA和RIHA在1×108 cfu/ml水平上未发现与近缘假结核耶尔森菌有交叉反应.GICA、RIHA对鼠疫菌检测灵敏性为2.5×105、2.0×105cfu/ml;检测F1抗原灵敏性为1、10 μg/L.GICA与细菌学检验符合率为97.94%（522/533）,Kappa值=0.959,阳性检出率组间比较,差异无统计学意义（x2=0.36,P＞0.05）;与RIHA符合率为97.94%（522/533）,Kappa值=0.959,阳性检出率组间比较差异有统计学意义（x2=9.09,P＜0.05）.308只实验鼠样本细菌培养阳性284只,284份细菌培养阳性标本中,GICA有280份检测阳性,阳性率为98.59%,高于RIHA[阳性率为96.13%（522/533）],两组比较差异有统计学意义（x2=5.14;P＜0.05）.GICA的敏感度为98.59%（280/284）,特异度为97.19%（242/249）,阳性预测值为97.56%（280/287）,阴性预测值为98.37%（242/246）,Youden指数为0.9578.结论 GICA检测鼠疫F1抗原敏感特异,快速简便,是鼠疫早期快速诊断中有应用价值的检测技术.
- 刘合智白雪薇王海峰胡乐乐周松杨晓燕杜国义杨顺林史献明李玉贵
- 关键词：胶体金色谱法耶尔森菌鼠疫
- 胶体金免疫层析法与双单克隆抗体夹心ELISA检测鼠疫F1抗原的比较被引量：1
- 2010年
- 目的比较胶体金免疫层析法(GICA)和双单克隆抗体夹心酶联免疫吸附试验(DMcAbS-ELISA)检测鼠疫F1抗原的敏感性和特异性。方法用GICA试纸条和DMcAbS-ELISA平行检测308份强毒鼠疫耶尔森菌感染鼠脏器标本和327份对照鼠标本,用RIHA微量法同时检测作为参照。结果327份对照鼠鼠疫细菌学检验及GICA,DMcAbS-ELISA和RIHA的F1抗原检测均为阴性,GICA,DMcAbS-ELISA和RIHA在108cfu/mL水平上未发现与近缘假结核耶尔森菌有交叉反应;308只感染鼠样本细菌培养阳性284只,24只样本未分离到鼠疫菌;F1抗原检测GICA阳性287份,DM-cAbS-ELISA阳性280份,RIHA阳性276份,GICA阳性检出率最高93.19%,与DMcAbS-ELISA和RIHA比较,差异均有统计学意义(χ2=5.14,9.09;P=0.016,0.001);GICA与DMcAbS-ELISA符合率97.73%(Kappa=0.845);GICA和DMcAbS-ELISA与RIHA符合率分别是96.43%和98.70%(Kappa=0.774,0.926);284份细菌培养阳性鼠标本F1抗原检测GICA阳性率是98.59%,高于DMcAbS-ELISA和RIHA,差异有统计学意义(χ2=4.17,5.14;P=0.031,0.016);24份细菌培养阴性实验鼠标本F1抗原检测:GICA检出7份阳性,阳性率29.17%,DMcAbS-ELISA检出6份阳性,阳性率25%,RIHA检出3份阳性,阳性率12.5%,GICA高于DMcAbS-ELISA和RIHA,但差异无统计学意义(χ2=2.25,0;P=0.125,1.000)。结论GICA检测鼠疫F1抗原敏感特异,快速简便,优于DMcAbS-ELISA和RIHA,是鼠疫快速诊断中有应用价值的检测技术。
- 刘合智王海峰史献明杨晓燕周松白雪薇胡乐乐郑楠张懿晖董国润李玉贵
- 关键词：酶联免疫吸附试验F1抗原
- 双单克隆抗体夹心酶联免疫吸附试验检测鼠疫F1抗原的实验观察
- 2012年
- 目的观察双单克隆抗体（F1-McAb）夹心酶联免疫试验（DMcAbS—ELISA）快速检测鼠疫F1抗原的敏感性和特异性。方法采用鼠疫细菌学检验、DMcAbS—ELISA和反向间接血球凝集试验（RIHA）对比检测鼠疫感染鼠和阴性对照鼠脏器标本。结果共检测225份阴性对照鼠脏器标本，鼠疫细菌学检验、DMcAbS—ELISA和RIHA法检测F1抗原均为阴性。共检测308只鼠疫感染鼠脏器标本，鼠疫细菌学检验、DMcAbS—ELISA、RIHA法阳性率分别为92．21％（284／308）、90．91％（280／308）和89．61％（276／308），3种方法比较，差异无统计学意义（x。=5．65，P〉0．05）。DMcAbS—ELISA法与鼠疫细菌学检验结果符合率为97．00％[（274＋243）／533]，Kappa值为0．940；与RIHA法符合率为99．25％[（276＋253）／533]，Kappa值为0．985。脏器标本F1抗原检测的真实性比较：DMcAbS—ELISA法敏感性为96．48％（274／284），特异性为97．59％（243／249），阳性预测值为97．86％（274／280），阴性预测值为96．05％（243／253），～致性为96．99％[1／4×（274／280＋274／284＋243／253＋243／249）]，Youden指数为0．9407；RIHA法的敏感性为96．13％（273／284），特异性为98．80％（246／249），阳性预测值为98．91％（273／276），阴性预测值为95．72％（246／257）．一致性为97．39％[1／4×（273／276＋273／2844-246／257＋246／249）]，Youden指数为0．9492。DMcAbS—ELISA法对鼠疫菌检测灵敏度为2．7×10^4cfu／ml，RIHA法为2．2×10^5cfu／ml；两种方法检测F1抗原灵敏度均为10μg／L。结论DMcAbS—ELISA法检测鼠疫F1抗原具有敏感、特异、简便、快速的特点，是有应用价值的鼠疫快速诊断技术。
- 刘合智周松王海峰白雪薇胡乐乐杨顺林杨晓燕张懿晖王俊香
- 关键词：酶联免疫吸附测定
- 双抗原夹心ELISA检测鼠疫F1抗体技术的应用被引量：2
- 2009年
- 目的研究双抗原夹心酶联免疫吸附试验(DAgS-ELISA)检测鼠疫F1抗体技术在鼠疫监测中的实用性。方法用DAgS-ELISA和间接血球凝集试验(IHA)微量法对比检测558份标本鼠疫F1抗体。结果IHA检测出阳性33份,DAgS-ELISA检出阳性31份,阳性符合率为90.91%,阴性符合率99.81%,总符合率99.28%,二者检出阳性率分别为5.91%和5.56%,差异无统计学意义(χ2=0.25,P=0.625)。2种方法测定27份鼠疫免疫血清均阳性,IHA微量法的敏感性高于DAgS-ELISA(t=3.023,P=0.006)。结论DAgS-ELISA检测鼠疫F1抗体敏感性低于IHA微量法,但特异性好,无前滞反应,可避免初筛漏检问题。
- 刘合智张懿晖杨晓燕王海峰杜国义胡乐乐杨顺林董国润
- 关键词：酶联免疫吸附试验鼠疫耶尔森菌F1抗原抗体
- 鼠疫耶尔森菌F1抗原免疫Balb／c小鼠方法的研究被引量：1
- 2009年
- 目的观察鼠疫耶尔森菌F1抗原（F1Ag）单克隆抗体制备过程中，FIAg免疫Balb／c小鼠的免疫剂量和方法，探索操作性强、用时短和免疫效果好的方法。方法7～9周龄Balb／c小鼠48只．按体质量随机分成6组：150、100、50、25ug组（第1次接种为皮下多点注射，F1Ag分别为150、100、50、25ug，第2、3次接种分别为皮下多点注射和腹腔注射，F1Ag量均为100ug）、皮下接种组（3次F1Ag接种均采用皮下多点注射，每次100txg）、腹腔接种组（3次F1Ag接种均采用腹腔注射，每次100ug），每组8只。首次免疫接种F1Ag＋等量弗氏完全佐剂（CFA）的乳化剂；3周后第2次接种F1Ag＋等量弗氏不完全佐剂（IFA）的乳化剂；1周后第3次接种F1Ag（不加佐剂）；1周后取小鼠尾血，用双抗原夹心酶联免疫吸附试验（DAgS—ELISA）和间接血球凝集试验（IHA）微量法检测F1抗体。结果不同剂量（150、100、50、25Ixg）组小鼠血清F1抗体效价（DAgS-ELISA法：G=12173．87、13440．37、15024．19、4466．72；IHA微量法：G=19972．32、18089．40、23170．47、4871．08）比较，差异有统计学意义（DAgS—ELISA法：F=3．11，P〈0．05；IHA微量法：F=4．11，P〈0．05）。150、100、50ug组小鼠血清F1抗体效价明显高于25ug组（DAgS—ELISA法：t值分别为2．18、2．39、2．73，P〈0．05；IHA法：t值分别为2．54、2．73、3．13，P〈0．05）。不同接种途径条件下，皮下注射组、腹腔接种组、100ug组小鼠血清F1抗体效价呈渐次增高趋势（DAgS—ELISA法：G：8933．44、9986．16、13440．37；IHA微量法：G=13777．25、16384．00、18089．40），但差异无统计学意义（F值分别为0．66、0．25，P〉0．05）。结论F1Ag免疫小鼠首次皮下多点注射50ug，加强免疫（腹腔注射）100ug，可以缩短整个免疫周期，免疫效果良好，抗体水平较高。
- 刘合智杨晓燕胡乐乐史献明王海峰董国润李玉贵
- 关键词：耶尔森菌鼠疫F1抗原免疫
