国家自然科学基金(30371710) 作品数:13 被引量:156 H指数:9 相关作者: 沃兴德 卢德赵 李毅 唐利华 沃立科 更多>> 相关机构: 浙江中医药大学 北京中医药大学 浙江中医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 浙江省中医药管理局科研基金 浙江省医药卫生科学研究基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
温补肾阳药对甲状腺切除的肾阳虚大鼠肝线粒体蛋白质组的影响 被引量:12 2009年 目的:研究温补肾阳药对肾阳虚动物肝线粒体蛋白质组的影响。方法:12只SD大鼠,随机分为3组,每组4只。模型组和治疗组切除两侧甲状腺,正常组做相应的假手术,但不切除甲状腺。喂养7 d后模型组和治疗组大鼠出现拱背耸毛、大便稀溏等肾阳虚的症状。从第8天开始,治疗组每天喂饲温补肾阳药1次,给药剂量6.7 g.kg-1,其他2组喂饲等体积的生理盐水,连续6 d后,断头处死3组大鼠,分离提取其肝线粒体蛋白质,分别用荧光染料Cy3,Cy5标记,每个Cy3及Cy5标记的样品与等量Cy2标记的内标混合后在同一块凝胶中进行电泳分离,经不同光激发后扫描得到不同样品的蛋白质组图谱。经DeCyder 6.5软件进行差异蛋白质组分析,并对差异蛋白质进行质谱鉴定。结果:双向电泳后,平均每块胶检测到997个蛋白质点,其中所有图谱共有的点有687个,并从中筛选到22个差异蛋白,其中热休克蛋白60、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物、氨甲酰磷酸合成酶Ⅰ,ATP合成酶、乳铁传递蛋白、ATP酶质子通道蛋白、电子传递黄素蛋白和类钙离子激活中性蛋白酶12在肾阳虚状态下表达量均增加,而二氢硫辛酰胺支链酰基转移酶、脂酰辅酶A脱氢酶、鸟氨酸转氨酶和GTP结合调节蛋白在肾阳虚状态下表达量均降低。经温补肾阳药治疗后,热休克蛋白60、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物、ATP合成酶、乳铁传递蛋白、ATP酶质子通道蛋白、电子传递黄素蛋白二氢硫辛酰胺支链酰基转移酶、脂酰辅酶A脱氢酶和GTP结合调节蛋白表达量均增加,而氨甲酰磷酸合成酶Ⅰ和类钙离子激活中性蛋白酶12表达量减少。结论:温补肾阳药可能通过调节物质代谢、保护线粒体膜稳定性和维护细胞内信号传导而起到治疗肾阳虚的作用。 卢德赵 沃兴德 沃立科 李毅 唐利华 杨贞关键词:蛋白质组 肾阳虚 温补肾阳药 线粒体 RAW264.7细胞中姜黄素抗动脉粥样硬化作用机制的蛋白质组学研究 被引量:7 2011年 目的:应用凝胶内差异显示电泳技术和质谱技术研究姜黄素抗动脉粥样硬化的作用机制。方法:RAW264.7细胞和经过25μmol.L-1姜黄素处理的RAW264.7细胞蛋白质经荧光染料Cy3,Cy5标记,与等量Cy2标记的内标混合后在同一胶中进行电泳分离,经不同光激发后扫描得到不同样品的蛋白质组图谱。经DeCyder6.5软件进行差异蛋白质组分析,并对差异蛋白质进行质谱鉴定。结果:ATP合成酶,MHC classⅡ,肌球蛋白轻链,细胞色素b5表达量增加,而磷酸二酯酶4D,elF-3,Hnrpf蛋白,波形蛋白,核仁磷蛋白1,Ran结合蛋白1表达量降低。结论:姜黄素抗动脉粥样硬化作用的机制十分复杂,是其增强细胞抗炎、抗氧化能力以及抑制胆固醇转运,降低细胞内胆固醇积累等因素共同作用的结果。另外,姜黄素可能通过调节细胞的分化及凋亡起到抗肿瘤的作用。 卢德赵 林韬琦 沃兴德 王萍儿 周云 杨贞关键词:姜黄素 动脉粥样硬化 蛋白质组 RAW264.7 温补肾阳药对激素依赖性肾阳虚动物治疗前后肝线粒体蛋白质组影响的研究 正常大鼠、激素依赖性肾阳虚大鼠及温补肾阳药治疗后的肾阳虚大鼠肝线粒体蛋白质样品分别用荧光染料Cy2、Cy3、Cy5标记,经双向电泳后用不同光激发扫描后得到不同样品的蛋白质组图谱,经Decyder软件分析,以肾阳虚组动物与... 沃兴德 卢德赵 施孟如 李毅 唐利华 沃立科关键词:蛋白质组 肾阳虚 温补肾阳药 线粒体 能量代谢 文献传递 肾阳虚证本质的中西医结合研究 被引量:10 2010年 肾阳虚证本质一直是中医研究的重点,近年来,随着老龄化加剧,肾阳虚证的诊治标准成为中西医结合基础研究的热点。通过介绍肾阳虚证的神经内分泌学、细胞分子免疫学、亚细胞学、代谢组学、基因组学、蛋白质组学等相关研究进展。提出应重点将中医学、代谢组学、蛋白质组学、基因组学相结合,从中西医结合角度,整体的、动态的方向进行肾阳虚证本质的研究。 钱洪爽 沃兴德关键词:肾阳虚证 中西医结合 右归丸 肾上腺切除的肾阳虚大鼠肝线粒体蛋白质组的研究 被引量:5 2008年 卢德赵 沃兴德 施孟如 沃立科 唐利华 李毅关键词:肾阳虚 线粒体 蛋白质组 能量代谢 The Effects of Warm and Tonify Kidney-Yang Herbs on the Liver Mitochondria Proteome of the Kidney-Yang dificency in the Rats Two-dimensional difference gel electrophoresis (2-D DIGE) was used to study the difference of liver mitochondr... WO Xing-De, LU De-Zhao, SHI Meng-Ru, LI Yi, TANG Li-Hua (Department of Life Science, Zhejiang College of Traditional Chinese medicine, Hangzhou 310053, china)文献传递 温补肾阳药对丙基硫氧嘧啶引起肾阳虚大鼠肝线粒体蛋白质组的影响 被引量:30 2007年 目的:应用凝胶内差异显示电泳技术研究温补肾阳药对药物性肾阳虚动物肝线粒体蛋白质组的影响。方法:正常大鼠、通过喂饲丙基硫氧嘧啶造成肾阳虚模型大鼠和温补肾阳药治疗大鼠的肝线粒体蛋白质经荧光染料Cy2、Cy3、Cy5标记,等量混合后在同一胶中进行电泳分离,经不同光激发后扫描得到不同样品的蛋白质组图谱。经DeCyder软件进行差异蛋白质组分析,筛选出16个差异蛋白质。经质谱测定及数据库比对,其中10个蛋白质得到鉴定。结果:肾阳虚时氨甲酰磷酸合成酶1、二氢硫辛酰胺支链酰基转移酶、泛醇-细胞色素C还原酶核心蛋白I、异戊酰辅酶A脱氢酶、热休克蛋白60、琥珀酰CoA合成酶、羟氨基辅酶A脱氢酶/酮脂酰辅酶乙酰辅酶A脱氢酶α亚基、鸟氨酸转氨甲酰酶、谷胱甘肽过氧化物酶表达量均增加,而鸟氨酸氨基转移酶表达量降低。应用温补肾阳药治疗后,上述蛋白质的表达量均有不同程度的纠正。结论:喂饲温补肾阳药的肾阳虚模型大鼠糖、脂类和蛋白质代谢均得以改善,可能与温补肾阳药维护线粒体膜稳定性有关。 卢德赵 沃兴德 李毅 唐利华 沃立科 施孟如 杨贞关键词:蛋白质组 肾阳虚 温补肾阳药 线粒体 肾上腺切除的肾阳虚大鼠肝组织蛋白质双向电泳图谱的建立与分析 被引量:19 2005年 目的:建立具有高分辨率和稳定性的大鼠肝组织蛋白质组研究的双向电泳图谱,并对其进行差异蛋白质组分析。方法:正常大鼠和肾上腺切除造成的肾阳虚模型大鼠,肝组织匀浆后提取总蛋白,用Cy3或Cy5标记,每一个Cy3标记样品和一个Cy5标记样品与一个Cy2标记的内标等量混合,上样于同一胶中进行电泳分离,经不同波长单色光激发下扫描得到不同样品的蛋白质组图谱。所获得的图谱用DeCyder软件进行分析。结果:在肾阳虚大鼠肝组织,有8个蛋白质表达水平显著增加,9个蛋白质表达水平显著下降。结论:分析所得的17个差异蛋白质可能与肾阳虚疾病有关。 唐利华 卢德赵 沃兴德 李毅 施孟如关键词:肾阳虚 双向电泳图谱 组织蛋白质组 肾上腺切除 蛋白质组分析 甲状腺切除的肾阳虚大鼠肝线粒体蛋白质组的研究 被引量:21 2008年 目的:应用差异蛋白质组学技术研究肾阳虚大鼠肝线粒体蛋白质组。方法:正常大鼠和甲状腺切除的肾阳虚模型大鼠的肝线粒体蛋白质经荧光染料Cy3、Cy5标记,与等量Cy2标记的内标混合后在同一胶中进行电泳分离,经不同光激发后扫描得到不同样品的蛋白质组图谱。经DeCyder6.5软件进行差异蛋白质组分析,并对差异蛋白质进行质谱鉴定。结果:在肾阳虚大鼠肝线粒体中,氨甲酰磷酸合成酶Ⅰ、乳铁传递蛋白、热休克蛋白60、过氧化氢酶、甲基丙二酸半醛脱氢酶、类钙激活中性蛋白酶、电子传递黄素蛋白、酯酶同工酶ES1、谷胱甘肽过氧化物、ATP合成酶和ATP酶质子通道蛋白表达量均增加,而二氢硫辛酰胺支链酰基转移酶、脂酰辅酶A脱氢酶、鸟氨酸转氨酶和鸟苷酸结合调节蛋白表达量降低。结论:肾阳虚大鼠可能因糖类和脂类物质分解代谢受抑以及细胞内信号转导异常而出现虚寒症状。 卢德赵 沃兴德 沃立科 唐利华 李毅 杨贞关键词:肾阳虚 蛋白质组 线粒体 甲状腺 肾阳虚证研究的现状与思考 被引量:13 2007年 从内分泌功能、免疫功能和能量代谢三个角度对目前肾阳虚证的研究状况作了分析,并提出如何应用基因组和蛋白质组技术进一步探索肾阳虚证的本质。 卢德赵 沃兴德关键词:肾阳虚证 基因组 蛋白质组