暨南大学医学院眼科研究所
- 作品数：35 被引量：61H指数：4
- 相关作者：齐文娟杨艳更多>>
- 相关机构：郑州大学人民医院广州医科大学基础医学院温州医科大学附属第二医院、育英儿童医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生文化科学生物学理学更多>>
- 视网膜中央动静脉阻塞合并贫血一例被引量：1
- 2013年
- 患者，女，38岁，左眼视力下降1d就诊。3d前头部不慎撞至桌角，当时神志清、无视物模糊，未曾处理。入院前1d自觉左眼视力明显下降，无疼痛、虹视、恶心、呕吐等症状，次日晨起后左眼视物不见。患者有贫血病史30年，曾行胆囊切除术和部分肝切除术，既往有全身多处骨折史、肾结石病史，无高血压、糖尿病病史，否认眼部外伤史。眼部体征：视力右眼1．0，
- 谭美华陈建苏刘引招志毅
- 关键词：贫血部分肝切除术视力下降胆囊切除术视物模糊眼视力
- 真核基因重组Sox2及其在小鼠角膜基质细胞中的表达
- 2013年
- 目的基因重组构建具有穿膜活性的核转录因子Sox2真核表达系统,将其转染至小鼠角膜基质细胞,检测其在小鼠角膜基质细胞中的表达。方法利用重叠延伸PCR法重组目的基因Sox2-PTD构建质粒,测序检测重组DNA序列是否克隆正确。确定正确序列后将其转染至小鼠角膜基质细胞。倒置显微镜下观察细胞生长情况,转染后约10d免疫荧光化学鉴定其表达。结果成功构建质粒PCDNA3.1-Sox2-PTD;4个转录因子测序结果显示:Sox2基因测序结果与基因模板序列100%一致;成功转染至小鼠角膜基质细胞中;荧光显微镜下观察可见,Sox2-PTD在细胞浆和细胞核内均有表达,主要分布在细胞核内。结论成功构建核转录因子的真核表达系统,可转染至小鼠角膜基质细胞并引起细胞形态和表型的变化,为真核重组外源蛋白诱导角膜基质细胞转化为多能干细胞奠定基础。
- 李晓霞袁军陈建苏
- 关键词：SOX2角膜基质细胞
- 房水对培养的角膜基质细胞的影响被引量：3
- 2010年
- 目的观察房水对角膜基质细胞生长的作用。方法将新西兰大白兔的角膜去除后弹力层、内皮层和上皮层后,得到基质层,用组织块培养法体外培养角膜基质细胞。在实验组的培养基中加入10%房水,对照组使用常规培养基培养。通过CCK8实验测得角膜基质细胞的吸光度(A)值以分析细胞增生的情况。分别在培养基中加入2.5%、5%、10%、15%、20%的房水,用明胶酶谱法检测基质金属蛋白酶(MMPs)的活性。结果倒置显微镜观察可见培养的角膜基质细胞呈多角形或树枝状,与对照组相比,实验组的细胞生长状态良好,培养的角膜基质细胞数量明显增加。明胶酶谱法显示实验组的条带比对照组清晰。实验第1～5天分别测角膜基质细胞的A值,实验组的检测条带明显强于对照组,>10%的房水培养组检测的条带明显强于2.5%、5%房水培养组。CCK8检测表明,培养1～5d实验组的角膜基质细胞A值明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论房水作用于角膜基质细胞后,可促进角膜基质细胞的生长,10%房水对体外培养角膜细胞有促细胞增生的作用。
- 唐光霞陈建苏徐锦堂吴连胜潘红卫林熙唐建军
- 关键词：房水角膜基质细胞细胞培养
- 白细胞介素-1基因的多态性与白塞病易感关联性的Meta分析
- 2014年
- 背景白细胞介素-1（IL-1）α-889C／T、IL-1B-511C／T、＋3962C／T和IL-1Ra-2是IL-1基因的不同位点。IL-1基因的多态性与白塞病之间的潜在相关性已经在不同的人群中进行了研究，但研究结果存在一定的争议。目的对已发表的关于IL-1基因多态性与白塞病之间关联性的文献进行二次分析，探讨儿IL-1基因多态性是否增加白塞病的易感性。方法按照检索策略检索2013年5月31日之前公开发表的关于 IL-1基因多态性与白塞病之间关联性的研究文献，检索途径包括Medline、EMBASE、CochraneLibrary、Webofknowledge、GoogleScholar、中国知网和万方数据库，发表语种限于英文和中文，研究设计包括病例对照研究。筛选出符合标准的文献，根据Newcastle-OttawaScale（NOS）量表（共9分）评价纳入文献的研究质量。分析IL-1α-889TT基因型、IL-1β-3962C等位基因、IL-1p-511T表型基因和IL-1Ra-2等位基因与白塞病易感性间的关联性，用RevMan5．0统计学软件进行统计学分析。对7篇研究中异质性低（12〈50％）的指标采用固定效应模型评价各指标的合并效应量，异质性高（12〉50％）的指标用随机效应模型评价合并效应量。结果共检索到相关文献370篇，经过阅读摘要和全文共纳入7篇符合纳入标准的研究文献，NOS量表评分均≥8分。7篇文献共包括白塞病患者499例和正常人708名，结果发现IL-1β-3962C等位基因多态性增加白塞病的风险（OR=1．41，95％CI：1．06～1．88，P=0．02），IL-1α-889TT表型基因的多态性降低白塞病的风险（OR=0．61，95％CI：0．40～0．92，P=0．02），而IL-1B-511T等位基因（OR=0．84，95％CI：0．58～1．23，P=0．38）和IL-1Ra-2等位基因（OR=1．25，95％CI：0．50～3．14，p=0．63）与白塞病之间均无明显关联。结论儿IL-1基因多态性与白塞病易感性之间可能具有一定的相关性，但还需要大样本量的临床研究进�
- 吴静崔裕波侯光辉王超张日佳祁冰
- 关键词：白塞病白细胞介素-1基因多态性META分析
- 灌注动物细胞培养及其在组织工程中的应用进展被引量：1
- 2010年
- 灌注培养方法是在传统的培养方法基础上发展起来的新的动物细胞的培养方法。目前,组织工程方面有关灌注培养条件下细胞体外生长的研究表明,灌注培养提供的动态培养环境有利于细胞体外生长和增殖,可以得到与活体组织相似的体外组织,用灌注培养所得的细胞或组织进行体内移植的成功率较高。灌注培养方法为组织工程的研究和应用开辟了新的前景,本文对灌注动物细胞培养及其在组织工程中的应用研究进展进行综述如下。
- 唐光霞陈建苏
- 关键词：灌注培养细胞培养
- 琼脂糖凝胶的光学特性
- 2016年
- 为了研究应用于生物细胞打印的琼脂糖凝胶的光学特性,将不同比例的琼脂糖粉末与蒸馏水混合后加热,溶解冷却形成不同浓度的琼脂糖凝胶。测量琼脂糖热溶液冷却过程中55℃时的琼脂糖溶液的折射率及琼脂糖凝胶的折射率。通过对比细胞培养液的折射率,获得作为生物打印基质材料和生物支架的琼脂糖凝胶最佳浓度为0.786%。测量琼脂糖凝胶的可见、近红外透射光谱及衰减全反射红外吸收光谱,结果显示琼脂糖凝胶在400~1 100 nm波段没有特征吸收峰,而且最大吸收只有0.171Abs;在红外波段琼脂糖凝胶的吸收特性与细胞培养液基本相同,细胞培养液在2 966 cm-1处的特征吸收峰是培养液独有的。对琼脂糖凝胶表面的激光散射特性进行研究,结果表明,440 nm激光的散射最强,532 nm激光散射最弱;琼脂糖凝胶浓度越小,散射越强。
- 张仁梅张军谢梦圆陈建苏
- 关键词：琼脂糖热冲击
- 角膜内皮细胞体外原代培养及生物学鉴定被引量：1
- 2014年
- 背景角膜盲是中国主要的致盲眼病之一。随着组织工程技术的进步和发展，组织工程移植膜的构建将为角膜病的治疗开辟新的途径，而选择和培养理想的种子细胞是工程化角膜的基础。目的采用胰蛋白酶消化法体外分离培养角膜内皮细胞（CECs）并进行常规培养，观察并鉴定细胞体外生长的生物学特性，为实验研究和工程化角膜的构建提供种子细胞。方法3月龄新西兰白兔12只，摘除新鲜眼球，光学显微镜下将兔角膜带有内皮细胞的后弹力层面完整分离，胰蛋白酶消化、纯化后得到CECs，进行体外培养。倒置显微镜下观察细胞的形态变化；锥虫蓝染色法计算培养细胞的存活率并绘制细胞生长曲线；采用CM—Dil染色法进行细胞标记传代；采用苏木精一伊红染色法观察培养细胞的形态，并用免疫组织化学染色法观察神经元烯醇化酶（NSE）抗体的表达，对细胞进行细胞表型鉴定；扫描电子显微镜下观察培养细胞的表面结构；采用免疫荧光染色法观察细胞质紧密连接蛋白1（ZO-1）的表达。结果揭取带有内皮细胞的后弹力层联合酶消化法可快速获得大量纯化的CECs，且快速贴壁生长并增生，体外培养5～7d即融合形成单层，呈铺路石样排列，培养细胞的存活率为95％；CM—Dil染色显示培养的CECs呈现红色环状的荧光颗粒，标记率达90％以上，连续传代后仍显示红色荧光。苏木精一伊红染色显示培养细胞呈多角形，核圆，细胞质中NSE呈棕黄色染色。扫描电子显微镜下可见细胞表面有丰富的微绒毛，细胞间足突相互连接，细胞体积大而扁平；荧光显微镜下可见细胞间ZO-1呈绿色荧光。结论通过完整分离角膜后弹力层联合胰蛋白酶消化法可体外培养、纯化和传代兔CECs，传2～3代的细胞具有CECs的生物学特性，有望为组织工程化角膜内皮移植膜的构建提供优质�
- 祁冰侯光辉季青山崔裕波吴静
- 关键词：角膜内皮细胞细胞标记
- 肠道真菌菌群失调对小鼠角膜创伤修复的影响
- 2019年
- 目的:观察抗真菌药物诱导的肠道真菌菌群失调对小鼠角膜创伤修复的影响。方法:选用健康无眼疾的C57BL/6J雄性小鼠,将实验小鼠随机分为两组:对照组和两性霉素B组。对照组给予正常饮食,两性霉素B组给予添加两性霉素B的饮食,以诱导小鼠肠道真菌菌群失调,4wk后对两组小鼠角膜进行上皮创伤,使用荧光素钠染色角膜创伤区域,动态观察上皮修复情况,并利用免疫荧光染色观察角膜上皮细胞、炎症细胞变化,通过HE染色观察角膜厚度的变化。结果:两性霉素B组与对照组相比,再上皮化速度和创伤修复延迟,炎症细胞明显减少,角膜上皮厚度变薄。结论:肠道真菌菌群失调延迟角膜创伤的修复,降低角膜创伤后的炎症反应。
- 贾路路路顶立刘素素陈雨晴李志杰李志杰
- 关键词：角膜创伤修复炎症反应
- 高糖饮食对小鼠真菌性角膜炎的影响
- 2019年
- 目的探究高糖饮食对小鼠真菌性角膜炎的影响。方法选取健康无眼疾的雄性C57BL/6J小鼠78只,随机分为高糖饮食组和模型对照组,每组36只,模型对照组给予正常饮用水,高糖饮食组给予含体积分数10%果糖溶液,每2 d测量两组小鼠体质量及血糖,10 d后建立真菌性角膜炎模型。造模后24 h、36 h、48 h、72 h、96 h、120 h、168 h裂隙灯显微镜下对角膜进行临床评分并拍照。处死小鼠后,取角膜组织进行HE染色和PAS染色;测定角膜内中性粒细胞和巨噬细胞浸润体积。利用酶联免疫吸附实验对小鼠角膜内的白细胞介素-1β含量进行测定。结果造模后0～14 d,两组小鼠体质量与血糖差异均无统计学意义(均为P>0.05)。造模后24 h、36 h、48 h、120 h、168 h,高糖饮食组小鼠角膜临床评分均明显高于模型对照组,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。高糖饮食组小鼠角膜穿孔率79.5%,高于模型对照组的40.9%,差异有统计学意义(P=0.000)。造模后各时间点,高糖饮食组中性粒细胞浸润体积均高于模型对照组,差异均有统计学意义(均为P=0.000)。造模后72 h、96 h、120 h、168 h,高糖饮食组巨噬细胞浸润体积均高于模型对照组(均为P=0.000)。角膜组织病理学检查结果示,高糖饮食组炎症反应更重,角膜组织破坏更早且更为严重。造模后24 h、48 h高糖饮食组白细胞介素-1β含量均明显高于模型对照组(均为P<0.05)。结论高糖饮食加重了真菌性角膜炎感染的严重程度,增强了中性粒细胞、巨噬细胞的趋化,促进了IL-1β的分泌。
- 陈雨晴简守珺岳娟刘素素李志杰王丽娅
- 关键词：高糖饮食真菌性角膜炎中性粒细胞巨噬细胞
- 体外细胞组织重建中共培养技术的应用被引量：2
- 2012年
- 细胞共培养体系在维持细胞基本结构和性状的基础上,通过两种或多种细胞组织的相互作用,使体内外环境尽可能相吻合,弥补了单层细胞培养的缺陷,有利于构建更加接近生理状态的重建体外细胞组织,被广泛应用于现代细胞研究,成为角膜、牙周、软骨、心血管以及神经细胞组织等体外构建的重要技术应用。在干细胞研究中,多孔膜两侧直接接触共培养日益受到重视,三维细胞共培养将是未来发展的方向。
- 谭美华陈建苏
- 关键词：细胞共培养干细胞
