国家自然科学基金(31172349)
- 作品数:1 被引量:0H指数:0
- 相关作者:周顺毕可东刘永刚崔尚金刘朝霞更多>>
- 相关机构:中国农业科学院哈尔滨兽医研究所青岛农业大学更多>>
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- 相关领域:生物学更多>>
- 猪细小病毒BQ-C毒株VP2基因的鉴定及表达
- 2013年
- 本研究从临床发病猪采集病料,以PK15传代细胞进行病毒分离,通过PCR、血液凝集试验(HA)和电镜鉴定为1株猪细小病毒(porcine parvovirus,PPV),命名为BQ-C。对分离的毒株进行测序,结果显示该毒株与GenBank登录的PPV BQ株同源性为100%。为获得该毒株结构蛋白VP2基因的表达产物,将VP2基因片段插入到原核表达载体pET-30a(+),得到表达重组质粒。经双酶切和测序鉴定,将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达。SDS-PAGE结果表明,获得的重组蛋白分子质量约为71.5ku,与预期大小相符。Western blotting结果显示获得的重组蛋白能与PPV阳性血清特异性结合,表明重组蛋白具有良好的反应原性。结果表明,本研究成功分离了1株PPV BQ-C株,且表达的VP2重组蛋白可用于PPV血清学诊断和疫苗的研发。
- 刘朝霞刘永刚毕可东周顺崔尚金
- 关键词:猪细小病毒原核表达反应原性