国家教育部博士点基金(20100073120090)
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
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- 前列腺素E2通过G蛋白偶联EP1受体对腰椎软骨终板细胞生长的影响
- 2012年
- [目的]检测前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)通过G蛋白偶联前列腺素E受体1(prostaglandin E re-ceptor1,EP1)对腰椎软骨终板细胞生长的影响。[方法]常规方法培养腰椎软骨终板细胞;应用RT-PCR和蛋白免疫印迹技术检测细胞EP基因及蛋白质表达水平。应用MTT实验评估EP1受体选择性激动剂17-P-T-PGE2和EP1受体选择性抑制剂SC 51322对细胞生长增殖的影响。[结果]RT-PCR和Western blotting实验检测结果表明,软骨终板细胞均表达EP1、EP2、EP3和EP4。MTT实验检测显示EP1受体激动剂17-P-T-PGE2可促进软骨终板细胞生长,EP1受体选择性抑制剂SC 51322可抑制PGE2促起的软骨终板细胞生长。[结论]PGE2引起的软骨终板细胞增殖可能与EP1信号转导通路激活相关。
- 赵庆华田纪伟王雷董双海夏天刘诚袆柳超
- 关键词：前列腺素E2信号转导软骨
- C/EBPα基因启动子DNA超甲基化对与PPARγ相关的HDAC1抑制解除作用被引量：2
- 2013年
- [目的]探究C/EBPα在诱导鼠胚胎间充质干细胞C3H10T1/2成骨过程中的调节机制。[方法]体外构建成骨分化模型,在RNA水平和蛋白质水平检测C3H10T1/2细胞成骨分化时转录因子PPARγ(过氧化物酶体增殖物激活受体,peroxisome proliferator-activated receptor,PPAR)的mRNA和蛋白质的表达情况;通过构建干扰转录因子PPARγ表达的siRNA腺病毒载体和PPARγ转录因子的拮抗剂G3335,研究PPARγ对于CCAAT启动子结合蛋白(C/EBPα)表达的作用;染色质免疫共沉淀技术(chromatin immunoprecipitation assay,CHIP)分析PPARγ2位于C/EBPα启动子-1286bp/-1065bp区域内的结合位点,并检测PPARγ表达情况对C/EBPα启动子-1286bp/-1065bp区段DNA甲基化和组蛋白去乙酰化的影响。[结果]C3H10T1/2细胞成骨分化过程中,PPARγ通过结合C/EBPα启动子-1286bp/-1065bp区段激活/促进该基因表达。在成骨作用终末阶段/后期观察到C/EBPα启动子-1286bp/-1065bp区段的DNA发生超甲基化,从而阻抑了PPARγ与之结合,与PPARγ相关的HDAC1抑制得以解除,从而下调了-1286bp/-1065bp区段的组蛋白乙酰化。[结论]本研究通过阐述C/EBPα对PPARγ的增强调控作用,揭示间充质干细胞成骨分化的深层次分子机制;同时通过探讨DNA甲基化和组蛋白去乙酰化通过PPARγ联系的机制,从而为调控间充质干细胞分化提供分子理论模型。
- 张昭亮
- 关键词：成骨作用PPARΓ胚胎学
