国家科技支撑计划(2011BAI07B07) 作品数:28 被引量:330 H指数:11 相关作者: 高建平 陈贵林 段园园 王东 郭琼琼 更多>> 相关机构: 山西医科大学 内蒙古大学 北京中医药大学 更多>> 发文基金: 国家科技支撑计划 国家自然科学基金 内蒙古自治区科技创新引导奖励资金项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 轻工技术与工程 更多>>
党参CpGAPDH基因的克隆及表达分析 被引量:6 2018年 甘油醛-3-磷酸脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)基因为糖代谢过程中关键酶基因及常用内参基因。该研究以党参Codonopsispilosula转录组数据库为基础,以马铃薯GAPDH基因为参照,同源克隆得到党参甜肋日基因,命名为印GAPDH,基因开放阅读框(ORF)全长1014bp,编码337个氨基酸。生物信息学分析表明,CpGAPDH与其他物种GAPDH具有高度相似性,与马铃薯、丹参GAPDH亲缘关系较近,无信号肽,预测其定位于细胞质,且具多个磷酸化位点,结合保守结构域预测分析,该蛋白属于四聚体NAD结合酶超家族。原核表达分析发现重组工程菌可诱导表达出接近44.3kDa的蛋白质,与理论相对分子质量基本相符。qRT-PCR分析显示印GAPDH基因在不同组织及不同发育时期根系中相对表达量差异不显著,稳定性分析显示该基因表达较稳定,由此克隆得到了1个新的党参候选内参基因,为党参多糖合成相关基因的表达分析奠定了基础。 王晓林 吉姣姣 高建平关键词:党参 基因克隆 生物信息学 锁阳ISSR-PCR反应体系的优化研究 被引量:6 2012年 通过单因素试验、正交试验的方法,对影响锁阳ISSR-PCR反应体系的7种主要因素在3个水平上进行优化筛选,得到锁阳ISSR-PCR反应的最佳体系:25μL反应体系中含有0.2 mmol/L dNTP、1.5 mmol/L Mg2+、10μmol/L引物、50 ng模板DNA、2.0 UTaq酶、1%去离子甲酰胺和2.5μg/μL牛血清白蛋白。相应引物的最佳退火温度为48.9℃。这一体系的建立为今后利用ISSR-PCR标记技术研究锁阳的遗传多样性奠定了基础。同时对ISSR-PCR体系中添加剂的作用进行了探讨,为添加剂在其他植物ISSR-PCR反应中的应用提供借鉴。 李伟 刘广达 陈青 呼思勒 陈贵林关键词:锁阳 正交设计 ISSR 锁阳中粗多酚和粗多糖抗氧化活性的比较 被引量:8 2012年 目的:比较锁阳粗多酚和粗多糖的抗氧化活性,为锁阳入药提供依据。方法:100g锁阳粉末提取粗多酚和粗多糖。采用超声波辅助乙醇法提取粗多酚,依次用石油醚、三氯甲烷、醋酸乙酯和正丁醇进行萃取。同时用水提醇沉法提取粗多糖。用DPPH·法和ABTS+法进行锁阳粗多酚和粗多糖的抗氧化活性检测。结果:多酚粗提物中的总酚含量达到了922.9mgGAE·g-1(没食子酸当量),而多糖粗提物中的多糖含量为366.6mg·g-1(葡萄糖当量)。DPPH·法检测锁阳粗多酚和粗多糖的IC50值分别为79.3μg·mL-1和145.6μg·mL-1。经ABTS+法检测,二者的TEAC值分别为2.12mmol·g-1和0.69mmol·g-1。结论:锁阳粗多酚的抗氧化活性远高于锁阳粗多糖。 段园园 马耀 陈贵林关键词:锁阳 多酚 多糖 党参多糖体内抗肿瘤活性研究及急性毒性实验 被引量:22 2012年 目的:党参多糖体内抗肿瘤活性实验的初步研究。方法:对腹腔荷S180腹水瘤细胞小鼠灌胃党参多糖1 g/kg.d-1,连续7天后记录小鼠的生存天数。结果:与对照组相比,荷S180腹水瘤细胞小鼠的生命延长率为34.29%。结论:党参多糖可以延长腹腔荷S180腹水瘤细胞小鼠的存活时间。 冯浩丽 高建平关键词:党参多糖 体内抗肿瘤 急性毒性实验 党参药材及其混伪品的ITS/ITS2条形码鉴定研究 被引量:24 2013年 为简便有效地鉴定党参药材及其混伪品并验证ITS/ITS2序列作为DNA条形码鉴定药材的稳定性和准确性,本研究选用党参药材及其混伪品作为研究对象,对33份药材样本提取基因组DNA,通过PCR扩增ITS序列,采用比对法、最小距离法对序列鉴定能力进行评估。通过序列比对,分析变异位点信息确定不同的单倍型并计算种内和种间K2P距离。ITS2序列采用基于隐马尔可夫模型的HMMer(Hidden Markov Model)注释方法获得。结果表明,党参药材3个基原物种ITS序列长度为654-655 bp,ITS2序列长度均为239 bp,ITS/ITS2序列种内平均K2P遗传距离均远小于其与混伪品的种间平均K2P遗传距离,因此ITS/ITS2序列作为DNA条形码能稳定、准确鉴别党参药材及其混伪品,为其鉴定提供新的技术手段。 赵莎 辛天怡 侯典云 庞晓慧 程睿旸 高建平关键词:党参 ITS ITS2 分子鉴定 条形码 不同来源龙齿药材中4种重金属含量的分析 被引量:6 2015年 目的:测定不同来源龙齿药材中铅(Pb)、镉(Cd)、汞(Hg)、砷(As)4种重金属的含量。方法:对龙齿样品进行湿法消解后,采用石墨炉原子吸收光谱法(GFAAS)测定龙齿样品中Pb、Cd、As含量,以1%磷酸二氢铵+0.06%硝酸镁作为基体改性剂,Pb、Cd、As的测定波长分别为283.3、228.8、193.7 nm,灯电流分别为10、8、130 m A,狭缝均为0.7 nm。以硼氢化钠作为还原剂的冷蒸气原子吸收光谱法(CVAAS)测定Hg含量,测定波长253.7 nm,灯电流140 m A,狭缝0.7 nm,延迟时间5 s。结果:Pb、Cd、Hg、As元素测定方法线性关系分别为Y=0.001 9X+0.008 8(r=0.999 0)、Y=0.025 3X+0.014 6(r=0.998 5)、Y=0.012 8X+0.001 6(r=0.999 7)、Y=13.01X+0.813 2(r=0.999 4),RSD均小于3%,回收率为90.7%~112.7%;含量测定结果分别为0.58~6.27、0.04~2.89、0.26~1.16、0.09~0.88 mg·kg-1。结论:不同来源的龙齿药材中4种重金属含量不同,其中Pb含量是4种重金属中最高的。经方法学验证,本法为制定龙齿重金属限度质量标准提供了参考。 李肖肖 郭琼琼 李云兰 高建平关键词:原子吸收光谱法 金银花SSR指纹图谱的构建及遗传多样性分析 被引量:11 2015年 以金银花及其常见变种为材料,利用SSR标记技术构建分子指纹图谱,并用于遗传多样性分析。选择25个SSR位点用于多态性分析,其中3个位点具有较强多态性,并构建基于Excel格式的金银花SSR指纹图谱,包括3对引物在6个供试材料中扩增到的18条多态性条带信息。应用该指纹图谱对金银花及其变种的遗传多样性进行分析,结果表明,金银花与山银花之间遗传距离较远,仅0.28。应用该指纹图谱对87个市售金银花进行分析,能够区分出河北、山东、河南等地的金银花品种。SSR标记技术具有快速、稳定的优点,具备金银花种质资源标准化分析及中药材市场化检测应用的价值。 徐石勇 李欧静 张舒玮 邓慧 刘征辉 王永 兰青阔关键词:金银花 SSR标记 指纹图谱 脱落酸对锁阳茎切口愈合及抗氧化酶活性的影响 被引量:5 2012年 为了探讨脱落酸(ABA)对锁阳茎切口愈合及抗氧化酶活性的影响,测定了锁阳茎3个部位(上部、中部和下部)内源ABA含量和切口愈合能力(抗失水力)以及苯丙氨酸解氨酶(PAL)、过氧化物酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)及抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性随切口愈合时间的变化。结果表明,内源ABA含量随切口愈合天数的增加整体呈上升趋势。外源ABA处理明显增强了锁阳茎3个部位的PAL活性及抗氧化酶活性,加速了锁阳茎切口愈合,减少失水也提高了其抗氧化能力。比较3个部位,各指标均呈现出上部高于中部,中部高于下部的趋势。 段园园 岳鑫 陈贵林关键词:锁阳 切口愈合 抗氧化酶 药用寄生植物锁阳与无患子目植物水平基因转移现象研究 <正>水平基因转移现象是指不经过有性生殖过程而实现基因转移的现象。高等植物之间的水平基因转移现象是近年来才被发现并受到广泛关注。植物之间的寄生过程是高等植物水平基因转移的一条重要途径。锁阳属有2个种,锁阳(Cynomor... 刘广达 苏小娟 陈贵林关键词:锁阳 白刺 水平基因转移 寄生 无患子目 文献传递 绒毛诃子果实多酚类化学成分及抗氧化活性研究 被引量:9 2013年 目的:研究绒毛诃子果实中多酚类化学成分及其抗氧化活性。方法:采用Toyopearl HW-40和MCI gel CHP-20P柱分离并结合制备型高效液相色谱,对诃子70%丙酮提取部分进行分离纯化,利用MS、1H-NMR和13CNMR进行结构鉴定;以紫外分光光度法测定诃子多酚类对DPPH·和ABTS+·的清除率。结果:从诃子果实中分离鉴定了9个化合物,分别鉴定为:诃黎勒酸(1)、诃子酸(2)、1,3,4,6-四-O-没食子酰-β-D-葡萄糖苷(3)、1,3,6-三-O-没食子酰-β-D-葡萄糖苷(4)、没食子酸(5)、诃子素(6)、1,2,3,4,6-五-O-没食子酰-β-D-葡萄糖苷(7)、新诃黎勒鞣花酸甲酯(8)、新诃黎勒鞣花酸酯(9)。其中4、8为首次从诃子中分离得到。抗氧化实验中,化合物4的TEAC值为(3.912±0.21)mmol·g-1,抗氧化活性最强,与其他单体化合物比较,差异具有统计学意义(P<0.01),化合物3、5和6的TEAC值与对照品维生素C接近,有较强的抗氧化活性,与对照组比较差异没有统计学意义,但是与其他化合物比较差异具有统计学意义(P<0.01),化合物8的抗氧化活性最低。 齐敬浩 文先 陈贵林 波多野力关键词:鞣质 NMR 抗氧化