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国家自然科学基金(81271152)
国家自然科学基金(81271152)
- 作品数:10 被引量:23H指数:3
- 相关作者:刘宏伟王晓宇金辰怡刘浩安康康更多>>
- 相关机构:同济大学复旦大学同济大学附属同济医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金上海市科学技术委员会科研基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 预培养比格犬干细胞的牙本质片复合牙周膜细胞膜片裸鼠体内移植研究被引量:3
- 2014年
- 目的:探索预培养干细胞的牙本质片复合牙周膜细胞(PDLCs)膜片对牙周组织再生的可行性。方法:将比格犬牙根制成牙本质片,其上接种骨髓基质干细胞(BMSCs)或PDLCs,应用成骨诱导液或α-MEM培养液培养,电镜观察牙本质片表面细胞附着与基质形成情况。并构建细胞/牙片/膜片/煅烧陶瓷牛骨CBB复合体,裸鼠体内皮下移植,8周后取材HE染色观察。结果:预培养干细胞的牙本质片,电镜检测到表面有足够的细胞和细胞外基质分布。裸鼠体内结果显示牙本质片接种BMSCs或PDLCs经成骨诱导组可见类牙骨质基质形成,但无类牙周膜纤维,未经成骨诱导组无类牙骨质基质形成,但有明显的类牙周膜纤维样组织形成;空白组无类牙骨质基质及类牙周膜纤维样组织形成。结论:在牙本质片上预培养BMSCs或PDLCs,复合PDLC膜片和CBB后异位移植,有利于类牙周膜纤维的形成。加入成骨诱导液诱导,有利于基质的形成。
- 卢玉旺刘宏伟王晓宇
- 关键词:牙周膜细胞牙周再生
- 卵泡膜细胞-纤维瘤伴囊变的MR影像学分型及相关因素分析被引量:5
- 2019年
- 目的:卵泡膜细胞-纤维瘤伴囊变是引起误诊的重要原因之一。本研究旨在对囊变位置和形态学进行分型,分析与囊变相关的临床及影像学因素,提高对其非典型表现的认识和诊断。方法:回顾经病理证实的38例卵泡膜细胞-纤维瘤的MR影像特征,重点探讨囊变的分型及其MR信号特点,并对可能影响肿瘤囊变的相关因素进行分析。结果:38例卵泡膜细胞-纤维瘤MRI表现为实性肿块22例(57.89%),实性伴囊变肿块12例(31.58%),囊性肿块4例(10.53%),肿瘤最大径为1.0-21.3cm,均值为(6.65±4.70)cm。实性伴囊变肿块分为瘤外囊变2例(16.67%)及瘤内囊变10例(83.33%);其中周围型4例(33.33%)、弥漫型5例(41.67%),中央型1例(8.33%)。卵泡膜细胞-纤维瘤伴囊变时实性成分T1WI上呈等低信号,T2WI上呈等或稍高信号;囊性成分表现为明显的T2WI高信号;增强后肿瘤实性成分轻度强化(50.0%),囊性成分无强化(42.1%)。肿瘤大小是影响囊变的重要因素(P=0.008),>6cm的肿瘤囊变率为68.8%(11/16),<6cm的肿囊变率为27.3%(6/22)。结论:卵泡膜细胞-纤维瘤囊变率为42.1%(16/38),其中弥漫型囊变最多(41.67%),肿瘤大小是影响囊变的重要因素之一。认识囊变的分型,对提高对本病的认识及诊断和鉴别诊断有重要意义。
- 张思斯王媚媚刘浩李芸菲赵小虎
- 关键词:卵泡膜细胞瘤纤维瘤囊变
- 釉基质蛋白联合骨髓基质细胞膜片促进类牙骨质异位生成的实验研究被引量:1
- 2014年
- 目的:研究釉基质蛋白(enamel matrix proteins,EMPs)诱导犬骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)在裸鼠体内促进类牙骨质异位生成的作用和意义。方法:体外分离培养犬骨髓基质细胞并制备细胞膜片,包裹于牙本质根片上,与煅烧骨块紧密贴合捆绑后,制成牙根片/细胞膜片/煅烧骨复合物,体外模拟根周系统。据牙根片是否事先涂覆釉基质蛋白(EMPs),分为实验组和对照组。将2组的"牙根片/细胞膜片/煅烧骨复合物"分别植入裸鼠背部皮下,8周后取材,进行组织学观察和免疫组化检测。结果:实验组的根片上新生出了不规则类牙骨质样物质,并有矿化基质沉淀,有较强骨桥素(osteopontin,OPN)表达;对照组根片上未见类牙骨质样物质或矿化基质沉淀,OPN表达较弱。结论:釉基质蛋白在体内能诱导骨髓基质细胞向类成牙骨质细胞方向分化,从而促进牙周再生。
- 王晓宇卢玉旺刘宏伟
- 关键词:骨髓基质细胞釉基质蛋白牙周再生裸鼠
- 骨髓间充质干细胞培养液对牙周组织再生的影响被引量:3
- 2018年
- 目的观察大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMMSCs)培养液对牙周组织再生的影响。方法原代培养SD大鼠BMMSCs,取细胞培养液(conditioned media,CM)。采用ELISA检测培养液里与成骨相关的IGF-1、VEGF、PDGF-BB、BMP-2的含量;利用BMMSCs培养液对牙周膜细胞(periodontal ligament cells,PDLCs)进行培养后,RT-PCR法检测PDLCs矿化相关基因核心结合因子2(Runx2)、骨桥素(OPN)、骨钙素(OCN)的变化;Western印迹法检测Runx2、OPN、OCN蛋白的表达变化。将BMMSCs培养液及种子细胞分别制备成凝胶,在大鼠左下第一磨牙颊侧及根分叉处制备牙周缺损,放入制备好的凝胶。分别在术后第4、8周,处死大鼠,取出左侧下颌骨,进行M icro-CT扫描及组织学分析。结果 BM M SCs培养液中含有大量IGF-1和VEGF;RT-PCR和Western印迹法均能检测到牙周膜细胞OPN、OCN、Runx2的表达,且利用BMMSCs培养液培养的PDLCs表达高于常规培养的PDLCs(P<0.05)。8周时,BMMSCs培养液凝胶组相比于对照组生成了更多的牙槽骨(P<0.05)。结论同等条件下,BMMSCs培养液比种子细胞能更好地修复缺失的牙周组织。
- 倪璞刘宏伟
- 关键词:牙周组织再生牙周缺损骨髓间充质干细胞牙周膜细胞培养液
- 两种细胞膜片对牙生物性种植体牙周再生影响的动物实验被引量:5
- 2014年
- 目的 应用牙周膜细胞(periodontal ligament cells,PDLC)膜片、骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSC)膜片与自体牙根体外构建牙生物性种植体,研究构建具有新生牙周组织支持的生物性牙根的可行性.方法 拔除2只比格犬下颌两侧双尖牙制作缺牙区,将比格犬自体牙根预备成近似圆柱状.培养犬第3代PDLC和BMSC成细胞膜片,体外将PDLC和BMSC膜片单独或共同包裹于牙根表面构建自体牙根种植体,将种植体分为4组:①双膜片组(每只犬2颗),将PDLC、BMSC先后包裹于同一牙根表面;②PDLC膜片组(每只犬2颗),将PDLC单膜片包裹于牙根表面;③BMSC膜片组(每只犬2颗),将BMSC单膜片包裹于牙根表面;④无膜片组(空白对照组)(每只犬1颗),无膜片牙根.制作缺牙区手术8周后,将种植体植入自体缺牙区牙槽嵴,12周时取材制作石蜡切片行HE和Masson三色染色,观察各组切片的组织学结果.结果 PDLC膜片组种植体根面可见包括牙骨质、牙周膜及牙槽骨的牙周组织样结构,其中可见类似牙周穿通纤维样组织垂直插入根面及骨面;双膜片组种植体和BMSC膜片组种植体根面多为骨性结合;空白对照组亦未见牙周组织样结构形成.结论 PDLC膜片能促进牙生物性种植体的牙周再生,可部分再生出包括牙骨质、牙周膜和牙槽骨的复杂牙周组织.
- 孙传明刘宏伟
- 关键词:牙种植体牙周膜细胞
- 犬不同部位BMSCs对牙周膜细胞增殖和成骨分化的影响
- 2015年
- 目的:研究犬髂骨骨髓基质细胞(iliac bone marrow stromal cells,I-BMSCs)和犬颌骨骨髓基质细胞(maxilla bone marrow stromal cells,M-BMSCs)对犬牙周膜细胞(periodontal ligament cells,PDLCs)增殖和成骨分化的影响,了解不同部位来源的骨髓基质细胞对牙周膜细胞调控作用的差异性。方法:原代培养犬髂骨骨髓基质细胞、颌骨骨髓基质细胞和牙周膜细胞。分别建立犬髂骨和颌骨来源的骨髓基质细胞与牙周膜细胞的Transwell共培养体系;制备骨髓基质细胞条件培养液培养牙周膜细胞,MTT法检测牙周膜细胞生长曲线;利用实时荧光定量PCR法检测牙周膜细胞成骨相关基因核心结合因子2(Runx2)、碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(OCN)的变化;Westernblot法检测牙周膜细胞Runx2和OCN蛋白的表达变化。结果:髂骨骨髓基质细胞条件培养液能促进牙周膜细胞的增殖;颌骨骨髓基质细胞条件培养液对牙周膜细胞增殖有抑制作用;QPCR检测到共培养组牙周膜细胞Runx2、OCN、ALP基因表达高于对照组,Westernblot检测到共培养组牙周膜细胞的Runx2和OCN的蛋白表达高于对照组,且颌骨骨髓基质细胞诱导牙周膜细胞成骨分化效果更显著。结论:犬颌骨骨髓基质细胞条件培养液可能会抑制牙周膜细胞的增殖,相较于髂骨骨髓基质细胞,颌骨骨髓基质细胞促进牙周膜细胞成骨分化效果更显著,颌骨骨髓基质细胞和牙周膜细胞共同作为种子细胞可能更有利于牙周组织再生。
- 冯源金振宇刘宏伟
- 关键词:牙周膜细胞
- 负压与BMSCs膜片促进细胞定植和体内成骨的探讨
- 2013年
- 目的:研究经过负压处理的TCP支架材料与细胞复合后的体内成骨能力。方法:将TCP支架材料负压处理,和骨髓基质细胞(BMSCs)细胞共培养一段时间后,成骨诱导2周,电镜下观察支架材料和细胞复合情况。再将该复合物与BMSCS细胞膜片复合,植入到裸鼠皮下,8周后作组织切片,HE染色和Masson染色,观察其体内成骨能力。结果:负压(有细胞)+膜片组异位移植8周后,内部可见大量胶原纤维和成骨纤维,在团块样组织内部可见大量成骨细胞,并有血管形成。对照组仅有个别细胞密集区,胶原纤维和成骨纤维较少。空白组未见类似情况。结论:经过负压+骨髓基质细胞膜片处理的TCP支架材料,在体内有成骨潜能。
- 温鑫鑫周鹂鹂刘宏伟
- 关键词:骨再生骨髓基质细胞负压
- 骨髓间充质干细胞和牙周膜干细胞膜片体内活性的动物实验被引量:5
- 2014年
- 目的 研究犬骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMMSC)膜片和牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSC)膜片移植于裸鼠体内后BMMSC/PDLSC细胞活性的变化.方法 原代培养犬BMMSC和PDLSC,使用慢病毒分别转染绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)基因和红色荧光蛋白(red fluorescent protein,RFP)基因;对GFP-BMMSC和RFP-PDLSC经流式细胞术进行免疫表型鉴定,并进行成骨和成脂诱导分化鉴定;制备两种细胞的细胞膜片,经Bio-Gide胶原膜包裹并移植于裸鼠背部皮下,应用小动物活体荧光成像技术对比分析移植后第1、2、4、8周两种细胞膜片内细胞的GFP和RFP表达情况,并经组织学方法确认.结果 GFP标记的犬BMMSC和RFP标记的犬PDLSC表面抗原CD29和CD44均为阳性,CD34表达较低;两种细胞诱导后均能进行成骨和成脂分化;两种细胞制备成膜片并移植于裸鼠体内后,小动物活体荧光成像显示GFP-BMMSC在移植术后第1、2、4、8周平均光强依次减弱,分别为(83.1±3.1)×10^6、(65.1±2.3)×10^6、(51.5±2.3)×10^6及(33.8±2.0)×10^6 ph/s;RFP-PDLSC在移植术后第1、2、4周平均光强也依次减弱,分别为(53.8±3.0)×10^6、(42.2±2.6)×10^6、(34.5±2.1)×10^6 ph/s,第8周平均光强[(45.1±2.9)×10^6 ph/s]与第4周相比显著增强(P<0.01).组织切片及免疫组化检测发现移植后膜片中RFP-PDLSC的数量明显多于GFP-BMMSC.结论 经慢病毒转染荧光蛋白基因后的犬GFP-BMMSC和RFP-PDLSC具有相似的干细胞生物学特性,但PDLSC更耐受细胞膜片制备过程中的高密度培养微环境,与BMMSC相比细胞膜片技术更适用于PDLSC.
- 安康康刘宏伟
- 关键词:间质干细胞牙周膜
- 大鼠颌骨与胫骨骨髓基质细胞间接共培养后生物学差异的比较
- 2016年
- 目的 SD大鼠颌骨骨髓基质细胞(M-BMSCs)与胫骨骨髓基质细胞(T-BMSCs)体外间接共培养后,检测两者生物学特性和相关基因表达的变化。方法应用全骨髓贴壁法,分离和培养M-BMSCs和T-BMSCs。取第三代细胞用Transwell小室间接共培养后,做以下检测。1MTT检测细胞增殖能力差异;2ALP活性、ALP染色、免疫荧光染色检测细胞成骨活性的差异;3荧光定量PCR检测Wnt1、Wnt5a、Hoxa11、Runx2、Ocn、Col I的表达差异和成骨诱导后的表达变化。结果 1全骨髓贴壁法能分离和培养M-BMSCs和T-BMSCs;2间接共培养后,M-BMSCs和T-BMSCs增殖活力减弱;3共培养条件提高了T-BMSCs和抑制M-BMSCs早期表达ALP的能力;4间接共培养后,M-BMSCs和TBMSCs中Wnt1、Wnt5a、Hoxa11、Runx2、Ocn、Col I基因表达出现变化。结论 M-BMSCs和T-BMSCs间接共培养后,两者的生物学特点的改变和相关基因表达改变。
- 金辰怡刘宏伟
- 关键词:WNT1WNT5AHOXA11
- 大鼠颌骨与胫骨骨髓基质细胞生物学特性和基因表达差异的比较被引量:3
- 2016年
- 目的 :比较大鼠颌骨来源骨髓基质细胞(M-BMSCs)与胫骨来源骨髓基质细胞(T-BMSCs)生物学特性的差异。方法:体外通过全骨髓贴壁法,分离和培养SD大鼠M-BMSCs和T-BMSCs,取第3代细胞用于:1流式细胞检测鉴定表面标志;2MTT、细胞周期、克隆形成率检测细胞增殖能力差异;3成骨、成脂诱导及染色检测细胞多项分化潜能;4碱性磷酸酶(ALP)活性、染色、免疫荧光染色检测细胞成骨活性的差异;5荧光定量PCR检测Wnt1、Wnt5a、Hoxa11、Runx2、Ocn、Col I的表达差异和成骨诱导后各基因的表达变化。结果:1 M-BMSCs和T-BMSCs阳性表达CD29、CD44,阴性表达CD45;2MTT、细胞周期检测、克隆形成率显示T-BMSCs细胞增殖能力较高;3M-BMSCs在成骨诱导后矿化能力更强;而T-BMSCs成脂诱导形成脂滴的能力更强;4M-BMSCs表达ALP的水平更高;5荧光定量PCR示2种细胞的Wnt1、Wnt5a、Hoxa11、Runx2、Ocn、ColⅠ表达存在差异。结论:体外培养的M-BMSCs和TBMSCs有着不同的生物学特点,其相关基因Wnt1、Wnt5a、Hoxa11、Runx2、Ocn、ColⅠ的表达上存在差异。
- 金辰怡刘宏伟
- 关键词:WNT1WNT5AHOXA11