国家自然科学基金(30871075)
- 作品数：5 被引量：7H指数：2
- 相关作者：殷跃辉周亚南龙毅李瑛范晋奇更多>>
- 相关机构：重庆医科大学附属第二医院重庆医科大学附属永川医院重庆医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市卫生局科研项目国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 血管紧张素Ⅱ及替米沙坦对大鼠心房肌细胞钾和钙电流的影响
- 2011年
- 目的研究血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)和替米沙坦对SD大鼠心房肌细胞瞬时外向钾电流(Ito)和L型钙电流(ICa-L)的作用。方法急性酶解法分离SD大鼠心房肌细胞,采用全细胞膜片钳技术,观察AngⅡ、替米沙坦以及AngⅡ联合替米沙坦对大鼠心房肌细胞Ito和ICa-L的影响。结果 AngⅡ(0.1μmol/L)和替米沙坦(0.01μmol/L)以及两药联合均能抑制大鼠心房肌细胞Ito,AngⅡ组、替米沙坦组、联合组干预前后Ito的电流密度值比较差异有统计学意义[(22.48±2.75)vs(15.71±2.06)pA/pF,(24.16±2.36)vs(16.15±1.82)pA/pF,(24.41±2.27)vs(21.35±1.46)pA/pF,P<0.05]。AngⅡ(0.1μmol/L)能显著增强大鼠心房肌细胞ICa-L的峰值电流密度[(-4.51±0.38)vs(-5.16±0.29)pA/pF,P<0.01];替米沙坦(0.01μmol/L)对心房肌细胞ICa-L无明显作用[(-4.35±0.27)vs(-4.29±0.34)pA/pF,P>0.05],但联合组中替米沙坦可拮抗AngⅡ对ICa-L的增强效应[(-4.08±0.28)vs(-4.20±0.31)pA/pF,P>0.05]。结论 AngⅡ和替米沙坦对大鼠心房肌细胞具有直接的电生理作用,替米沙坦在受体水平上存在对AngⅡ的拮抗效应。
- 龙毅王娇周亚南修芸殷跃辉
- 关键词：抗心律失常药钾通道心肌膜片钳技术L型钙电流
- 经犬心房外膜涂布实现外源基因在心房肌(细胞)的高效转染
- 2011年
- 心房肌高效的基因转染是一项技术难题.心房血供少、心房壁薄等原因限制了心房肌基因转染方法的发展.但心肌基因治疗作为一种研究和治疗心脏疾病的有效方法而逐渐被学者重视.本研究探讨一种经心房外膜涂抹使携带有绿色荧光蛋白(EGFP)基因的腺病毒高效靶向转染心房肌细胞方法的可行性.经犬胸骨正中开胸术,将含有一定浓度携带EGFP基因的腺病毒、胰蛋白酶和poloxamer F407的混合溶液涂抹至右心房外膜.术后经荧光显微镜观察荧光强度和实时PCR检测EGFP mRNA表达水平.EGFP荧光强度和mRNA表达水平在第1～6周呈现先增高后减低的趋势,其高峰在第3周出现;第3周右心房前壁各层心肌细胞均有EGFP表达;右心耳EGFP mRNA表达水平高于右心房前壁,右心房前壁和后壁表达水平无明显差异;房间隔的表达水平低于右心房,但明显高于左心房;心室和其它脏器如肺脏、肝脏、脾脏、骨骼肌、胃壁及小肠壁等的表达水平远低于右心房;通过HE染色及Masson's染色,第3周心肌无明显炎症反应和纤维化改变.因此,经心房外膜涂抹的方法使基因靶向转染心肌细胞具有较好的高效性、靶向性和安全性.
- 崔坤范晋奇考国营凌智瑜殷跃辉苏立
- 关键词：心房基因转染靶向性
- 急性分离大鼠心房肌细胞方法的改进及对钾、钠、钙电流的记录被引量：2
- 2011年
- 目的:介绍1种改进的成年SD大鼠心房肌细胞分离方法。方法:SD大鼠麻醉后,快速取出心脏,将主动脉结扎在Langendorff灌流装置上,无钙台式液灌流5 min后换用酶液灌流10～12 min,剪取心耳组织于KB液中剪碎并吹打,200目细胞筛网过滤,将细胞滤液500 r离心2 min,梯度复钙后将细胞悬液置于4℃冰箱中静置1 h,应用全细胞膜片钳技术记录大鼠心房肌细胞瞬时外向钾电流(Ito)、快钠电流(INa)以及L型钙电流(ICa-L)。结果:本方法分离出的心房肌细胞存活率高,结构完整,具有良好的耐钙性,可成功记录出Ito、INa、ICa-L。结论:改进的实验方法可获得大量耐钙心肌细胞,并具有正常的电生理特性。
- 龙毅周亚南殷跃辉
- 关键词：膜片钳瞬时外向钾电流钠电流L型钙电流
- rs2200733和rs251253多态性与心房颤动的关联性研究被引量：5
- 2012年
- 目的:探讨rs2200733和rs251253多态性与心房颤动(Atrial fibrillation,AF)简称房颤,发生的关联性。方法:根据入选标准,选择房颤患者100例(房颤组)和非房颤患者107例(对照组)进行rs2200733和rs251253单核苷酸多态性和房颤的关联研究。所有患者均采集外周血提取基因组DNA,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术检测患者rs2200733和rs251253多态性的基因型和等位基因分布。结果:rs2200733位点在病例组中存在多态性,分别为TT、CT和CC型,其基因型频率在AF组和对照组分别依次为21.0%、65.0%、14.0%和29.0%、46.7%、24.3%。基因型分布在房颤组和对照组间有显著差异(P=0.027),CT基因型频率在AF组明显高于对照组(P=0.032)。C等位基因频率和T等位基因频率在两组间的分布无显著差异(P>0.05)。rs251253位点GG、AG和AA的基因型频率在AF组和对照组分别依次为70.0%、28.0%、2.0%和70.1%、25.2%、4.7%,基因型分布、G等位基因频率和A等位基因频率在房颤组和对照组间均无显著差异(P>0.05)。结论:rs2200733位点多态性与房颤发生存在相关性,CT基因型可能是房颤患者的一个遗传易感因素。
- 李瑛李芝峰王亚珠范晋奇徐燕萍陈伟杰殷跃辉
- 关键词：心房颤动单核苷酸多态性
- 替米沙坦对“两肾一夹”大鼠心房肌瞬时外向钾通道和L型钙通道表达的影响
- 2012年
- 目的:本实验研究替米沙坦对"两肾一夹"(Two kidney one clip,2K1C)SD大鼠心房肌细胞瞬时外向钾通道Ito和L型钙通道ICa-Lα亚基编码基因(Kcnd2和Cacna1c)的mRNA和蛋白(Kv4.2和Cav1.2)变化的影响。方法:雄性SD大鼠39只,分成4组:对照组、2K1C+替米沙坦低剂量组[5 mg/(kg.d)]、2K1C+替米沙坦高剂量组[10 mg/(kg.d)]和2K1C组。用药4周后采用反转录聚合酶链反应及免疫印记反应(Western blot)方法分别测定Kcnd2、Cacna1c的mRNA及蛋白水平并对结果进行半定量分析。结果:2K1C组Kcnd2的mRNA及蛋白水平低于对照组(0.23±0.02 vs.1.0±0.12,0.34±0.11 vs.0.78±0.13,P<0.01),Cacna1c高于对照组(1.54±0.17 vs.1.0±0.13,1.58±0.09 vs.0.92±0.05,P<0.01);替米沙坦5、10 mg组Kcnd2的mRNA及蛋白水平均高于2K1C组(0.32±0.01,0.53±0.11 vs.0.23±0.02;0.54±0.07,0.72±0.08 vs.0.34±0.11,P<0.01),Cacna1c低于2K1C组(1.21±0.18,1.02±0.14 vs.1.54±0.17;1.21±0.06,0.98±0.07 vs.1.58±0.09,P<0.01)。结论:替米沙坦通过调节Kcnd2和Cac-na1c的mRNA和蛋白水平来发挥其抗心律失常作用。
- 周亚南龙毅李瑛殷跃辉
- 关键词：两肾一夹替米沙坦L型钙通道心房肌细胞
