清华大学生命科学学院基因组研究所 作品数:19 被引量:63 H指数:5 相关作者: 王兆绰 朱姗姗 更多>> 相关机构: 北京大学基础医学院 北京大学基础医学院生理学与病理生理学系 中国科学院西北高原生物研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 中国科学院知识创新工程 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 建筑科学 文化科学 更多>>
T细胞因子4显性负调节基因ΔNTCF4对肾癌细胞GRC-Ⅰ生物学性状的影响 被引量:2 2006年 目的观察T细胞因子4(TCF4)显性负调节基因ΔNTCF4对肾癌细胞GRC-1生长、增殖等生物学行为的影响。方法将缺失N末端的TCF4显性负调节基因真核表达质粒pCDNA3-ΔNTCF4和pCDNA3空载体分别转染肾癌细胞GRC-Ⅰ,建立稳定表达ΔNTCF4基因的肾癌细胞系GRC-Ⅰ/ΔNTCF4和空载体细胞系GRC-Ⅰ/Mock,光镜下观察细胞生长状态,绘制生长曲线,MTT法检测细胞增殖活性,免疫细胞化学和Western blot检测Wnt信号通路下游靶基因C-Myc、Cox-2蛋白表达水平。结果稳定表达ΔNTCF4基因的GRC-Ⅰ/ΔNTCF4细胞形态由圆形变为长条状,细胞生长速度变慢,核分裂相减少,出现向正常肾小管细胞逆转的趋势;GRC-Ⅰ/ΔNTCF4细胞增殖活性受到明显抑制,与GRC-Ⅰ对照细胞相比抑制率达11.2%~35.5%(P<0.05),而GRC-Ⅰ/Mock与对照细胞相比差异无统计学意义;表达显性负调节基因的肾癌细胞系GRC-Ⅰ/ΔNTCF4中Cox-2蛋白表达水平显著降低。结论转染T细胞因子4显性负调节基因ΔNTCF4能部分抑制肾癌细胞GRC-Ⅰ生长,降低Wnt通路靶基因C-Myc、Cox-2表达,为通过阻断Wnt信号通路对肾癌进行细胞信号治疗提供了实验依据。 叶雄俊 林桂亭 常智杰 张志文 辛殿祺 王晓峰 郭应禄关键词:肾肿瘤 T细胞因子4 一种新的氧合球蛋白——神经球蛋白 被引量:1 2003年 神经球蛋白 (neuroglobin ,NGB)是最近发现的一种新的可以和氧可逆性结合的血红蛋白家族成员 ,主要表达于脊椎动物的脑中 .NGB蛋白是由 151个氨基酸组成的单体蛋白 ,有着古老的进化起源 .迄今为止 ,已证明它具有储存、转运氧气和保护神经细胞的功能 .NGB基因的表达调节至少有两条信号转导途径参与 . 赵同标 常智杰 赵新全关键词:氧气 神经细胞 ATF5与TCF4相互作用及其对Wnt信号通路的调控 被引量:4 2003年 应用酵母双杂交技术, 鉴定Wnt通路关键信号分子TCF4与cAMP效应元件结合蛋白家族新成员-- 激活转录因子5(ATF5)之间的相互作用, 酵母表型分析和β-半乳糖苷酶(β-gal)活性测定结果发现, 两者的作用位于ATF5蛋白C端含有碱性亮氨酸拉链(bZIP)区域(162~ 282 aa). 通过受TCF启动的荧光酶报告系统分析ATF5对Wnt信号通路的影响, 结果显示ATF5蛋白C端能进一步加强TCF4对Wnt通路的激活效应. 由此提示, ATF5可能是Wnt通路下游信号的辅助激活因子(co-activator), 它能协同β-连环蛋白/TCF4参与Wnt信号通路的激活. 叶雄俊 张志文 张新军 林桂亭 熊世勤 金桂花 韩亮 黄世思 陈培拉 艾军魁 辛殿祺 郭应禄 常智杰关键词:TCF4 WNT信号通路 蛋白质 相互作用 基因调控 激活转录因子 小鼠STAT3基因干扰质粒的构建及其效果鉴定 2006年 目的构建小鼠STAT3基因的特异性RNA干扰质粒,并鉴定其在细胞水平的抑制效果。方法采用DNA载体介导的RNA干扰技术构建小鼠STAT3基因的特异性RNAi质粒(pBS/U6/STAT3siRNA),并通过RT PCR、免疫印迹、免疫细胞化学染色等技术对pBS/U6/STAT3siRNA的抑制效率进行鉴定。结果经双酶切鉴定筛选出4个阳性干扰质粒,分别转入293T细胞后均可明显降低STAT3的表达,尤以靶向(+2334~+2351)位点的质粒干扰效率最高,达70%。结论小鼠STAT3基因的特异性干扰质粒(pBS/U6/STAT3siRNA)能从蛋白及mRNA水平上特异和高效地抑制STAT3基因的表达。这种DNA载体介导的双链RNA干扰质粒为进一步探究STAT3与胚胎发育的相关功能提供一种有效的研究工具。 星懿展 李泽桂 李红丽 李铁石 丁震宇关键词:RNAI 小鼠 干扰质粒 高原鼠兔低氧诱导因子-1α的初步研究 被引量:5 2003年 Hypoxia induced factor 1 plays a key role during the cell hypoxia tran sduction Hypoxia induced factor 1α (HIF 1α) is a functional subunit of hyp oxi a induced factor 1 Plateau pika ( Ochotona curzoniae ),which is a Qinghai Tibet plateau native animal lived above 3 000 m,has high ratio of oxygen util ization to adapt to plateau hypoxia environments One fragment of the coding region of cDN A sequence of plateau pika HIF 1α was obtained by RT PCR technique using a deg en eracy PCR primer based on previously reported cDNA sequence in human, cattle, ho use mouse and Norway rat HIF 1α gene It was directly inserted into the vecto r pMD18 T DNA sequencing proved that it was highly homology with human (91%), c at tle (91%), house mouse (89%) and Norway rat (89%) HIF 1α gene The study prov id es basic important information for the HIF 1α cDNA whole sequence cloning of p lateau pika and its functional 赵同标 赵新全 常智杰 朱姗姗 赵伟 孙平 徐世晓关键词:高原鼠兔 红细胞生成素 增强子 PI负责模式下分子生物学实验室运行管理浅析 被引量:5 2004年 本文探讨了首席研究员负责模式下的分子生物学实验室运行中,在人力资源、财务与物流、质量控制和信息系统管理几个方面的特点,存在的问题和解决方法,目的在于提高实验室运行效率,整合有限研究资源,提高行业竞争力。 郝新保 常智杰关键词:分子生物学 实验室管理 首席研究员 人力资源 相异物种同源基因cDNA的快速克隆 被引量:4 2003年 介绍了一种结合生物信息学数据库的比较分析 ,在系统发生相近物种的核酸保守区设计PCR引物 ,通过RT PCR和RACE方法 。 赵同标 赵新全 常智杰 赵伟 孙平 徐世晓 宋娅莉关键词:同源基因 CDNA 克隆 PCR引物 T淋巴细胞的信号转导 2002年 T淋巴细胞是构成机体细胞免疫反应的中心环节 ,而 T细胞的激活、增殖、分化及凋亡均与细胞内引发的一系列信号通路直接相关。本文就信号转导在 T细胞激活、增殖和凋亡中的作用及其研究进展作一述评。 刘力 傅新元关键词:T淋巴细胞 信号转导 蛋白激酶 STAT3在小鼠胚胎神经系统发育中的表达 被引量:4 2005年 目的 观察STAT3在小鼠胚胎神经管发生和神经上皮分化迁移阶段的时空表达规律,为探讨STAT3在胚胎神经系统发生和发育过程的作用及可能机制提供形态依据。方法 采用全胚胎原位杂交技术和免疫组织化学技术,观察STAT3在神经胚形成和神经上皮分化迁移阶段的表达。结果 ①E8.75d整个鼠胚几乎没有观察到STAT3mRNA的表达,在E9.5d ,STAT3mRNA在前脑泡急剧增多,到E10 .5d ,阳性信号出现在中脑泡,E11.5d时在后脑泡的一狭窄区域有STAT3mRNA的表达;②E13 .5d ,在侧脑室周围即未来大脑新皮层区域、间脑、发育中的视网膜、第四脑室周围的脑组织(未来的脑桥)、脊髓、三叉神经节和背根神经节C1均可观察到较强的STAT3蛋白阳性信号,E14 .5d和E15 .5d时,大脑皮层、间脑、视网膜、第四脑室周围以及发育中的脑桥和脊髓等部位观察到中等强度的STAT3蛋白表达。结论 STAT3可能参与了神经管的关闭和神经上皮的分化和迁移。 纪华 李泽桂 马路 丁震宇 蔡文琴 傅新元 常智杰 刘力关键词:STAT3 神经上皮 清华大学生物馆IVC动物房的工艺设计 清华大学生物系基因组研究所,在校内生物馆第一层改建SPF动物实验设施一处,面积约130 m2。文章介绍了作者的设计思路及改建实施方案、IVC笼具的特点及使用要求,同时还总结了改建实验动物设施的经验。 王兆绰 王银银 罗金环 常智杰