贵州博康生物工程有限公司
- 作品数:37 被引量:9H指数:3
- 相关机构:贵州医科大学贵州省疾病预防控制中心毕节市第一人民医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家科技支撑计划贵州省科学技术基金更多>>
- 相关领域:轻工技术与工程生物学医药卫生经济管理更多>>
- 家蝇核糖体蛋白S18基因的克隆及表达模式研究被引量:5
- 2016年
- 旨为证实核糖体蛋白S18(Ribosomal protein S18,RPS18)基因在家蝇体内的表达稳定性。从构建家蝇幼虫c DNA文库中筛选到核糖体蛋白S18基因,以c DNA为模板,通过PCR扩增,获得RPS18基因完整编码序列(登录号:KT006855),运用生物信息学方法对该基因及其编码蛋白进行预测和分析。构建p ET28a/RPS18重组质粒,转化到大肠杆菌Transetta(DE3)中进行诱导表达及蛋白纯化,制备多克隆抗体并进行抗血清特异性分析。应用RT-PCR、q PCR及Western-blot从转录、翻译水平上分析RPS18基因在家蝇不同发育时期和三龄幼虫不同组织中的表达情况。结果表明,RPS18基因ORF全长459 bp,编码152个氨基酸,理论分子量为17 590.5 Da,等电点为10.48;将构建的重组质粒转入大肠杆菌Transetta(DE3)中,纯化得到RPS18蛋白;将该纯化蛋白免疫大白兔获得多克隆抗体,His单抗鉴定及抗血清特异性分析显示,其均可见单一条带;RT-PCR、q PCR及Westernblot分析表明,RPS18基因在家蝇不同发育时期及幼虫不同组织均能够稳定表达;综合分析表明,该基因在家蝇不同发育时期及幼虫不同组织均保持较好的表达稳定性。
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- 关键词:家蝇内参基因原核表达
- 一种有机肥生产线
- 本实用新型公开了一种有机肥生产线,包括底料处理间、装料系统、培养间、加料系统、分离系统和有机肥生产系统,底料处理间与装料系统连接,装料系统通过电动堆高机与培养间连接,加料系统设于培养间内,培养间通过电动堆高机与分离系统连...
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- 文献传递
- 一种用于生产蝇蛆的分离生产线
- 本实用新型公开了一种用于生产蝇蛆的分离生产线,包括送出升降架、物料盆传输装置、工作台、振动下料装置、支撑装置、物料传输分层装置和筛网装置,物料盆传输装置设于工作台上端,送出升降架设于物料盆传输装置的一侧,物料盆传输装置的...
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- 文献传递
- 家蝇GNBP3基因克隆及感染白色念珠菌后的表达被引量:4
- 2017年
- 对家蝇GNBP3基因进行克隆及生物信息学分析,并对该基因在感染白色念珠菌Candida albicans后的表达情况进行研究。从构建的家蝇Musca domestica幼虫c DNA质粒文库中筛选到GNBP3基因,克隆并运用生物信息学方法对该基因及其编码蛋白进行预测和分析。白色念珠菌注射感染家蝇幼虫并收集标本,逆转录,通过荧光定量PCR检测感染样本中GNBP3基因的表达情况,结果进行统计学分析。研究结果表明,GNBP3基因ORF全长1473 bp,编码490个氨基酸,理论分子量为55.8 k Da,等电点为6.85;感染后不同时间点,感染组与对照组比较,在3 h、12 h、36 h、48 h GNBP3 mRNA的表达明显增高,两组比较有显著性差异(P<0.05),而24 h表达差异性最小;感染后不同组织中感染组与对照组比较,3 h和12 h时,在体壁、血淋巴、脂肪体中的表达量升高,具有显著性差异(P<0.05);24 h时,在血淋巴中的表达量较对照组高,而在唾液腺和脂肪体中的表达量呈下降趋势,均具有显著性差异(P<0.05);48 h,在血淋巴和脂肪体中表达量较对照组高,在中肠的表达量较对照组低,均具有显著性差异(P<0.01)。成功克隆GNBP3基因且在家蝇感染白色念珠菌后GNBP3的表达水平随时间的推移呈现先升高后降低再升高的趋势,在各组织中以在免疫组织(血淋巴、脂肪体)中的表达显著增高,推测其在真菌识别过程中发挥潜在作用。
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- 关键词:实时荧光定量PCRMRNA水平家蝇
- 一种工业化有机肥生产线及生产有机肥的工艺
- 本发明公开了一种工业化有机肥生产线及生产有机肥的工艺,包括灌装生产线(1)、培养间(4)、分离系统(6)和有机肥生产系统(13),灌装生产线(1)通过转运小车(3)与培养间(4)连接,培养间(4)通过转运小车(3)与分离...
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- 文献传递
- 一种有机肥生产线及生产有机肥的工艺
- 本发明公开了一种有机肥生产线及生产有机肥的工艺,包括底料处理间、装料系统、培养间、加料系统、分离系统和有机肥生产系统,底料处理间与装料系统连接,装料系统通过电动堆高机与培养间连接,加料系统设于培养间内,培养间通过电动堆高...
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- 文献传递
- 一种有机肥生产线及生产有机肥的工艺
- 本发明公开了一种有机肥生产线及生产有机肥的工艺,包括底料处理间、装料系统、培养间、加料系统、分离系统和有机肥生产系统,底料处理间与装料系统连接,装料系统通过电动堆高机与培养间连接,加料系统设于培养间内,培养间通过电动堆高...
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- 文献传递
- 家蝇生态转化处理蔗糖工业废弃物的方法
- 本发明公开了一种家蝇生态转化处理蔗糖工业废弃物的方法,包括:蝇种采集和清洁饲养驯化、甘蔗渣转化适应蝇株的诱导与稳定、纤维素酶高表达蝇株的选育、纤维素酶、脂肪酶双高表达蝇株的诱导、蔗糖工业废弃物蝇蛆生物转化预处理、工业化甘...
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- 文献传递
- 低耗高收率高纯甲壳素的生产方法
- 本发明公开了一种低耗高收率高纯甲壳素的生产方法,包括取鲜蛆洗净,滤干,破碎,水洗蛆皮,分段加入碱液两次脱蛋白质,退色,分段加入草酸两次除锰,纯化,干燥等过程。由于酸碱的分段加入和重复使用既保证了蛋白质和脂肪及钙质的有效除...
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- 文献传递
- 促进家蝇集约化产卵的方法及所用的养殖饲料和接卵料
- 本发明公开了一种促进家蝇集约化产卵的方法及所用的养殖饲料和接卵料,其中,按重量百分比计算:成蝇养殖饲料由豆粉10%-30%、干蛆粉5%-15%、奶粉10%-30%、白糖20%-60%、植物药渣1%-10%和桔梗1%-5%...
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- 文献传递