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Ropporin基因在人精子中的表达和意义: 2009年; 目的检测ropporin基因在人精子中的表达。探讨Ropporin抗体对人精子运动的影响,评价Ropporin蛋白在精子运动中的功能。方法收集正常男性精子,非连续梯度离心法分离精子,用RT-PCR、免疫印迹和免疫荧光方法检测ropporin基因在精子中的表达和蛋白定位;将纯化精子分别在含不同浓度Ropporin抗体的培养液中孵育(0,0.8,4和20μg/mL),在不同时间点(1,2,6h)用精子计算机辅助分析系统(computer-assisted sperm analysis,CASA)检测精子活动力。结果RT-PCR、免疫印迹和免疫荧光方法均检测出ropporin基因在精子中表达;免疫荧光表明Ropporin主要定位在精子鞭毛的主段和末段;抗体实验显示抗体孵育1h、2h、6h后精子的快速前向运动(a级)和慢速前向运动(b级)均明显受到抑制,并显示剂量依赖性。结论Ropporin在精子鞭毛的主段和末段上的表达与精子的运动密切相关。; 陈静王勇来永庆李慧颜秋霞桂耀庭蔡志明; 关键词：基因表达精子能动性

电压依赖性阴离子通道基因在人精子中的表达及其临床意义被引量：1: 2009年; 目的:筛选与精子活力相关的基因。方法:将活力正常者与弱精子症者精子cDNA与Affymetrix全基因组芯片进行杂交,筛选出差异表达基因。RT-PCR分析该基因在人体不同组织及精子中的表达,并比较该基因在活力正常和活力低下的人精子中表达的差异。结果:芯片结果分析筛选出差异表达基因:电压依赖性阴离子通道(VDACs)基因。VDACs包括VDAC1、VDAC2、VDAC33个亚型,它们均在人精子中表达。与活力正常组精子VDAC2相对表达量(0.803±0.043)比较,VDAC2在弱精子症组精子的相对表达量(0.568±0.036)显著降低(P<0.01)。结论:VDAC2的表达减少可能与精子中活力降低有关。; 许祥王勇余州陈静郭萌桂耀庭蔡志明; 关键词：基因芯片弱精子症电压依赖性阴离子通道逆转录-多聚酶链反应

外周致密纤维1在人精子中的表达差异及其意义被引量：9: 2009年; 目的:比较外周致密纤维1(ODF1)在健康男性和弱精子症患者精子中的表达差异。方法:根据WHO标准,收集正常男性和弱精子症患者的精液标本各20份,Percoll非连续梯度离心法分离精子,收集95%Percoll以下和57%与76%Percoll层之间的精子,以排除生精细胞和白细胞的污染;采用逆转录-多聚酶链式反应(RT-PCR)和Western印迹方法,从mRNA和蛋白水平检测ODF1的表达。结果:RT-PCR结果表明,与正常男性组相比,ODF1在弱精子症患者精子中的mRNA表达水平显著降低(2.79±0.28vs1.35±0.25,P<0.05);免疫印迹与RT-PCR结果一致,与正常男性组相比,弱精子症患者精子中的ODF1蛋白的表达亦显著降低(3.64±0.34vs1.44±0.26,P<0.05)。结论:ODF1在弱精子症患者精子中的表达显著降低,提示其可能与精子活动力低下有关。; 陈静王勇许祥余州桂耀庭蔡志明; 关键词：精子活动率弱精子症基因表达

Ropporin在正常男性和弱精子症患者精液精子中的表达差异被引量：2: 2009年; 目的比较Ropporin在健康男性和弱精子症患者精液精子中的表达差异。方法收集健康男性和弱精子症患者的精液精子,为了排除生精细胞和白细胞的污染,精液标本经非连续性Percoll梯度离心和分离纯化。采用荧光定量RT-PCR和免疫细胞化学方法,从基因和蛋白水平检测精子Ropporin的表达。结果荧光定量RT-PCR显示,Ropporin mRNA在正常男性和弱精子症患者精液精子中均有表达。与正常男性相比, Ropporin在弱精子症患者精子中的表达显著降低。免疫细胞化学结果显示,Ropporin蛋白在正常男性精子的表达水平明显高于弱精子症患者,该结果与荧光定量RT-PCR结果相一致。结论Ropporin在弱精子症患者精子中的表达显著降低,可能是导致精子运动能力低下的原因之一。; 王勇陈静许祥余州桂耀庭; 关键词：弱精子症荧光定量RT-PCR 免疫组织化学

精子相关抗原SPAG9在人精液精子中的表达及定位被引量：5: 2009年; 目的:SPAG9作为MAPK家族中的成员,在精卵融合过程中发挥着重要的作用。本研究检测SPAG9在人精液精子中的表达情况。方法:取人不同组织(肌肉、肝、食管、肺、胃、肾、前列腺、子宫、睾丸、附睾)标本及健康男性的精液精子,为了排除圆形细胞的污染,精液标本经非连续性Percoll梯度离心、分离纯化;采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)和间接免疫荧光方法,从mRNA和蛋白水平检测SPAG9在精子中的表达。结果:RT-PCR结果显示,SPAG9mRNA不仅在各种不同的组织中有表达,而且在人精液精子中也有表达;间接免疫荧光结果显示,SPAG9蛋白主要定位于人精液精子头部的赤道板和精子尾部鞭毛上。结论:SPAG9在人精液精子中有表达,可能在精子获能和运动中有一定作用。; 王勇陈静余州许祥桂耀庭; 关键词：精子逆转录-聚合酶链式反应间接免疫荧光

Ropporin基因在人睾丸和精子中的鉴定与蛋白定位: 2009年; 目的:对人睾丸和精子中的Ropporin基因表达进行鉴定和蛋白定位,为进一步研究其在精子中的作用奠定基础。方法:应用免疫组织化学Western blotting和RT-PCR及间接免疫荧光方法检测Ropporin在正常人睾丸组织射出精子中的表达特征。结果:在睾丸组织中,Ropporin主要表达在圆形精子细胞阶段;在精液精子中,mRNA和蛋白水平上均检测出Ropporin的表达,且蛋白主要定位在精子鞭毛的主段和末段上。结论:人睾丸圆形精子细胞和精液精子中均有Ropporin mRNA和蛋白的表达,其可能与精子运动有关。; 陈静王勇孙亮来永庆桂耀庭蔡志明; 关键词：睾丸精子运动基因表达

精子蛋白Ropporin的研究进展: 2009年; Ropporin一直以来被认为是精子细胞特异性蛋白,在睾丸组织中特异性表达,并参与精子的运动、获能、顶体反应等生理活动。然而,新的研究表明Ropporin在正常的非睾丸组织也有微弱表达,而且作为一种新的肿瘤睾丸抗原(CT抗原)在恶性血液病的肿瘤细胞中高表达。Ropporin在哺乳动物中的表达具有高度保守性,说明它对生命的重要性。本文就Ropporin的特性、表达与分布、生理学功能及临床研究的新进展进行了综述。; 陈静蔡志明桂耀庭; 关键词：精子蛋白肿瘤睾丸抗原

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广东省科技计划工业攻关项目(2007B060401061)